不同保存温度和反复冻融次数对鸭疫里默氏杆菌DNA的影响

为探究不同保存温度和反复冻融次数对鸭疫里默氏杆菌DNA的影响,研究了不同保存温度和反复冻融次数对不同浓度梯度组鸭疫里默氏杆菌DNA样品浓度及荧光定量Ct值的影响.根据OmpA基因保守序列设计了鸭疫里默氏杆菌荧光定量PCR特异性引物,产物大小为112 bp,退火温度为56℃.荧光定量循环阈值Ct值随DNA浓度的下降而升高.常温保存的DNA样品7 d后出现明显降解,保存温度为4、-20、-80℃时则对荧光定量PCR检测效率影响不大.较高浓度的A、B组DNA样品Ct值未受冻融次数的影响,而浓度较低的C、D组则在冻融21次后Ct值明显升高.研究建立了鸭疫里默氏杆菌荧光定量PCR鉴定方法,Ct值随DNA浓度的下降而升高,DNA样品应低于4℃保存,低浓度DNA应避免反复冻融.     

鸭坦布苏病毒病、鸭圆环病毒病与鸭疫里默氏杆菌混合感染的诊断

为确诊贵州省三穗县某鸭场62日龄花边鸭发病原因,通过临床症状观察及对采集的10只病鸭进行病理剖检、细菌分离鉴定和病毒PCR/RT-PCR检测。结果表明:分离到4株鸭疫里默氏杆菌,对头孢类药物高度敏感,对大环内酯类和氨基糖苷类药物耐药;病毒特异性引物扩增出鸭坦布苏病毒和鸭圆环病毒条带。该鸭场病鸭由鸭坦布苏病毒、鸭圆环病毒和鸭疫里默氏杆菌混合感染所致。     

猪弓形虫病的ELISA诊断与防治

<正>弓形虫又称弓形体病,病原是刚地弓形虫,是一种可寄生于人和多种动物体内、能引起多种人畜共患的原虫病,常为地方性流行,感染率很高〔1~2〕。事实上,绝大部分的猪感染弓形虫后终身带虫但并不表现临床症状〔3〕。该病近年来在猪场广泛流行,给生猪和畜牧兽医工作人员带来潜在威胁。2014年,贵阳市南明区永乐乡白杨村某商品猪场饲养300头猪,在1周内猪群发病共死亡10多头,发病     

鸡肠炎沙门氏菌病的诊断与防治

2010年6月,在贵州省贵阳市某养鸡场暴发以病鸡精神沉郁、肝脏呈黄绿色、心包积液及表面有黄白色纤维素性渗出物为特征的疾病,经过临床症状观察、病理解剖及实验室诊断,诊断为鸡肠炎沙门氏菌病。药敏特性试验表明分离到的鸡肠炎沙门氏菌对氟哌酸、链霉素敏感或高度敏感。通过采取综合有效的防治措施，鸡场疫病得到有效控制。     

铜与枯草芽孢杆菌协同对产蛋期种鹅生产性能、空肠组织发育和微生物菌群结构的影响

本试验通过研究铜与枯草芽孢杆菌协同对产蛋期种鹅空肠组织发育和微生物菌群结构的作用，探索在产蛋期种鹅日粮中添加枯草芽孢杆菌条件下铜的添加量。选择46周龄体况相近的产蛋期种鹅120只，随机分为6组，每组4个重复，每个重复5只（1公4母），采用2×3因子随机试验设计，枯草芽孢杆菌为125、250 mg/kg 2个添加水平，铜为2、4、6 mg/kg 3个添加水平。Ⅰ～Ⅲ组的铜添加水平为2、4、6 mg/kg,BS添加水平为125mg/kg,Ⅳ～Ⅵ组的铜添加水平为2、4、6mg/kg,BS添加水平为250mg/kg。试验期70 d。对种鹅空肠绒毛高度、隐窝深度进行测定，计算绒隐比；对种鹅盲肠微生物进行16S rDNA多样性检测。结果表明：铜与枯草芽孢杆菌协同对产蛋期种鹅的产蛋率、料蛋比及日采食量影响不显著，对空肠绒毛高度影响显著（P<0.05），对空肠隐窝深度、绒隐比影响极显著（P<0.01）。对样品Alpha多样性进行分析，试验样品的OTU统计覆盖率深度指数值Coverage,Ⅰ～Ⅵ组均大于0.999，表明试验样本中物种被测出的概率极高，样本结果代表了样本中微生物的真实情况。铜与...     

牛结核病PCR诊断试剂盒的检测试验

应用自制牛结核病PCR诊断试剂盒对贵州省某奶牛场共计150份血样、奶样标本中结核分枝杆菌进行检测,结果显示:PCR试剂盒对111份奶样标本进行检测,8份为阳性,阳性检出率7.2%;PCR试剂盒对39份血样标本的检测,12份为阳性,阳性检出率为30.76%。本试验共计检测贵阳附近某奶牛场1 200头份奶牛,先采用PPD检测牛结核病阳性牛和可疑牛,再用PCR法进行检测,PCR检出阳性牛共计20头份,阳性检出率为1.67%;PPD检出阳性牛24头份,检出率为2%。总之,PCR试剂盒在检测牛结核病不同标本中显示出快速、特异等优点,这为今后牛结核病的检测工作提供了一条新途径。     

仔猪大肠杆菌的分离及PCR检测

正猪大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌菌所致的一种仔猪的传染病,严重影响仔猪成活率。其临床表现主要为仔猪腹泻(黄痢、白痢)和水肿病。具有发病迅速、病程较短、发病率和死亡率均高的特点~([1])。该病对规模化集约化养猪业危害较大,给猪场带来较大的经济损失~([2])。笔者于2015~2017年开展了细菌分离和分子学(PCR方法)工作,为贵州省猪腹泻和水肿病大肠杆菌的临床鉴定和流行病学调查提供了可靠     

1～14日龄三穗鸭能量需要量的研究

试验旨在研究饲粮表观代谢能水平对1～14日龄三穗鸭生长性能的影响,以估测三穗鸭的表观代谢能需要量。采用单因子完全随机试验设计,选取336只健康1日龄雄性三穗鸭,随机分为6个处理,每个处理7个重复,每个重复8只鸭。采用玉米-豆粕型基础饲粮,表观代谢能水平分别为10.92、11.38、11.80、12.26、12.68、13.14MJ/kg。试验期为1～14日龄。结果表明:随着表观代谢能水平的提高,1～14日龄三穗鸭平均日采食量和耗料增重比呈线性降低(P<0.05),且表观代谢能到达11.80 MJ/kg时,耗料增重比和平均日采食量基本到达平台期;饲粮表观代谢能水平对1～14日龄三穗鸭末重和平均日增重均无显著影响,呈线性和二次曲线升高趋势(P>0.05),饲粮表观代谢能水平对总表观代谢能摄入无显著影响。由此可见,饲喂高表观代谢能饲粮可有效改善1～14日龄三穗鸭的饲料转化效率;以耗料增重比为评价指标,利用直线-折线模型估算的1～14日龄三穗鸭表观代谢能的需要量为11.59 MJ/kg。     

副猪嗜血杆菌PCR检测方法的建立与初步应用

为了解副猪嗜血杆菌病在贵州对猪群的危害和流行规律、进一步开展副猪嗜血杆菌病的防治研究提供参考依据,特进行副猪嗜血杆菌PCR检测方法的建立与初步应用研究。根据副猪嗜血杆菌（HPS）16S rRNA基因序列设计1对引物,通过优化组合试验,对贵州省分离的HPS进行PCR扩增,扩增出长为650bp的目的基因片段,而大肠埃希氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、猪链球菌、葡萄球菌等扩增结果为阴性。采用该方法对贵州发病猪群中350头疑似病例进行PCR检测,检出率为8％～49％。该方法检测副猪嗜血杆菌敏感性高、特异性好,可用于副猪嗜血杆菌的快速诊断。     

山羊焦虫病的诊断与防治

焦虫病易感动物包括绵羊、山羊和南江黄羊,发病在畜品种和性别间无明显差异.该病发病率和死亡率高,发病死亡率可高达46～100％.该病的发生和流行在养羊生产中普遍存在,它的发生给养羊生产带来了极大的威胁和危害. 1 发病情况