猪附红细胞体病研究进展

附红细胞体病 ( Eperythrozoonosis)是由附红细胞体 (Eperythrozoon ,简称附红体 )寄生于人畜红细胞表面、血浆和骨髓而引起的一种人畜共患传染病 ,又称红皮病、黄疸性贫血、类边虫病、赤兽体病。临床上以发热、贫血、黄疸等为特征。1950年由Splitter首次发现猪附红细胞体病 (EperythrozoonSuis) ,在我国 ,许耀成等(1982)首次在江苏南部红皮病猪血液中检查到猪附红细胞体 (E.suis)。截止目前 ,已有30多个国家和地区报告了猪附红细胞体的感染情况。1病原学1.1种属问题对附红细胞体的分类历来争议很多。1974年《伯杰细菌鉴定手册》第八版将…     

牛布氏杆菌病热酚法脂多糖抗原酶联免疫吸附试验(ELISA)的研究

采用世界动物卫生组织(OIE)推荐的热酚法提取的脂多糖(LPS)作为抗原，建立了牛布氏杆菌病的ELISA方法，对45份血清进行检测，证明本ELISA方法灵敏性较高，经阻断试验和交叉试验，证明特异性较好。同时对建立的ELISA方法进行了改进，使制备的牛布氏杆菌ELISA试验试剂盒能在4℃条件下长期保存，具有良好的稳定性和重复性。     

酶联免疫吸附试验(ELISA)三种底物的比较试验

同时应用OPD(邻苯二胺)、TMB(3，3，5，5-四甲基联苯胺)、ABTS(2，2’-连氮-双-(3-乙基苯并塞唑啉磺酸))3种底物，每种底物都分别使用S1(终止液1)、S2(终止液2)和S3(终止液3)3种终止液，做牛布氏杆菌病ELISA试验，对每种底物的作用规律进行摸索。最终确认TMB更适合作ELISA试验底物之用。     

牛结核ELISA方法的改进和优化研究

在传统ELISA基础上，对ELISA板的稳定系统、血清稀释液的显色系统、ELISA底物等流程进行了改进，建立了牛结核ELISA方法。阻断试验和交叉反应结果表明该ELISA方法具有较好的特异性；不同人多次重复试验，证明本方法的重复性好。     

重组N蛋白抗原检测PRRSV抗体ELISA的研究Ⅱ.试剂盒阴阳性临界值的测定及其与IDEXX公司试剂盒的比较

对临床上采集的899份猪血清样本。用以纯化的重组N蛋白为包被抗原建立的检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）抗体的间接ELISA进行检测．运用统计学方法摸清了检测结果的分布规律。并扣国外IDEXX公司PRRSV抗体检测试剂盒同时对460份血清样本进行检测。结果表明。2种方法的符合率为91．73％。利用TG—ROC软件确定了自制的ELISA酶标板（NP—ELISA）的临界值。并标定试剂盒的特异性扣敏感性均为92．6％。ELISA的结果判定标准是：当以血清样本L为标准参考阳性血清时，样品与阳性血清的比值（S／P）小于或等于0．4为阴性；S／P在0．4与0．5之间为可疑；S／P大于或等于0．5为阳性。与IDEXX公司PRRSV抗体检测试剂盒对临床样品的检测结果进行比较后，初步判定所建立的ELISA之所以出现较多的假阴性。可能是目前临床上出现了PRRSV欧洲型所致。     

重组N蛋白抗原检测PRRSV抗体的ELISA研制——Ⅲ.ELISA试剂盒保存条件

对应用重组N蛋白抗原检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）抗体的ELISA诊断方法的主要成分（抗原包被板、酶标二抗、阳性血清、阴性血清）及组装成的试剂盒的保存条件进行了摸索。分别用5种方法时抗原包被板处理，结果表明用真空包装机抽真空后充入氮气法处理效果最好；酶标二抗在酶标抗体保存液中保存，能很好地保持ELISA测定结果的稳定性。时其他试剂盒组成成分的保存期分别测定后，组装成试剂盒，测定试剂盒的保存期为12个月。     

重组N蛋白抗原检测PRRSV抗体ELISA的研究Ⅰ.ELISA方法的初步建立及其标化

以纯化的重组N蛋白作为包被抗原,对各种务件进行优化(如抗原的包被,作用时间及底物的选择),建立了检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的间接ELISA方法。研究结果表明．重组抗原最适包被质量浓度为1mg／L,最适包被条件为4℃过夜．血清稀释度为1：40,待检血清和酶标二抗的反应时间分别为37℃ 30min和40min．底物用TMB溶液,37℃显色10min。本研究对ELISA板的蛋白稳定剂、血清稀释液的显色系统和终止液进行了研究。用全病毒进行的阻断试验结果表明．全病毒能够阻断阳性血清与包被重组N蛋白抗原的结合反应。用此方法对几种繁殖障碍性疾病的阳性血清进行检测．均为阴性．无交叉反应．表明建立的ELISA具有很好的特异性。板内和板间重复性试验结果为．同1份血清板内各孔的变异系数和板间各次的变异系数均小于7％．表明本方法的重复性好。     

猪繁殖与呼吸综合征油乳剂灭活苗的研制及免疫效果观察

用分离鉴定的猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)强毒株研制成油乳剂灭活疫苗。对其物理性状、安全性能等指标进行检查,该制品符合新生物制品关于成品检验的要求。用该疫苗对妊娠母猪进行田间试验免疫,妊娠母猪血清抗体滴度于二免后2 8dS/P值达到0 .9以上。统计了378头免疫母猪和2 4头非免疫猪的临床表现和产仔情况,免疫猪比非免疫猪平均每窝多产活仔0 .7头,产活仔率分别为98.3%和92 .5 %。     

防治鸡白痴、禽霍乱和大肠杆菌病的中草药方剂筛选及疗效试验

鸡白痢、禽霍乱、大肠杆菌病严重危害养鸡业,常规抗菌素预防治疗易产生抗药性,我们根据中兽医扶正祛邪、标本兼治的理论筛选组建了3个中草药方剂,通过实验室抑菌实验,比较这3个中草药方剂的抑菌作用,选择效果较好的方剂进行临床治疗试验.     

复方阿莫西林可溶性粉体外抑菌及临床治疗试验

复方阿莫西林可溶性粉是由阿莫西林、环丙沙星、葡萄糖(5:5:90)复配而成的广谱抗菌药.本试验旨在验证复方阿莫西林可溶性粉对大肠杆菌、副鸡嗜血杆菌的体外抑菌效果及临床治疗效果,从而找出最佳的适用剂量和疗程.