上海及新疆地区猪戊型肝炎病毒开放阅读码框架2序列的克隆与分析

通过已建立的动物戊型肝炎病毒（Hepatitis E virus,HEV）RT-nPCR方法,检测上海地区和新疆地区猪群样品。扩增HEV开放读码框架2（open reading frame 2,ORF2）保守区,产物为507 bp。经克隆、测序,获得20株上海株、3株新疆株序列,采用分子生物学软件与47株已知HEV进行同源性、进化关系分析。结果23株序列从同源性比对和进化关系分析均属HEVⅣ型,上海株间507 bp的核苷酸同源性为94.1%~100.0%,与上海猪源（DQ450072）、日本人源Japan1（AB369690）亲缘关系近;3株新疆株507 bp间的核苷酸同源性为86.1%~98.2%,与新疆猪源China SW1（AY594199）、中国人源T1株（AJ272108）亲缘关系近;上海株与新疆株间的核苷酸同源性为82.6%~100.0%,提示上海株与新疆株间存在差异。23株HEV在时间和地域关系分析,提示不同年份的新疆株存在差异,同年份不同猪场的新疆株进化关系存在差异,不同年份、不同区县的上海株进化关系也存在差异。     

通过污染精液引发的猪伪狂犬病疫情

<正>随着种公猪人工授精技术的推广应用,为优良种公猪的高效利用创造了技术条件,但如果携带繁殖障碍性病原因子的种公猪通过污染精液散播     

RT-nPCR检测屠宰场胆汁中猪戊型肝炎病毒

戊型肝炎病毒(hepatitis E virus, HEV)基因组为单股正链RNA,约 7.5 Kb,具有3个互相重叠的开放读码框架(open reading frame,ORF).自5′末端到 3′末端依次排列着 5′UTR、ORF1、ORF3、ORF2、3′UTR以及 150～200 或更多的PolyA尾,其中ORF3与ORF1和 ORF2 部分重叠, 或完全包含在ORF2中[1].     

J亚群禽白血病多发性肿瘤的病理改变与POR检测

两个规模化商品蛋鸡场发病鸡群临床解剖显示：脚部和翅膀有血管瘤、肌肉组织内出现纤维肉瘤,肿大的肝、脾出现髓细胞瘤;经组织病理学观察符合J亚群禽白血病（ALV-J）的病理学特征。针对ALV—J保守序列P27基因设计特异引物,建立PCR方法,从出现病理改变的各组织脏器、各多发性肿瘤中以及血液中均检测到ALV-J,证实该病为以髓细胞瘤,血管瘤和纤维肉瘤为主的多发性肿瘤传染病。对扩增产物序列进行测定后,与原型株序列进行比较,核苷酸同源性为98．27％,从分子水平上证明为J亚群禽白血病,用PCR检测进一步验证J亚群禽白血病毒的感染机制和引起鸡群的病理改变。     

J亚群禽白血病多发性肿瘤的病理改变与PCR检测

两个规模化商品蛋鸡场发病鸡群临床解剖显示:脚部和翅膀有血管瘤、肌肉组织内出现纤维肉瘤,肿大的肝、脾出现髓细胞瘤;经组织病理学观察符合J亚群禽白血病(ALV-J)的病理学特征。针对ALV-J保守序列P27基因设计特异引物,建立PCR方法,从出现病理改变的各组织脏器、各多发性肿瘤中以及血液中均检测到ALV-J,证实该病为以髓细胞瘤、血管瘤和纤维肉瘤为主的多发性肿瘤传染病。对扩增产物序列进行测定后,与原型株序列进行比较,核苷酸同源性为98.27%,从分子水平上证明为J亚群禽白血病,用PCR检测进一步验证J亚群禽白血病毒的感染机制和引起鸡群的病理改变。     

初产母猪混合感染猪蓝耳病和猪圆环病毒病的诊治

2008年1月,上海某规模化猪场的一批初产母猪发生一起以早期流产为特征的传染病.特点为发病急、传播快、流产率高.发病母猪表现为腹泻、发热、呼吸困难、早期流产等症状.根据流行病学调查、临床症状、病理剖检和实验室诊断,确诊为猪蓝耳病和猪圆环病毒病混合感染.     

2015年上海地区猪链球菌的检测与分析

对2015年上海地区猪屠宰场、猪养殖场、临床病死猪开展猪链球菌的分离检测,主要包括对猪唾液、猪鼻拭子、猪场空气样本、扁桃体、肺脏等共363份进行细菌分离和PCR鉴定,共分离到猪链球菌43株,对这43株细菌开展mrp、orf2、sly、gdh、gapdh、epf、fbps 7种主要毒力因子检测,通过对病原的分析,了解上海地区猪链球菌病的疫情动态和趋势,为防控猪链球菌病提供依据.     

猪源沙门氏菌毒力基因检测及脉冲场凝胶电泳分型研究

为了解上海及周边地区猪源沙门氏菌的血清型分布、毒力基因及分子分型情况,我们对21株临床分离到的猪源沙门氏菌用沙门氏菌属诊断血清鉴定血清型;采用多重聚合酶链式反应,检测17个主要的毒力基因;应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术进行分子分型,探寻21株沙门氏菌之间的亲缘关系。结果显示,21株沙门氏菌中,19株血清型为7∶c∶5,1株为4∶i∶2,1株未鉴定出;21株沙门氏菌的17个毒力基因中检出16个,菌株之间无差别;经PFGE后,每个菌株产生13~18条电泳条带,用Bionumerics软件进行聚类分析表明,21株猪源沙门菌相似度在77%~100%,可分为2种不同的基因型,其中A型有19株、B型2株,亲缘关系较近。本次实验分离的沙门氏菌血清型以7∶c∶5为主,含有16个主要的毒力基因,A型为优势基因型。     

镰形扇头蜱唾液腺cDNA文库的构建

构建了镰形扇头蜱唾液腺 c DNA表达文库。用 Trizol试剂提取镰形扇头蜱唾液腺总 RNA,经反转录合成 c DNA第 1链 ,应用 L D- PCR扩增方法 ,合成双链 c DNA。用 Sfi 内切酶修饰此双链 c DNA,使形成两端分别带有 Sfi A和Sfi B的粘末端。经 CHROMA SPIN- 4 0 0柱纯化 ,收集 4 0 0 bp以上的双链 c DNA片段 ,将其连接于带有 Sfi A和 Sfi B末端的λ Tripl Ex2噬菌体载体 ,经体外包装后 ,以 XL1 - Blue为受体菌构建 c DNA表达文库。经测定 ,库容量为7.0 8× 1 0 5,重组率为 95 .2 %。扩增后的文库滴度为 1 .4 5× 1 0 9pfu/ m L。随机挑取 2 0个克隆转化到质粒 p Tripl Ex2 ,经抽质粒、测序得到 2个细胞色素氧化酶全长基因     

我国无土栽培技术发展现状挑战及展望

无土栽培技术在解决全球饥饿问题及提供优质农产品方面有着广阔应用前景,近年来得到了快速发展.我国无土栽培技术起步晚,但发展迅速,目前相关研究居世界前列.基于CNKI、WoS、Espacenet等数据库有关无土栽培的文献和专利,分析了我国无土栽培技术发展态势,提出未来发展中将面临投入成本高、技术要求差异化等挑战,指明了提高成果转化率、制定标准化栽培技术等发展方向.