Thr-Ser-Ser位点对猪BCL10募集功能的影响

在完整克隆出猪BCL10基因的基础上,用大引物PCR法构建3个真核表达载体：pEGFP-B（完整猪BCL10）载体、pEGFP-D（缺失CARD结构域）载体和pEGFP-P（缺失Thr-Ser-Ser位点）载体,转染猪血管内皮细胞（SU-VEC）,观察其表达情况,以此研究Thr-Ser-Ser位点（富含TS区）对猪BCL10募集功能的影响。结果显示,pEGFP-B仅在胞质中表达,并呈短棒状,而pEGFP-D与pEGFP-P则在胞质和核内均有表达。表明CARD结构域参与猪BCL10募集过程,且Thr-Ser-Ser为CARD结构域中关键氨基酸位点,这为进一步研究猪BCL10功能和作用机制奠定了基础。     

动物细胞系的毒理学研究新进展

以犬五联和猫三联疫苗制备用细胞系的染色体组型分析和致癌/致瘤性鉴定为主,对动物细胞系的毒理学研究新进展进行评述。该毒理实验旨在确定供生物制品制造用和生物工程产品生产用动物传代细胞系有无致癌/致瘤性,只有无致癌/致瘤性的细胞系方可使用。本研究在中国生物制品...     

如何有效化解村级债务

在社会主义新农村建设进程中,长期积累而未妥善解决的村级债务问题又集中凸现出来。这虽然是个老问题,但却是导致村级公共服务功能萎缩、制约农村经济发展和农民增收、影响农村稳定的突出问题。     

水貂肠炎病毒静置和旋转细胞培养最适条件的筛选

用传代细胞系成功地培养了水貂肠炎病毒,并从敏感细胞系、接毒量、接毒时机、换液时机、收毒时机及营养液成分等方面进行了优选,确定了 MEV 的最适培养糸件,证明克氏瓶静置培养与大立瓶旋转培养规律一致,转瓶转速以2/15～1/6rpm 为宜.关于水貂肠炎病毒(MEV)组织培养方法的研究,迄今未见报道。本文旨在寻找提高 MEV 增殖滴度的组织培养方法。     

猪淋巴细胞趋化因子XCL1的电子克隆和编码区序列RT-PCR验证

淋巴细胞趋化因子（XCL1）是C族趋化因子的一员,可由CD8＋T细胞、NK细胞、γδT细胞、肥大细胞等多种细胞产生,其趋化性主要作用于CD8＋T细胞和NK细胞。根据猪的EST数据库中猪XCL1基因序列,设计引物采用RT—PCR的方法从猪胸腺中扩增猪XCL1全基因序列,将其连接到pMD-19T载体上并测序,得到猪XCLl基因（GenBank登录号为EU743945）。猪XCL1cDNA大小为333bp,编码由110个氨基酸残基组成的多肽。该多肽序列含Chemokine-C、Chemokine、Chemokine-CC和SCY等功能域,与羊和人的氨基酸序列相似率分别为81．6％和68．4％。预测分析其为分泌蛋白,信号肽剪切位点在21A和22V。猪XCL1基因定位于猪4号染色体（CU468871）,基因结构与人XCL1的相似,都由3个外显子组成。该基因ORF翻译起始处基本符合Kozak规则,ORF起始密码子上游同一相位有终止密码子,ORF后有1个加尾信号,预测得到4个可能的启动子,可能性高达85％～98％。总之,通过电子克隆与试验验证,成功地克隆了猪新基因XCL1。     

水貂病毒性肠炎细小病毒无血清细胞培养灭活铝胶疫苗的安全性试验(摘要)

将水貂病毒性肠炎细小病毒(MEV)无血清细胞培养灭活铝胶疫苗接种6只小鼠(腹腔0.5ml/只)、6只豚鼠(皮下1～2ml/只.1～2次)、6只家兔(皮下1～3ml/只,2～3次).4只貉子(皮下3ml/只)和32只水貂(皮下或肌肉1～2ml/只,1～2次),以5只未注苗貂为阴性对照、3只人工感染 MEV 强毒貂为阳     

猪繁殖与呼吸综合征病毒相关猪microRNA的初步筛选

本试验旨在初步筛选出与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染相关的猪microRNA(miRNA)。采用生物信息学方法预测可能与PRRSV 3′非编码区(3′utr)产生相互作用的猪miRNA,构建PRRSV 3′utr的双荧光素酶报告基因载体psi-CHECK-utr,同时合成预测到的miRNA(ssc-miR-323、ssc-miR-105-1)及其相应的抑制物,共转染猪脐静脉血管内皮细胞系(SUVEC),检测双荧光素酶活性。结果发现,ssc-miR-323与psiCHECK-utr共转染后,荧光比率略有升高,ssc-miR-105-1与psiCHECK-utr共转染后,荧光比率降低。初步判定ssc-miR-323对PRRSV 3′utr没有抑制作用,而ssc-miR-105-1对PRRSV3′utr有一定的抑制作用。