基因扩增产物微孔杂交法检测新城疫病毒致病毒株

目的 建立一种快速，简便，敏感实用的方法以检测新城疫病毒致病性毒株。方法 在F蛋白裂解位点的两侧设计引物，引物1的5'端用生物素标记；按Aus/32强毒株F基因裂解区域设计24个碱基的寡核苷酸探针，并对之进行5'端地高辛标记。生物素化的双链扩增产物被固相的链霉亲和素捕获后经变性成为生物素化单链，然后微孔中加入地高辛标记的探针进行杂交。并用抗-地高辛-碱性磷酸酶显色。结果 所建立的方法快速，简便，特异，敏感性比琼脂糖电泳法高约3-4倍，批内CV为9.88%。批间CV为18.31%。结论 所建立的方法优化PCR条件后可作为新城疫病毒感染诊断，检疫的常规方法。