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1.
动物rDNA基因是一种GC含量较高、结构复杂的重复序列。通过结合生物信息学技术,经反复摸索后选用LAPCR法扩增莱航鸡rDNA基因重复序列,经测序鉴定最终克隆了莱航鸡的3个rDNA基因及其2个间隔序列。研究对克隆复杂DNA序列时引物设计的特别规则、反应体系的改进、DNA聚合酶的选用、循环参数的调整等进行了探索。  相似文献   
2.
珠江三角洲鳜鱼暴发流行性疾病的调查及防治措施   总被引:4,自引:1,他引:3  
通过对珠江三角洲地区鳜鱼养殖现状的调查,并对近10年来该地区鳜鱼发病情况进行了比较,详细了分析了鳜鱼暴发性疾病的发病原因和发病规律,提出了鳜鱼疾病的防治措施及对策。  相似文献   
3.
多位点基因打靶技术的鳜鱼体内实验研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
在转基因动物的研究中,一般采用随机插入的方法。基因在受体动物的基因组中随机整合,严重制约了转基因动物外源基因的稳定遗传,是转基因动物研究亟待解决的问题。转基因定点整合技术,即基因打靶技术是解决上述问题的重要途径,但是基因打靶存在打靶效率太低的问题。本研究小组已建立了体外动物细胞的多位点基因打靶技术,并构建了用于鳜鱼的体内多位点基因打靶的打靶载体,本文开展多位点基因打靶技术的鳜鱼体内实验研究。以鳜鱼rDNA基因(编码rRNA的基因)及其间隔序列作为同源重组引导序列,构建含干扰素基因的打靶载体,以其间隔序列为靶位点,针对鱼类胚胎发育特点,采用精子介导技术进行多位点基因打靶,最终获得定点整合干扰素基因的鳜鱼,并建立一套适用于动物的基因定点敲入的体内基因打靶技术。主要研究内容如下:(1)采用组织培养方法,获得鳜鱼头肾淋巴细胞和脾淋巴细胞,采用脂质体介导法使多位点基因打靶载体在鳜鱼的细胞上实行基因转移。采用正负筛选方法,利用筛选药物G418和GCV(更昔洛韦)筛选转染后的细胞两周后,对存活细胞进行DNA水平和RNA水平鉴定。结果证明了干扰素基因在鳜鱼细胞上实现了定点整合和稳定表达。(2)利用精子介导法将经线性化处理后的多位点基因打靶载体在鳜鱼的胚胎上实行基因转移。(3)根据靶位点定点整合的正负筛选原理,利用筛选药物G418和GCV筛选与富集定点整合后的阳性鱼胚或鱼苗,结果成功孵化出106尾转基因鳜鱼鱼苗。(4)培育6个月后,取20尾转基因鳜鱼进行鉴定。采用PCR、RT-PCR、测序等方法进行定点整合的鉴定。结果表明:6尾检测到已转入的基因——干扰素基因,其中有3尾实现了定点整合并表达。本研究率先将多位点基因打靶技术应用到转基因鱼的研究中,建立一套适用于鱼类的高效、安全的多位点基因打靶技术,并获得外源基因定点整合并表达的鳜鱼。  相似文献   
4.
高产奶牛繁殖力低的原因分析及解决措施   总被引:1,自引:0,他引:1  
高产奶牛繁殖力降低的原因,是一个复杂而又具有挑战性的问题,有些机理至今仍不清楚。不过,我们仍然可以从高产奶牛的营养代谢、遗产选择、母牛生理和健康状况等方面进行分析和探讨。  相似文献   
5.
奶牛的繁殖力是指根据排卵进行适时输精,母牛受精并维持妊娠的能力。理想的繁殖力是牧场管理和母牛生理相协调的结果,母牛生理是指排出的卵子能够受精和子宫内环境能够支持妊娠,牧场管理包括发情鉴定和适时输精等(Darwash等,1999)。奶牛繁殖力低主要是由产后长期乏情,卵泡不发育或不排卵,发情周期紊乱,胚胎死亡或流产等引起。加强产后母牛的饲养和管理、尽快恢复卵巢和子宫功能,是提高产后奶牛繁殖力的根本措施。现将提高产后繁殖力的措施归纳如下。  相似文献   
6.
家禽转基因技术的分类方法与存在的问题   总被引:1,自引:0,他引:1  
1993年英国Sang博士将外源基因导入公鸡,首次获得了蛋黄中含有珍贵的人类蛋白的母鸡犤1犦。由于家禽的繁殖周期短,产蛋量高,且转基因产品具有巨大的潜在价值,因此,转基因家禽是一种理想的输卵管生物反应器犤2犦。但由于母禽的生殖生理系统特殊,家禽为体内受精,受精后在卵子周围形成卵白、壳膜及蛋壳,同时受精卵发生快速分裂,受精蛋约20h后产出体外时,胚胎已发育到6000个细胞。因此,对家禽进行早期遗传操作十分困难,以致于在哺乳动物上已经成熟的转基因方法在家禽上却不能发挥有效的作用,使得转基因家禽的生产相对落后于哺乳动物。因此,家禽…  相似文献   
7.
亲缘生物法生物信息技术在水产基因研究中的应用   总被引:2,自引:0,他引:2  
用Entrez、SRS等检索工具可从GenBank、EMBL等核酸序列数据库、鱼类专业数据库获取相关水产动物的基因等信息,通过电子邮件或网页填表等方式用BLAST、FASTA等序列分析软件来分析获得的信息,以鳜鱼rRNA基因为例,根据鳜鱼的分类树,按种、属、科、亚目、目、总目追级向上寻找亲缘关系较近的其它鱼类的rRNA基因,直到找到有价值的rRNA基因序列。将有价值的rRNA基因序列拼接成重叠群,根据重叠群设计引物、克隆鳜鱼的rRNA基因,获得鳜鱼的3个rRNA基因及其间隔序列。为经济动物的基因研究建立了一种亲缘生物法的生物信息学技术。  相似文献   
8.
超级稻DAD1基因的cDNA克隆及其正反义表达载体的构建   总被引:1,自引:1,他引:0  
采用RT-PCR方法从超级稻幼苗中扩增DAD1基因的cDNA,并克隆测序,核酸序列表明该基因编码区为342bp,编码114个氨基酸残基.与GenBank发表的序列(XM_472334)相比,有3处碱基不同,分别为105bp处的C(GenBank的为T),148bp处的A(G),149bp处的C(T).将该基因分别正向和反向插入CaMV35S启动子后,构建了基因在植物中的正义、反义表达载体.  相似文献   
9.
奶牛难产的发生与预防   总被引:1,自引:0,他引:1  
难产(Dystocia)是指胎儿的产出延迟或受阻。有人将奶牛难产分为4个等级:自然分娩(不需要帮助)、轻度难产(较小的帮助)、重度难产(较大帮助)和剖腹产。还有人根据助产时拉出力量的大小,将奶牛难产分为5个等级:自然分娩(靠母牛自身外排力量,约70kg)、轻度难产(1人牵拉助产,拉力约  相似文献   
10.
通过PCR技术简单扩增奶牛高GC含量的rDNA重复序列   总被引:4,自引:0,他引:4  
为了探索利用PCR简单扩增高GC含量的长重复序列的方法,经反复摸索后选用LAPCR法即LA PCR Taq酶结合GC缓冲液Ⅱ来扩增奶牛高GC含量的长片段重复序列,成功获得了全长2538bp,GC含量为65.7%的DNA序列,其中ITS1的GC含量高达80%.探索了克隆复杂DNA序列时引物设计的特别规则、反应体系的改进、DNA聚合酶的选用等措施.  相似文献   
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