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为在大肠杆菌中表达马耳他布鲁菌omp25基因并鉴定重组蛋白的抗原性,从马耳他布鲁菌中用聚合酶链反应技术(PCR)扩增得到布鲁菌omp25基因片段,并将目的基因插入原核表达载体pET-32a中,构建重组质粒pET-32a-omp25转入大肠杆菌Rosetta中表达,用SDS-PAGE和Western-blot检测表达蛋白。结果显示成功构建了重组质粒pET-32a-omp25,并在大肠杆菌Rosetta中获得了重组蛋白,重组蛋白与布鲁菌阳性血清发生特异性反应。表明重组质粒pET-32a-omp25可以在大肠杆菌Rosetta中成功表达,并且重组蛋白可与布鲁菌阳性血清发生特异性反应,说明该重组蛋白有良好的免疫原性,该研究为以后疫苗的研制及布鲁菌病的检测打下良好的基础。 相似文献
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为了建立SD大白鼠高脂血症及脂肪肝模型,试验将SD大白鼠随机分为2组,分别给予正常饲料、高脂饲料,连续饲喂30 d,测定SD大白鼠血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)和胆汁酸,取SD大白鼠肝脏称湿重,计算肝脏指数(肝脏湿重与SD大白鼠体重之比),并取一小块肝脏组织置于10%中性福尔马林溶液中固定,苏木精-伊红染色(H.E.染色),显微镜下进行组织病理学检查。结果表明:与对照组相比,高脂模型组血清TC、LDL-C含量极显著升高(P0.01),高脂模型组血清HDL-C含量极显著降低(P0.01);高脂模型组肝脏指数、第30天胆汁酸指标极显著高于对照组(P0.01)。病理组织学检查结果表明,高脂模型组SD大白鼠肝小叶结构轮廓基本消失,肝细胞形态不规则,大部分肝细胞肿胀呈气球样变,并可见肝细胞空泡变性,部分肝细胞出现溶解性坏死。说明采用高脂饲料饲喂SD大白鼠30 d可出现高脂血症,并且导致肝脏肿大、脂肪肝及部分肝细胞出现溶解性坏死。 相似文献
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根据锡林浩特市某奶牛场临床型或隐性奶牛乳房炎的发病情况,采集乳样47份、环境样品35份,进行细菌分离鉴定,并对其主要病原菌进行药敏试验。从乳样中共分离出13种细菌81株,从环境样中分离出主要致病菌6种34株。选择27种抗生素对主要致病菌进行药物敏感性试验,结果表明,乳样和环境中的致病菌都对头孢菌素类、喹诺酮类药物敏感。乳样中的致病菌对青霉素、链霉素及磺胺类等药物均产生不同程度的耐药性,而环境中主要致病菌对青霉素G、新生霉素、氨苄西林表现出一定耐药性。对乳样和相应环境分离得到的细菌进行对比分析,发现两者在药物敏感性和耐药性方面存在一定的相关性。 相似文献
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为使手术创达到第一期愈合,采取了一系列综合性预防措施,使所做的27例临床手术均获得一期愈合、主要措施如下: 器械消毒采用0.1%新洁尔灭溶液消毒,在手术过程中器械一直浸泡在此消毒药中。手术室地面用自来水冲洗,室外地面喷洒2%耒苏儿。手术区剪毛后,用0.1%新洁尔灭溶液消毒。病畜麻醉采用静松灵配合局部浸润麻醉。手术人员的手臂清洗之后,用0.1%新洁尔灭溶液消毒。严防感染的器官和内脏器官的内容物污染手术切口。创口一律用0.1%新洁尔灭溶液冲洗,散布青霉素,并作密闭缝合。大手术作术中输液。手术后的病畜至少注射7天青霉素和链霉素。手术创达到一期愈合,具有重要的经济价值,一直是外料工作者研究盼主要课题,过去虽然采取多方面的予防措施,但在临床手术中仍经常发生感染,后来不断对消毒和具体操作进行探索与改进,取得了满意的效果,所施行的27例临床手术均获得一期愈合。牛病:瘤胃积食2例、瘤胃泡沫性臌气1例,瘤胃与腹壁粘连2例、瘤胃痿管1例、创伤性网胃炎2例、真胃右方变位1例、肠闭结1例、肾旁脓肿1例、腹壁疝1例、剖腹产10例、腹壁肿瘤1例。马属动物疾病:腹壁疝1例、尿道结石1例、膝盖骨上方脱位1例、屈腱挛缩1例。 相似文献
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试验旨在探索日粮中添加发酵黄芪对羔羊生长性能、血清免疫指标及抗氧化能力的影响。随机选取60只体况相近的羔羊,分为对照组、乳酸菌组(试验Ⅰ组)、未发酵黄芪组(试验Ⅱ组)、发酵黄芪组(试验Ⅲ组),每组3个重复,每个重复5只羊。预试期15 d,正式试验期60 d。结果显示,试验Ⅲ组羔羊平均末重、平均日增重均显著高于对照组、试验Ⅰ组和试验Ⅱ组(P<0.05)。试验Ⅱ组、试验Ⅲ组羔羊料重比均显著低于对照组(P<0.05)。试验Ⅱ组、试验Ⅲ组羔羊CD2+-T淋巴细胞(CD2+)、CD4+-T淋巴细胞(CD4+)细胞百分率显著高于对照组(P<0.05),血清免疫球蛋白A (IgA)、免疫球蛋白M (IgM)含量极显著高于对照组(P<0.01)。试验Ⅲ组羔羊血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性极显著高于其他组(P<0.01)。试验Ⅱ组、试验Ⅲ组羔羊血清中总抗氧化能力(T-AOC)极显著高于对照组(P<0.01)。试验Ⅲ组羔羊血清丙二醛(MDA)含量显著低于对照组(P<... 相似文献
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目的表达小反刍兽疫F蛋白的抗原位点用于检测与预防。方法用DNAStar分析小反刍兽疫的抗原位点,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从病羊组织中PPRV的F基因的抗原位点并克隆到原核表达载体PET-28b中,最后用PCR、酶切和测序分析对重组质粒进行鉴定;将重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta中,经ITPG诱导表达PPRVF基因的抗原位点;用SDS-PAGE和Western-Blotting分析抗原位点蛋白的表达。结果将RT-PCR产物电泳,得到与预期大小相符的特异性片段;对重组质粒PET-28b-F35-111(pZLW013)、PET-28b-F143-485(pZLW014)和PET-28b-F323-485(pZLW015)酶切后,均出现与预期相符的片段;DNA测序表明插入的片段的序列与小反刍兽疫F基因的抗原位点序列分别完全一致,其大小分别为251bp、1053bp和514bp;将重组表达的蛋白经SDS-PAGE和West-ern-Blotting分析,证明小反刍兽疫抗原位点F35-111没有表达、抗原位点F143-485和F323-485得到表达。结论成功表达了PPRVF基因的两段抗原位点蛋白,为日后检测与预防工作奠定了基础。 相似文献