森林保护碳汇项目方法学研究

森林保护碳汇项目是林业行业减排增汇项目的重要组成,因其多重效益已被纳入应对气候变化的行动倡议和碳交易市场领域。文中基于我国温室气体自愿减排市场的需求,从计量碳库的选择、基线情景的确定、额外性论证及碳储量计量等方面研究出适合我国的森林保护碳汇项目方法学,提出将木质林产品、地上生物量、枯死木及枯落物作为计量碳库并采用蓄积法、生物量扩展因子法及衰减函数法计算碳储量的新碳汇项目方法学,以期为我国森林保护碳汇项目开发及全国碳交易市场建设提供理论参考。     

REDD+机制各缔约方观点总结分析及我国对策建议

减少发展中国家毁林及森林退化引起的温室气体排放, 森林保护、可持续森林管理和增加森林碳储量(REDD+)在减缓气候变化行动中的作用越来越明显, 已经成为《联合国气候变化框架公约》谈判的重要议题。近年来各缔约方针对方法学、融资机制和REDD+与清洁发展机制(CDM)关系的谈判争论越来越激烈。在《联合国气候变化框架公约》第18次缔约方会议(COP18)期间, 对REDD+议题提出了新的要求, 除了有关于逐步建立国家水平森林参考排放水平或参考水平等有关方法学的技术与科学问题外, 基金在融资机制中的作用和非碳效益支付议题也有待进行深入的磋商。文中基于对各缔约方提案的分析结果和REDD+示范项目开展情况, 结合我国森林资源现状, 分析了REDD+机制对我国可能产生的影响并提出后续谈判期的对策建议。     

鹅细小病毒VP3蛋白B细胞线性表位的精确定位

本试验旨在利用获得的4株抗鹅细小病毒(GPV)VP3的单克隆抗体,进一步对GPV VP3 B细胞线性抗原表位精确定位。根据笔者实验室已鉴定的线性抗原表位区结果,筛选出单抗所针对的优势抗原表位区。设计并合成互相重叠5 aa的10 aa短肽寡聚核酸片段,退火后,连入pET-32a载体,经转化鉴定,诱导表达后,获得相应的小片段融合蛋白,并利用单抗通过Western blot进行抗原性鉴定。同样方法进行短肽片段两端氨基酸的逐个缺失设计,进一步精确定位,结果鉴定出2个抗原表位,分别为430-435 aa和643-647 aa。     

鹅细小病毒非结构蛋白和结构蛋白B细胞线性抗原表位的鉴定

鹅细小病毒是小鹅瘟的病原体,其基因组含有2个主要开放阅读框（ORF）,分别编码非结构蛋白（NS）和结构蛋白（VP）。为了对这2种蛋白进行抗原表位作图,设计了34个覆盖非结构蛋白NS和结构蛋白VP的50-60个氨基酸残基的重叠短肽,并进行了融合表达。用攻毒10周龄鹅血清对这34个融合蛋白进行蛋白质印迹分析,结果鉴定出NS蛋白线性抗原表位位于C末端的453-627氨基酸区域;VP蛋白线性抗原表位位于35—198、423—491、531—595、616—669和678—732氨基酸区域。     

猪传染性胃肠炎病毒S基因B和C抗原位点片段在多表达系统中的表达及初步应用

本研究分别用巴斯德毕赤酵母、杆状病毒和大肠杆菌表达系统中表达的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)TH-98株纤突蛋白(S)基因5'端含有B和C抗原位点的片段,利用Dot-ELISA方法对表达蛋白进行了抗原性比较分析,初步建立了以巴斯德毕赤酵母系统表达的重组蛋白为包被抗原的TGEV Dot-ELISA检测方法。结果表明:两种真核系统中表达的重组蛋白的抗原性相对更强。抗原最佳包被量为50 ng,抗体稀释度1∶100,最适封闭液为10 mg/L牛血清白蛋白,血清反应时间为60 min;酶标二抗的工作浓度为1∶1 000,反应时间为30 min,底物在室温显色时间为5 min。本研究建立的Dot-ELISA方法对猪呼吸道冠状病毒、猪轮状病毒、猪瘟病毒和猪流行性腹泻病毒阳性血清的检测结果均为阴性,特异性良好。与Svanova TGEV/PRCV抗体诊断试剂盒比较,此方法的特异性和符合率分别为90%和87%。     

鹅细小病毒非结构蛋白和结构蛋白的二级结构及B细胞抗原表位预测

利用DNAStar软件包中的Editseq将GPV H1株非结构蛋白和结构蛋白核苷酸序列翻译成氨基酸序列,然后利用Protean软件进行氨基酸序列分析,分别预测结构蛋白和非结构蛋白的二级结构及B细胞抗原表位。结果表明,GPVH1株非结构蛋白和结构蛋白具有丰富的二级结构和多处抗原指数较高的区段,其中非结构蛋白的NS2和结构蛋白的VP3含有较多的潜在的B细胞优势抗原表位。     

鲆鲽类、河豚刺激隐核虫病防治技术探讨

近年来,水产养殖生产中出现了一种危害鱼类的敌害——刺激隐核虫,该寄生虫寄生鱼类引起的鱼病一旦爆发,常常会造成大批鱼类死亡,严重影响了水产养殖正常生产活动和经济效益。笔者在2005年、2006年的生产中对鲆鲽类、河豚刺激隐核虫病进行了初步研究,取得了理想的治疗效果,现将该病的特点及其防治技术叙述如下。     

猪传染性胃肠炎病毒spike蛋白亲和肽的原核表达

【目的】原核表达猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus of swine,TGEV)spike蛋白亲和肽(SQHT),检测其病毒亲和性,为建立TGEV诊断方法奠定理论和物质基础。【方法】人工合成TGEV spike蛋白亲和肽基因,亚克隆后将该基因分别插入至原核表达载体pET-32a和pGEX-6p-1中,构建重组质粒pET-32a-SQHT和pGEX-6p-SQHT,对重组质粒进行BamHⅠ单酶切和BamHⅠ/XhoⅠ双酶切及测序鉴定。将重组质粒分别转化至大肠杆菌Rosetta(DE3),用IPTG进行诱导表达,对其表达产物的生物学活性进行检测。【结果】亚克隆获得了150 bp的TGEV spike蛋白亲和肽基因。成功构建了重组质粒pET-32a-SQHT和pGEX-6p-SQHT,并诱导表达出重组蛋白TRX-SQHT和GST-SQHT,其分子质量分别为25和31 ku。Western blot分析表明,2种重组蛋白与TGEV病毒粒子具有良好的亲和性;Dot-ELISA分析表明,2种重组蛋白与TGEV病毒粒子的最低结合滴度TCID_(50)为5×10~2 mL~(-1)。特异性试验表明,重组蛋白TRX-SQHT和GST-SQHT均可与TGEV产生特异性结合,而不与猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪轮状病毒(PoRV)结合。【结论】使用原核细胞成功表达了TGEV spike蛋白亲和肽,表达的重组蛋白具有很好的TGEV特异亲和性。     

我国林产工业实现碳中和的基本策略

林产工业作为具有可持续发展潜力的绿色产业,具备通过市场化交易机制实现政府提出的"双碳"发展战略目标的潜力。文中在分析森林碳汇在碳中和愿景实现过程中所起作用的基础上,探讨林产工业在"双碳"战略中的定位,阐述未来我国林产工业实现碳中和的主要策略,以期为开展中国林产工业碳中和试点提供借鉴。