一株鸵鸟胚源新城疫病毒生物学特征和遗传发生分析

从死亡的鸵鸟胚胎中分离到1株新城疫病毒毒株,经毒力检测为强毒株,鸡胚平均死亡时间为45h,IVPI为2.90,IPCI为1.88.RT-PCR扩增出融合蛋白(F)基因,测定核苷酸序列并进行遗传发生分析和酶切位点分析.对基因编码的氨基酸序列进行了推导,该毒株的蛋白酶裂解激活位点附近的氨基酸序列为112R(K)RQKR↓F117,为强毒特征序列,然而该毒株并未引起该鸵鸟群发病.根据绘制的系统进化发生树和F基因上3种限制性内切酶(RE)位点分布,确定该毒株均为基因Ⅶ型.该病毒与在我国鸡群、鹅群同期流行的毒株有很高的同源性.     

2株鸽源新城疫病毒的毒力鉴定和基因型分析

2008年从临床鸽病例中分离到2株新城疫病毒毒株,经测定,鸡胚平均死亡时间(MDT)分别为48h和46h,8周龄SPF鸡静脉接种指数(IVPI)分别为2.88和2.91,一日龄雏鸡脑内接种指数(IPCI)分别为1.88和1.89,按照OIE推荐的标准均为强毒株。RT-PCR扩增出融合蛋白(F)基因片段,测序,推导的氨基酸序列中蛋白酶裂解位点附近的氨基酸序列均符合强毒特征序列。根据F蛋白的部分基因序列绘制的系统进化发生树和F基因片段中3种限制性内切酶(RE)位点分布判定这2个毒株均为基因Ⅶc型。     

不同动物源新城疫病毒感染不同种属细胞的病变观察

用10株不同动物源的新城疫病毒F48E8,La Sota、La Sota-GFP、ZJ1、ZJ1-GFP、JS-4-05-Go、Gx-1-05-Ch,JS-1-07-Os、Js-1-07-Du、JS-1-07-Pi等毒株分剐感染鸡胚、鹅胚、鸭胚成纤维细胞、PK-15、Dulac、FK81、MDCK、Vero、Hela多种不同动物来源的传代细胞系,通过对病毒感染细胞后病变的观察、ZJ-GFP及La Sota-GFP两个病毒感染细胞后细胞中绿色荧光蛋白指示的病变,了解不同的毒株对不同细胞感染性的差别.结果表明,不同毒力、不同动物源的新城疫病毒致不同种属细胞病变的作用不同,产生病变的时间有差异,强毒F48E8等毒株感染细胞后48～72 h可以引起几种禽源成纤维细胞全部裂解,而哺乳动物来源的细胞在60～120 h细胞发生病变,且病变也不如禽源成纤维细胞严重,出现了细胞的圆缩.弱毒株在胰酶处理后感染细胞,72 h以后出现明显细胞病变,引起的哺乳动物细胞病变不明显.受试毒株的动物种属来源与细胞的致病性没有明显相关性.