凝集素的作用与应用

凝集素是一类具有糖专一性、可使细胞凝集的糖蛋白。它能与糖专一性、非共价可逆结合,广泛存在于植物、动物等生物细胞膜上、细胞质内和细胞外基质中。由于凝集素的存在比较广泛,且具有专一性的识别能力,具有促使细胞凝集、细胞有丝分裂、防御昆虫危害、消除入侵的微生物等外源     

烟夜蛾滞育蛹和非滞育蛹血淋巴可溶性蛋白含量及图谱初步研究

利用考马斯亮蓝法和SDS - PAGE电泳法测定并分析了烟夜蛾滞育蛹和非滞育蛹血淋巴可溶性蛋白含量及其组成.结果表明,非滞育蛹在化蛹后至羽化前可溶性蛋白呈现出“降低—升高—降低”的变化趋势,在5日龄时含量最高,而滞育蛹呈现出持续降低的变化趋势;除2日龄雌蛹外,其他日龄滞育与非滞育蛹的雌、雄个体间蛋白质含量均存在显著差异.蛋白质SDS - PAGE电泳图谱表明,滞育蛹与非滞育蛹血淋巴的蛋白组成存在明显差异.推测滞育蛹血淋巴可溶性蛋白含量及组成的变化与其抗寒性有关.     

低氧胁迫条件下HIF-1α对凡纳滨对虾血淋巴免疫性能的影响

为了探究低氧水平下低氧诱导因子-1α（HIF-1α）对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)血淋巴免疫性能的影响,本研究通过对凡纳滨对虾体内注射dsRNA,干扰HIF-1α基因的表达,同时对凡纳滨对虾进行低氧胁迫(2.0 mg·L⁻¹),并测定其血细胞数、血蓝蛋白含量、基因表达和酶活等免疫指标。结果表明,RNA干扰组HIF-1α的表达水平较对照组下降了80.1%。干扰组在低氧条件下血细胞数较对照组有显著降低,此外干扰组血蓝蛋白的浓度较对照组有显著升高。低氧条件下干扰组的造血激素基因（AST）、血细胞稳态相关蛋白基因（HHAP）在血细胞中的表达水平较对照组有显著的升高,而铁蛋白基因（FT）在血细胞中的表达水平无显著差异。低氧条件下RNA干扰组血清中ACP、AKP和PO三种酶活力均有不同程度的降低。以上结果表明,凡纳滨对虾的HIF-1α直接或间接地参与了免疫功能的调控。     

Study on the Obtaining of Transgenic Wheat with GNA Alien Gene by Biolistic Particle

The immature embryos of wheat plants, cv. Jing 411, 12 - 14 days after pollination, were cultured on SD2 medium for callus induction. After 10 days culture, 800 wheat calli were bombarded by biolistic particle coated with theDNA of plasmid pBI121-2 harboring both Galanthus nivalis agglutinin gene and bar gene. 67 green plants were finally regenerated from the bombardment calli on selection medium containing 4mg/L Basta. The results of bioassay by both inoculating wheat aphids onto the plants and applying Basta solution of 50 mg/L and 75 mg/L onto the wheat leaves in the field, and the molecular analysis, such as PCR and Southern blotting, indicated that 8 T2 plants contaning the target genes were obtained.     

不同盐度对中国对虾血淋巴渗透浓度和离子浓度的影响

1、中国对虾生活在盐度为4．5—35．5‰海水(渗透浓度为114—1178mOsm／kg)中,其血淋巴渗透浓度变化范围为587—797mOsm／kg。当海水渗透浓度为602mOsm／kg时,其血淋巴与海水等渗;当海水渗透浓度低于602mOsm／kg时,中国对虾表现为强高渗调节,高于602mOsm／kg时为中等低渗调节。2、中国对虾血淋巴中Na^ 离子在低盐度时为高离子调节,高盐度时为低离子调节。在试验盐度范围内,K^ 和Ca^2 均为高离子调节,Mg^2 为低离子调节。3、中国对虾对盐度突变有较强的适应能力。从盐度15‰海水转移到盐度7‰和28‰海水中,转移后分别在6和24小时中国对虾血淋巴渗透浓度基本能达到稳定。     

牛精子膜麦芽凝集素结合糖蛋白的分离与定位

牛精子膜用非离子去污剂 NP-40增溶,经固相凝集素亲和层析,初步分离了精子膜麦芽凝集素结合糖蛋白,经 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染色显示出了四条蛋白质带,分子量分别为78,60.42和33 kD。用分离到的糖蛋白制备抗血清,对牛精子进行免疫细胞化学标记,结果顶体区显示为强阳性,与麦芽凝集素亲和细胞化学的染色一致。用抗血清处理精子再进行亲和细胞化学染色时,顶体区的麦芽凝集素结合糖残基多数被封闭,揭示麦芽凝集素结合糖残基是构成抗原决定簇的成分。     

锯缘青蟹血清凝集素的特性和盐析提取研究

对锯缘青蟹(Scylla serrate)血清凝集素的凝集特性进行了研究。结果显示:锯缘青蟹血清凝集素对人、兔、鼠、鸽子、中华鳖、鲫红细胞均有凝集作用,其中对小鼠红细胞凝集活性最强,血凝活性可达29;凝集素活性最适pH 6.0~7.4;盐度对凝集活力有较大影响,NaC l浓度在0.4~0.5 mol/L时基本失活;未纯化血清凝集素对Ca2+、Mg2+未表现出依赖性;凝集素活性能被N-乙酰葡萄糖胺特异性抑制。对青蟹血清凝集素进行硫酸铵分级沉淀分离后,发现凝集素活性主要分布在25%饱和度硫酸铵沉淀区,该组分凝集比活比血清高27.44倍,SDS-PAGE结果表明主要蛋白带型为79 ku、75 ku、72 ku。     

GNA和ACA双价转基因烟草培育及其抗蚜研究

蚜虫是一种常见的农作物害虫,作为多种植物病毒的载体而成为影响农业发展的重要害虫之一,对蚜虫的防治一直是众多科学工作者所面对的难题。构建了雪花莲凝集素(GNA)和苋菜凝集素(ACA)双价植物表达载体pBI121-GA,在农杆菌介导下,叶盘法转化烟草NC89,得到卡那霉素抗性植株65株。通过基因组PCR、ELISA、RT-PCR和Western-blot等分子生物学检测,从中筛选出外源凝集素不同表达水平的转基因烟草5株。对筛选出的5株转基因烟草植株进行初步蚜虫抗性实验,证实转基因烟草对桃蚜表现出一定的抗性,最高抑制率达85.8%,为农作物双价抗蚜基因的应用研究提供一定的理论基础。     

掌叶半夏凝集素基因表达载体的构建与鉴定

从掌叶半夏(Pinellia pedatisecta Schott)块茎中提取总RNA,反转录合成cDNA.根据GenBank中已报道的天南星科凝集素基因序列,设计带有酶切位点的表达引物,用RT-PCR方法扩增出掌叶半夏凝集素(Pinellia pedatisecta agglutinin,PPA)基因.PPA经双酶切后与表达载体pGEX-6P-3连接,构建pGEX-PPA重组表达载体.通过PCR、双酶切及测序鉴定,结果表明,重组载体pGEX-PPA构建成功,为进一步进行PPA的原核表达及其功能研究奠定了基础.