中华绒螯蟹血淋巴内盐酸环丙沙星的反相高效液相色谱法的建立

应用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)建立了盐酸环丙沙星在中华绒螯蟹血淋巴内含量的测定方法.本法采用肌肉注射的给药方法,给药剂量为8.17±0.56mg·kg-1和6.25±0.85mg·kg-1.血淋巴从心区抽取.经各种抗凝方法的比较,认为等量的ACD与等量的血淋巴混合,可得到持久的抗凝效果.血淋巴样经甲醇去蛋白,3000r/min离心10min后,取上清液上HPLC.色谱柱,RP-ODS-5μl50×4.6mm;流动相,甲醇-磷酸缓冲液-四丁基溴化铵=25075020(v/v/v);流速,l mL·min-1;进样量,2μL;检测波长,280nm.研究表明,本法线性关系与重复性良好;雌、雄蟹平均回收率分别为100.08±3.43%和99.11±8.20%;日间精密度、平均提取精密度分别为1.19±0.92%、1.55±0.01%.用该方法对肌肉注射给药后48h内中华绒螫蟹雄蟹血淋巴中的盐酸环丙沙垡的血药浓度进行检测,揭示出由37.13±0.08μg·mL-1降至5.96±0.18μg·mL-1的代谢规律.