白果活性蛋白的酶法水解及抗氧化活性研究

白果活性蛋白(GAP)是华中农业大学天然产物化学实验室首次从白果中分离得到的一种以清蛋白为主的且具有显著生物活性的蛋白,为扩大该蛋白在食品中的用途,提高其生物活性,研究了酶法水解制备白果肽段的方法及其抗氧化活性的变化。通过单因素分析、正交试验以及对试验结果的分析，确定了2709碱性蛋白酶水解白果活性蛋白的最佳水解条件为：底物浓度1%，pH值8.5，水解温度45℃，酶浓度7000 U/g，反应时间6 h。以Fenton体系和邻苯三酚体系检验其抗氧化活性，结果表明白果肽段较酶解前的活性蛋白，抗氧化活性有不同程度的提高，但两者均具有较强的抗氧化活性。     

碱性蛋白酶酶解蛋清工艺条件研究

通过单因素和正交试验研究了蛋清稀释程度、pH值、酶解温度及酶与底物比对碱性蛋白酶酶解蛋清的影响,得到最佳的酶解条件为:将蛋清液稀释至60%后变性,按照酶与底物比为2.5:100(mL:g)加入碱性蛋白酶,酶解温度为60℃,反应初始时不调节pH值,待pH值降至7.5时通过加入NaOH使pH值保持在7.5进行酶解。     

薏米蛋白的酶水解工艺优化

为确定蛋白酶水解薏米蛋白的最佳工艺条件,以氮溶解指数(NSI)和水解度(DH)为指标对中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶进行筛选,确定碱性蛋白酶为最佳水解用酶,并通过单因素和二次回归正交旋转试验,建立了碱性蛋白酶水解薏米蛋白的数学模型。结果表明,碱性蛋白酶在底物质量浓度39.95 g/L,酶用量1 201.75 U/g,温度54.61℃,pH值7.99,反应时间4 h的条件下,水解后的氮溶解指数可达95.79%。     

用于连续制备乳清蛋白ACE抑制肽的酶膜反应器运行条件优化

采用中空纤维膜连续型酶膜反应器制备血管紧张素转移酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制多肽。在传统酶解工艺条件的基础上,设计出能高效连续制备ACE抑制肽的酶膜反应器,并对此酶膜反应器的运行参数进行了优化,得到能高效制备ACE乳清蛋白源抑制肽的运行条件是:循环流速22.4 L/h,底物质量分数5%,跨膜压力0.07 MPa,酶膜反应器能稳定运行12 h以上,得到乳清蛋白酶解产物的ACE抑制率为30%￣50%。     

甜杏仁粕蛋白的碱性蛋白酶酶解动力学研究

为了探究甜杏仁粕蛋白酶解动力学特性,实现对冷榨甜杏仁粕的广泛利用及其生物活性肽的推广,从酶解反应机理出发,应用数学推导的方法,于pH 8.0、温度50℃条件下,以碱性蛋白酶为工具酶,研究甜杏仁粕蛋白在不同初始底物浓度和初始蛋白酶浓度下的水解进程并建立动力学模型。结果表明:甜杏仁粕蛋白的水解度随着初始底物浓度的上升而减小,随着初始蛋白酶浓度的上升而增大,碱性蛋白酶水解甜杏仁粕蛋白的速率动力学模型为:R=(27.035 E_0+0.498 8 S_0)exp[-0.173 3(DH)],酶解反应速率常数K_2为27.035 min~(-1);水解度-水解时间的动力学模型为:DH=5.77 ln[1+(4.69 E_0/S_0+0.086)t],酶失活的动力学常数K_4为2.992 min~(-1)。与试验结果相比,模型值与试验值吻合较好,表明所建动力学模型对甜杏仁肽产业化具有一定的指导作用。     

大米肽的酶法制备工艺及其特性的研究

该文利用蛋白酶水解大米蛋白制备得到大米肽。比较碱性蛋白酶、中性蛋白酶、复合蛋白酶和风味酶水解大米蛋白的进程曲线，结果显示碱性蛋白酶的水解效果最好，其较佳作用条件为：底物浓度10%、pH值9.0、温度45℃、酶与底物比48 AU/kg、时间150 min。在此条件下，大米肽的得率为46.8%，纯度为71.3%。大米肽具有溶解性较好和黏度较低的特性，可以在食品中广泛应用。     

花生蛋白碱性蛋白酶水解物对血管紧张素转化酶抑制作用的初步研究

分别以碱性蛋白酶Alcalase和中性蛋白酶Neutrase对花生分离蛋白进行水解．制备花生分离蛋白水解物．并测定不同水解时间所得产物对血管紧张素转化酶(ACE)的抑制活性。未水解的花生分离蛋白没有ACE抑制活性．用中性蛋白酶Neutrase水解所得的水解物显示弱ACE抑制活性。然而，碱性蛋白酶Alcalasc水解物具有很强的ACE抑制活性．水解0．5h时水解物活性最高，其半抑制浓度为(IC50)0．56mg／mL。本研究表明，当用碱性蛋白酶Alcalase水解时，花生分离蛋白是生产ACE抑制肽的良好蛋白质来源，花生分离蛋白碱性蛋白酶Alcalase水解物可作为具有降压功能的功能食品添料。     

碱性蛋白酶对螺旋藻活性蛋白的酶解研究

螺旋藻中的藻蓝蛋白作为一种具有生物活性功能的天然藻蓝素蛋白,其理论研究和应用近年来得到广泛的重视。通过测定螺旋藻破碎后上清液中蛋白质含量及其活性藻蓝蛋白含量,建立了一种提取螺旋藻蛋白质较适的方法和条件,最高提取率达到94.6%,活性藻蓝蛋白的得率为9.87%。利用正交实验,对提取的胞内蛋白质采用pH—stat方法进行碱性蛋白酶的水解,确定了其最佳酶促水解条件,即pH值为7.0,酶底物比为2.2%,反应时间为160min,反应温度为50℃,此时水解度与htot之比为120.20%,N溶解指数为27.73%。该研究对螺旋藻蛋白中生物活性物质的开发奠定了基础。     

Alcalase碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白的研究

试验研究了以Alcalase碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白制备大豆肽的工艺,分析了温度、pH值、底物浓度、酶与底物浓度比和时间对酶水解的影响。通过均匀设计和统计分析建立了酶水解的数学模型,并以此模型得到了Alcalase碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白的最佳水解工艺。工艺参数为温度60℃、pH8．0、底物浓度8．38％、酶与底物浓度比4．5％、水解时间150min,水解度0．220 221。     

鱼降压肽的酶法制备工艺及其理化性质

采用高效液相色谱测定降压肽的血管紧张素转化酶抑制活性,对碱性蛋白酶水解草鱼蛋白制备鱼降压肽进行研究。结果表明,碱性蛋白酶水解草鱼蛋白制备鱼降压肽的较佳工艺条件为:pH9.0、温度50℃、酶与底物比48AU.kg-1、水解度34.52%。鱼降压肽成分分析结果显示,鱼降压肽中可溶性氮含量为81.26%,肽含量为72.81%,脂肪含量为0.12%,水分含量为3.54%,灰分含量为9.47%。体积排阻色谱测定鱼降压肽的相对分子质量在124~10581之间,主要集中在124~1062之间;溶解度高效液相测定结果表明,在pH3.0~11.0时鱼降压肽溶解度为96.0%左右,可广泛应用于食品中。