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1.
中国对虾雄性生殖系统感染WSSV在其垂直传播中的作用   总被引:2,自引:0,他引:2  
通过人工感染实验,对中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)雄性亲虾进行投喂感染。在确定其携带WSSV粒子后,将被WSSV感染的精荚人工移植到健康的雌虾纳精囊内。在无其他病源的情况下,促其产卵繁殖,统计各组子代的受精率、孵化率及无节幼体至溞状幼体的变态率贸?式PCR技术对亲虾及子代进行WSSV检测。结果表明,受WSSV感染的精荚能够把病毒传播给健康雌虾,雌虾能产出携带WSSV的卵子,培育出带毒幼体。各组子代的受精率、孵化率及变态率的统计结果表明,感染组和对照组在受精率上没有明显区别,受WSSV感染的精卵细胞可以正常结合。对照组受精卵的孵化率明显高于感染组,差异显著(P=0.045<0.05)。对照组无节幼体的变态率也高于感染组。说明WSSV的入侵对受精卵及幼体的发育有影响,WSSV感染导致部分受精卵及幼体不能正常发育或死亡。  相似文献
2.
通过分析中国对虾人工选育两个群体WSSV感染相关免疫与生化因子的变化,研究选育的两个中国对虾群体对WSSV的敏感性和抵抗力。结果表明,两个群体感染WSSV后,总细胞数(THC)在24h达到最大,随后呈下降趋势;两个群体血淋巴蛋白在感染初期和中期变化不同,但在后期均呈下降趋势;相比而言2'对虾群体比6'对虾群体血蛋白含量和THC下降幅度稍慢;2'对虾群体和6'对虾群体感染24h后酸性磷酸酶(ACP)稍有下降,随后保持较高的活性,而碱性磷酸酶(AKP)的变化除2'对虾群体在感染48h有显著增大外,6'对虾群体变化不明显;过氧化氢酶(CAT)、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)与WSSV感染有密切的联系,两个群体抗氧化酶活性随WSSV增殖的变化略有不同;细胞内酚氧化酶(proPO)原变化趋势也表现出差异,斑点杂交结果显示6'对虾群体比2'对虾群体阳性反应较早,揭示不同群体间对WSSV感染的敏感性存在一些差异。  相似文献
3.
为了研究含Armadillo 重复蛋白8在凡纳滨对虾抗病感染中所起的免疫作用,本实验采用RACE-PCR技术首次克隆到凡纳滨对虾ARMC8基因(LvARMC8,GenBank注册号:KX058562)的cDNA序列全长,并利用在线软件进行生物信息学分析;采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术对LvARMC8基因在凡纳滨对虾不同组织及感染白斑综合征病毒(white spot syndrome virus, WSSV)和副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)过程中的表达变化特征进行分析。结果显示,LvARMC8基因全长为2917 bp,其中开放阅读框(open reading frame,ORF)长2046 bp,编码681个氨基酸,5ˊ非编码区长49 bp,3ˊ非编码区长822 bp。预测分析显示LvARMC8编码的蛋白质含有6个ARM 结构域。同源性分析发现,LvARMC8基因与内华达古白蚁(Zootermopsis nevadensis)ARMC8基因的相似度最高,为71%。系统进化分析结果显示,LvARMC8和多种无脊椎动物ARMC8聚为一类,其中与昆虫类动物赤拟谷盗(Tribolium castaneum)、致倦库蚊(Culex quinquefasciatus)和柑橘凤蝶(Papilio xuthus)的亲缘关系最近。RT-PCR 分析发现,LvARMC8 基因在凡纳滨对虾多个组织中均能检测到,在表皮中表达量最高,眼柄中表达量最低。WSSV感染后12 h,LvARMC8基因在凡纳滨对虾血液中的表达量显著降低,但48 h 后显著升高,72 h达到最高水平。除V. parahaemolyticus感染后24 h外的时间点,LvARMC8基因在凡纳滨对虾血液中的表达量均显著升高。所有实验结果表明,LvARMC8基因可能参与凡纳滨对虾抗病免疫应答途径。  相似文献
4.
采用RACE技术克隆获得中国明对虾caspase2基因cDNA序列全长,并对该序列进行分析.结果显示,中国明对虾caspase2基因全长为1517 bp,开放阅读框长924 bp,5'非编码区长78 bp,3'非编码区长515 bp,命名为FcCasp2.推测该基因编码307个氨基酸,预测分子量为34.21ku,理论等电点为7.62.同源性和系统进化分析发现,FcCasp2基因与凡纳滨对虾caspase2和斑节对虾caspase的相似性分别为88%和80%,与其他节肢动物caspase家族基因聚为一类.荧光定量RT-PCR结果显示,FcCasp2基因在肝胰腺中的相对表达量最高,在肌肉中表达量最低.WSSV感染后该基因在中国明对虾肌肉、肝胰腺和鳃丝中的表达量有不同的时空表达趋势,表明FcCasp2基因可能参与中国明对虾生物胁迫的应答反应.  相似文献
5.
对虾白斑综合征病毒(WSSV)给世界对虾养殖业造成了严重的经济损失,制约了产业的可持续发展。为了深入了解WSSV的致病机理和体外培养的对虾细胞对WSSV的敏感性,本试验以1.5×L-15培养基培养刀额新对虾(Metapenaeus ensis)原代淋巴细胞,待细胞形成单层后接种WSSV,通过倒置显微镜、荧光显微镜、透射电子显微镜观察接种病毒后细胞的病理变化。结果显示,使用1.5×L-15培养基培养对虾淋巴组织,3h后可观察到有细胞迁出,并能迅速形成单层,36h后细胞的迁出汇合率可达80%,且能存活20d以上。接种WSSV 24h后,出现病变的细胞变圆、漂浮,细胞之间的网状结构消失,最后细胞破碎、溶解;接种WSSV 48h后Hoechst33342染色结果显示,感染的细胞核深染,且变形、膨大;电镜下细胞核内含大量成簇分布的杆状病毒,细胞器被挤向细胞边缘,细胞膜轮廓模糊。研究表明,纯化的病毒粒子接种体外培养的淋巴细胞,能够使其产生明显病理变化,证明了WSSV对体外培养的淋巴细胞具有感染力,并且可在淋巴细胞中增殖。  相似文献
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