单环刺螠精巢年周期发育及精子发生

采用组织学方法观察了单环刺螠(Urechis unicinctus)精巢的形态结构及其年周期发育,并利用超微技术观察了精子的发生过程。结果表明,单环刺螠的精巢呈条带状,位于虫体尾部,两端通过肌束分别与呼吸肠管壁外侧和体壁内侧相连。精巢由生精细胞团与结缔组织组成,结缔组织位于精巢中央,精原细胞团分布于结缔组织外周,精母细胞团散布于结缔组织内,各级精母细胞脱离精巢落入体腔液中,历经精母细胞、精细胞,最后形成精子脱离细胞团进入肾管。根据精巢的组织学特征,将单环刺螠的精巢年周期发育划分为增殖期、生长期、成熟期、排放期和休止期5个时期。光镜和电镜下观察了精巢和体腔液中精子发生各时期的结构变化,包括细胞核形态的变化、顶体发生以及尾部的形成。本研究揭示了单环刺螠的精巢发育特点、精子发生历经的场所和分化特征。     

单环刺螠体壁氨基酸组分与含量的分析

单环刺螠体壁肌含有１８种氨基酸（其总量占体壁肌干重的５７．３９％）。其中，８种人体必需氨基酸含量 １７．７９％。５种鲜味氨基酸（Ｇｉｎ，Ａｓｐ，Ａｒｇ，Ａｌａ，Ｇｌｙ）含量都比较高。必需氨基酸含量组成模式与人体需要模式较接 近。支／芳值高达２．５９，接近正常人的支／芳值     

单环刺螠人工养殖研究进展

单环刺螠是一种具有重要经济价值和潜在药用价值的海洋无脊椎动物,极具养殖开发前景。本文对单环刺螠的形态结构、温度、盐度、pH的适应范围、摄食习性、繁殖习性、苗种繁育、营养价值、对硫化物的耐受与解毒能力、人工养殖潜力进行了综述,以期有效地开展滨海地区单环刺螠的保护以及管理工作,有序推动室外池塘养殖、室内工厂化养殖和滩涂放养模式的开展。     

Short-term storage and cryopreservation of Urechis unicinctus (Echiura: Urechidae) sperm

In the present study, attempts were made to preserve Urechis unicinctus sperm at 4°C. Cryopreservation procedures were optimized for various cryoprotectants and freezing rates, equilibration times and dilution ratios. During short‐term storage, the motility of undiluted sperm was extended for 6 days of cold storage,and in 70% and 100% artificial seawater only persisted for 2 and 4 days respectively. The survival rate of undiluted sperm was maintained at a high level accordingly. After cryopreservation, the highest motility and survival rate (41.5±2.2%) were obtained in 15% dimethyl sulphoxide (Me₂SO) using a freezing rate of 30°C min^?1. After thawing the sperm cryopreserved in glycerol lost almost all motility. The motility and survival rate of post‐thawing sperm did not show significant differences after 8 and 15 min equilibration using 15% Me₂SO as cryoprotectant; the values were significantly higher than those of 2 min equilibration. Comparisons of motility and survival rate between treatments pooled by dilution ratio showed that the effect of 1:1 ratio (sperm volume to cryoprotectant volume) was best. There was no difference between 1:3 and 1:5, and other ratioswere significantly worse.     

单环刺螠的繁殖生物学

运用实验生态学和组织学方法研究了单环刺螠的性比、性腺指数、繁殖力、胚胎与胚后发育等繁殖生物学特征,并采用正交实验法分析了单环刺螠受精率和孵化率的最佳环境条件,为单环刺螠的人工增养殖提供科学依据。结果显示,单环刺螠雌、雄比例为1∶1.17,雄性略多于雌性。成熟卵径为(145.16±1.70)μm×(141.27±1.94)μm,处于第1次成熟分裂前期。绝对繁殖力为111 800～720 488(449 684±265 905)粒,相对繁殖力为2 214～12 702(6 849±4 854)粒,怀卵量与体质量呈显著正相关。生物学最小型体长约7 cm,体质量为11.21 g。精子密度为(5.88±0.52)×109个/mL,雄性个体平均精子数为(2.41±0.73)×1010个/只。雌性性腺指数在繁殖季节4—5月份呈现2个峰值,表明单环刺螠为分批产卵类型。在盐度25、水温15°C的条件下,胚胎发育经20～24 h孵化。组织学研究表明,单环刺螠为间黄卵,进行不等全裂,且有螺旋卵裂的特征,形成偏极囊胚,原肠作用方式为外包和内陷。胚后发育经担轮幼虫(孵化后1～10 d)、体节幼虫(11～20 d)、蠕虫状幼虫(21～30 d)发育为幼螠。正交实验结果表明,单环刺螠受精率的最佳环境条件为温度25°C、盐度35、pH 8～9;孵化率的最佳环境条件为温度15°C、盐度25、pH 8～9。     

单环刺螠Vasa基因的早期发育表达图式

Vasa基因编码DEAD-box家族成员中一种ATP依赖的RNA解旋酶,是决定生殖系发育的重要调控因子之一。采用同源克隆策略及SMART-RACE技术,克隆了海洋经济螠虫动物单环刺螠Vasa基因的全长cDNA,该序列长4 080 bp,开放阅读框2 322 bp,编码733个氨基酸,具有DEAD-box蛋白家族共有的全部9个保守域。整体原位杂交和半定量RT-PCR结果显示,Vasa基因在未受精卵、受精卵、2～8细胞的早期胚胎中均有明显的表达,显示其母源性提供的特点;从囊胚开始,表达量明显降低,在原肠胚表达信号主要集中在内中胚层细胞中;至担轮幼虫,表达信号进一步集中在消化道处;当发育至体节幼虫时,阳性细胞分布于消化道和体节的隔膜处,进入蠕虫状幼虫,信号仅在头部的腹刚毛附近以及后肠周围的细胞中表达。实验结果为探知刺螠动物生殖系的起源和分化以及低等型生殖腺的发生提供重要的数据。     

单环刺螠消化道的发生和分化

用组织学、组织化学和电镜技术对单环刺螠（Urechis unicinctus）消化道的发生及分化进行研究。结果表明，单环刺螠消化道起源于原肠胚期内陷而成的原肠腔；至早期担轮幼虫时期，消化道连通，开始摄食，此时据管腔直径不同消化道可分为口、食道、胃、中肠及后肠。附着变态后，其消化道在结构及功能上都有了明显的发育与分化。至蠕虫状幼虫时期。食道、胃及后肠已出现黏膜下层及肌层。嗉囊与砂囊可明显区分。中肠已产生肌纤维的分化，呼吸肠由中肠分化而来，其胞体细长，且核质比较小，可与中肠明显区分。至幼螠时期，食道前端产生了咽部的分化，至此消化道各部位在结构及功能上都与成体有了很大的相似性。即由口、咽、食道、嗉囊、砂囊、胃、中肠、呼吸肠、后肠和肛门组成。组织化学研究结果表明，随着发育，消化道各部位分别呈现不同的碱性磷酸酶、酸性磷酸酶、脂酶、ATP酶、非特异性酯酶及多糖类物质活性。     

单环刺螠虫消化道组织学和细胞学

对单环刺螠虫(Urechis unicoinctus VonDrasche)消化道的结构进行了组织学和细胞学观察。单环刺螠虫消化道可分为咽、食道、嗉囊、砂囊、胃、中肠、呼吸肠、直肠和排泄腔。咽、食道和直肠管壁由内向外分为粘膜层、粘膜下层、肌层和外膜，嗉囊、砂囊、胃、中肠和呼吸肠壁仅由粘膜层和外膜组成。除食道外，胃之前的消化道及直肠上皮细胞均有发达的纤毛，中肠和呼吸肠上皮主要为微绒毛。消化道上皮主要分为3类细胞，第1种为柱状上皮细胞；第2种为粘液细胞；第3种为分泌细胞。粘液细胞和分泌细胞散布于柱状上皮细胞之间，且结构和数量随部位而异：粘液细胞在咽、食道、嗦囊、胃、中肠和直肠上皮中有较多的分布，分泌细胞在砂囊、胃、中肠和呼吸肠中数量较多。     

单环刺螠生活史研究

有关单环刺发育周期的研究，国内外迄今未见专门报道。本文报道了烟台沿岸单环刺早期胚胎发育、各期幼虫形态标志、幼和成的形态特征的研究结果。     

单环刺螠增养殖生物学的研究

单环刺螠个体鲜出肉率大致为冬季39～47％，春季17～27％。食性为滤食性，以水中悬浮性颗粒为食。气温7℃，干露时间持续72h．均能成活。生活水温是0～30℃，临界高温32．5℃，临界低温-4℃。生活的盐度范围是15～36，适宜盐度范围24．94～35．77。pH值的耐受范围是4．46～9．5，适宜范围7.5～9．42。在溶解氧含量达1．14mg／L时，活动正常。