程序性细胞死亡因子10抑制Ⅰ型干扰素表达并促进FMDV复制

旨在探究宿主蛋白程序性细胞死亡因子10（programmed cell death factor 10，PDCD10）通过抑制Ⅰ型干扰素表达进而促进口蹄疫病毒（foot-and-mouth disease virus，FMDV）的复制。首先，本研究验证了过表达和沉默PDCD10对FMDV复制的影响，接着利用双荧光素酶报告系统探究PDCD10对Ⅰ型干扰素信号通路活化的影响，最后，利用实时荧光定量PCR探究PDCD10对Ⅰ型干扰素通路下游刺激基因（IFN-stimulated genes，ISGs）转录的影响。结果表明，过表达PDCD10显著促进FMDV的复制，沉默PDCD10显著抑制FMDV的复制。与对照相比，过表达PDCD10后感染仙台病毒（Sendai virus，SeV）的细胞培养液上清液显著促进FMDV复制，进一步，PDCD10显著抑制SeV诱导的IFN-β启动子以及NF-κB的激活且呈剂量依赖性，并且PDCD10负调控Ⅰ型干扰素通路信号分子转录，最后还发现PDCD10负调控Ⅰ型干扰素下游ISGs转录。本研究结果为深入探究PDCD10在抗病毒天然免疫中的作用积累了资料。     

轮状病毒感染肠上皮细胞激活宿主先天免疫研究进展

轮状病毒(RV)是引起婴幼儿、幼畜禽急性肠胃炎的人畜共患病原,常与其他病原体混合感染,多以呕吐,严重水样腹泻,脱水为临床症状,感染后具有较高病死率,对人类公共卫生以及养殖业造成极大危害。RV病原相关分子模式(PAMP)可被肠上皮细胞(IECs)中一组可遗传的模式识别受体(PRR)识别,通过IECs、先天免疫细胞与RV互作,激活细胞内信号级联,从而迅速诱导炎症和多种抗病毒基因表达。论文就轮状病毒特性、肠道先天免疫等方面进行综述,探讨RV感染宿主IECs后诱导不同抗病毒信号通路,为利用先天免疫途径预防轮状病毒感染提供了一定的参考。     

中草药复方制剂对青脚麻鸡法氏囊免疫功能、抗氧化性及增殖凋亡基因表达的影响

试验旨在研究由金银花、黄连、蒲公英等药材组成的中草药复方制剂,对青脚麻鸡法氏囊组织结构、抗氧化功能、细胞因子和抗体分泌及增殖凋亡相关基因(PCNA和Caspase-3)表达的影响。采用单因子试验设计,将400羽青脚麻鸡按照体重相近原则分为对照组(基础日粮)和试验Ⅰ-Ⅲ组(分别添加0.5%、1.0%和1.5%中草药复方制剂),每组5个重复(n=20),试验期56 d。结果表明,28日龄时,添加1.0%中草药复方制剂可增加青脚麻鸡法氏囊细胞因子(IL-2和IFN-γ)、IBDV抗体和GSH-Px含量及PCNA mRNA和蛋白表达量(P0.05),降低Caspase-3 mRNA和蛋白表达量(P0.05)。56日龄时,添加1.0%中草药复方制剂可增加青脚麻鸡法氏囊IFN-γ、IBDV抗体和GSH-Px含量(P0.05),降低MDA含量及Caspase-3蛋白表达量(P0.05)。显微观察可见,28和56日龄时,添加1.0%中草药复方制剂可显著增加法氏囊小叶和淋巴小结面积(P0.05),降低法氏囊Caspas-3阳性细胞数量,说明日粮中添加1.0%中草药复方制剂对法氏囊组织结构及免疫抗氧化功能均有明显改善,对法氏囊增殖和凋亡相关基因表达有明显调控作用。文章分别从分子和组织水平揭示中草药复方制剂对青脚麻鸡法氏囊生长发育和免疫功能的影响及可能机制,为新型中草药复方制剂研发及其在青脚麻鸡生产中的应用提供科学依据。     

Shikonin inhibits neuronal apoptosis induced by OGD through targeting PI3K/Akt signaling pathway

AIM: To explore the effect of shikonin on rat primary cortical neurons in oxygen-glucose deprivation (OGD)-induced injury model.METHODS: The neurons were pretreated with shikonin at different concentrations (0.02, 0.2, 2 and 20 μmol/L) followed by treatment with OGD. Lactate dehydrogenase (LDH) release assay and fluorescein diacetate/propidium iodide (FDA/PI) double staining were used to detect neuronal viability and apoptosis, and then the optimal concentration of shikonin was determined. LY294002 (PI3K/Akt signaling pathway inhibitor, 1 μmol/L) was added before the addition of shikonin, and the protein level of p-Akt (Ser473) in the neurons was determined by Wes-tern blot. LDH release assay and FDA/PI double staining were also used to detect neuronal viability and apoptosis.RESULTS: A certain concentration (0.2~20 μmol/L) of shikonin increased the viability of impaired neurons (P<0.05) and the protein level of p-Akt (Ser473) in the neurons (P<0.05). The effect of shikonin on neuronal p-Akt (Ser473) levels and the cell death were blocked by LY294002 (P<0.05).CONCLUSION: A certain concentration of shikonin reduces OGD-induced apoptosis of rat primary cortical neurons by activating PI3K/Akt signaling pathway.     

体细胞克隆荷斯坦奶牛出生后死亡犊牛内脏器官的组织病理学观察

为探究体细胞克隆荷斯坦奶牛出生后死亡的原因,对新生后死亡的克隆荷斯坦公牛和自然繁殖的荷斯坦公犊的主要组织器官进行比较。通过解剖和石蜡切片-HE(hematoxylin-eosin staining)染色技术,对主要的组织器官结构进行观察和分析。结果表明,新生后死亡的克隆荷斯坦公牛肺部结构清晰;肝脏的肝细胞明显肿大,出现脂肪轻度变性;肾小管上皮细胞出现变性;心肌的肌纤维间空隙增大;骨骼肌纤维间隙明显,空泡变性,这可能导致该克隆牛犊肌肉无力并功能不全;淋巴结皮髓质界限不分明,淋巴小结细胞较稀疏,生发中心不明显,淋巴窦细胞较少;脾脏内红细胞较少,这说明该克隆牛的造血功能可能不完善;胸腺的皮质部分和髓质部分界限不明显,嗜酸性胸腺小体不易辨认,可能发育不全。该克隆公牛免疫器官出现不同程度的发育不全现象较严重,这有可能是其出生后死亡率高的主要原因。     

谷氨酰胺对斜带石斑鱼GF-1细胞中C-Myc蛋白的表达与神经坏死病毒复制的影响

为探讨C-Myc表达、谷氨酰胺代谢和神经坏死病毒复制三者之间的关系,本研究首先克隆了斜带石斑鱼鳍条细胞(GF-1)中的C-Myc基因(GF-1-C-Myc),结果显示GF-1-CMyc基因cDNA全长814 bp,开放阅读框(ORF)为285 bp,编码95个氨基酸(aa),有亮氨酸拉链结构域与螺旋-环-螺旋(HLH)结构域。实验表达和纯化了GF-1-C-Myc蛋白,并制备其多克隆抗体。采用实时定量PCR技术(qRT-PCR)与免疫印迹法(WB)检测了GF-1-C-Myc基因的表达和神经坏死病毒的复制。结果显示,缺乏谷氨酰胺会同时抑制GF-1-C-Myc基因的表达和神经坏死病毒(NNV)的复制,添加谷氨酰胺可同时促进GF-1-C-Myc的表达和NNV的复制;此外,NNV感染可上调GF-1-C-Myc基因的表达,并显著消耗GF-1细胞培养液中的谷氨酰胺。研究表明,GF-1-C-Myc基因可调控宿主谷氨酰胺代谢,从而有利于神经坏死病毒的复制。本结果为防控NNV的感染提供了参考。     

冠心病血瘀证与血液检验相关指标分析

目的 探讨冠心病血瘀证与血液相关检验指标的关系。方法 选择175例冠心病患者，其中血瘀证组112例，非血瘀证组63例。研究对象均在住院次日清晨平躺测量血压，空腹状态下抽取静脉血液留置标本，检测血常规和血脂、血糖、肾功能等生化指标，记录患者吸烟史。比较两组患者指标的差异性。结果 血瘀证组患者的血常规中红细胞分布宽度-CV值（Rdw-cv）、红细胞分布宽度-SD值（Rdw-sd）、血小板分布宽度（Pdw）、血小板平均体积（Mpv）、血小板比积（Pct）、大型血小板比率（P-lct）均明显高于非血瘀证组（P<0.01，P<0.05）；血瘀证组患者载脂蛋白B（ApoB）、血脂总胆固醇（TC）均明显高于非血瘀证组（P<0.01，P<0.05）；血瘀证组中患者吸烟率明显高于非血瘀证组（P<0.05）。结论 冠心病血瘀证组患者Rdw-cv、Rdw-sd、Pdw、Mpv、Pct、P-lct、TC、ApoB及烟率均明显高于非血瘀证组，差异具有统计学意义，故以上指标可以作为冠心病血瘀证中医辨证分型的客观临床指标。     

直立型扁蓿豆对干旱胁迫和复水的响应及适应策略

以直立型扁蓿豆[Medicago ruthenica（L.）Sojak.cv.Zhilixing]为材料，于苗期连续干旱处理12 d后复水4 d，研究直立型扁蓿豆幼苗形态结构特征、生理代谢及生物量分配对干旱胁迫及复水的响应，揭示直立型扁蓿豆对干旱胁迫及复水的适应策略。结果表明：随着干旱胁迫时间延长，直立型扁蓿豆叶片气孔开放率逐渐降低，处理9 d后气孔及表皮细胞密度比正常浇水处理（CK）分别增加48.5%和36.6%，形成小而密的表皮细胞和气孔。生理上，除MDA含量随胁迫时间的延长逐渐增加外，其余指标均先升高后降低，干旱胁迫9 d时达最高，SOD、POD、叶绿素、可溶性糖、可溶性蛋白及脯氨酸分别较CK提高88.9%、111.2%、86.7%、140.5%、147.8%和124.6%。同时，生物量随胁迫时间的延长先增大后减小，于干旱胁迫9 d达最大值，比CK增加16.4%，总的分配格局表现出地上生物量投资高于地下，地下生物量投资比例随胁迫时间的延长逐渐增加，而地上生物量变化与其相反。复水后各指标均能恢复至CK水平或超过CK，表现出极强的复水敏感性和潜在恢复能力。该品种扁蓿豆对干旱胁迫及复水的适应主要分为3个时期：主动适应期，其生理参数的可塑性指数为形态参数的1.33倍，主要通过抗氧化及渗透调节来减少水分散失增加水分吸收、缓解氧化伤害以适应干旱逆境；被动适应期，其形态参数的可塑性指数为生理参数的1.31倍，主要采用牺牲生物量的生存策略以及降低色素含量减少光吸收的光保护机制来提高逆境下的生存能力；复水恢复期，根冠比、气孔开放率、气孔及表皮细胞密度比CK分别增加25.9%、29.7%、24.2%和16.3%，其较高的根冠比和叶片较高的气孔开放率及小而密的气孔及表皮细胞特征，保证了直立型扁蓿豆吸水能力以及水分运输效率的迅速恢复。综上，直立型扁蓿豆抗旱能力较强，能够通过形态生理的改变以及调整不同器官的生物量分配来应对与适应干旱逆境及复水，且在不同处理阶段采取不同的适应策略以达到生存目的。     

Autophagy induces mitochondrial dysfunction in neurons from neonatal rats with hypoxic ischemic encephalopathy

AIM: To explore the influence of autophagy on the induction of mitochondrial dysfunction in the neurons in a neonatal rat hypoxic ischemic encephalopathy (HIE) model. METHODS: Ten-day-old rat pups (n=30) were randomly divided into sham group and model group. The rats in the latter group were subject to hypoxia-ischemia treatment via unilateral common carotid artery ligation. The rats were sacrificed for brain pathological examination, and the protein levels of cleaved caspase-3 and LC3B-II were detected by immunohistochemical analysis. For the in vitro experiments, the autophagy of primarily cultured rat neurons was observed after hypoxia, and Western blot and mitochondrial function testing were also performed. RESULTS: Compare with sham group, the hypoxia-ischemia treatment caused atrophy and apoptosis of neurons, and ventricular area enlargement of rat brains. Immunohistochemical results demonstrated significantly higher levels of apoptosis- and autophagy-associated proteins, such as cleaved caspase-3 and LC3B-II (P<0.01). In vitro experiments demonstrated that hypoxia induced autophagy and apoptosis in the neurons. Compared with sham group, there were higher levels of reactive oxygen species and mitochondrial superoxide, and lower mitochondrial membrane potential in the model group (P<0.01). CONCLUSION: In neonatal HIE rat model, the hypoxia-induced mitochondrial dysfunction is related to apoptosis and autophagy. It will provide a new idea for administration of autopahgy inducer agents in treatment of HIE.