五氯酚钠对克氏原螯虾急性毒性试验

采用室内试验研究方法,研究了五氯酚钠(PCP-Na)对2种规格的克氏原螯虾的急性毒性,并求出相应的安全浓度,结合人体PCP负荷相关指数(允许摄取的理论值),做出对人的食品安全评价。结果表明,体重在1.2～2.3g(平均体重为1.38g)左右的小虾的TLm24=80mg·kg-1,TLm48=67.5mg·kg-1,安全浓度为14.46mg·kg-1;体重在20.7～39.8g(平均体重为29.5g)左右的大虾的TLm24=750mg·kg-1,TLm48=500mg·kg-1,安全浓度为100mg·kg-1。     

对虾白斑综合征病毒在螯虾动物模型的感染特性

应用克氏原螯虾作为动物模型研究对虾白斑综合征病毒（ＷＳＳＶ）的感染增殖特性，涉及感染温度，感染途径，继发感染，半数致死量（ＬＤ５０），免疫保护及保存期等，结果显示，２２－２５℃时，接种ＷＳＳＶ的螯虾一般于２－７d内死亡，温度升高对病毒增殖影响不显著，３０－３２℃时，平均死亡时间２－６d，温度降低对病毒增殖影响较显著，１５－１９℃时，接种螯虾平均２－１０d内死亡，８－１０℃时，平均死亡时间３－６d，感染途径分别用腹节肌肉，腹节皮下洲射及口服，均能使螯虾感染发病，而浸泡方式不能使螯虾发病，细菌分离和细菌定量结果表明，寄考于螯虾心脏，肝胰腺内的阴沟肠杆菌在感染后期大量增殖，菌量分别是正常螯虾的２５和３０倍，形成继发感染，用螯虾心脏，肝胰腺内的阴肠杆菌在感染后期大量增殖，菌量分别是政党螯虾的２５和３０倍，形成继发梁。用螯虾测定ＷＳＳＶ的ＬＤ５０为１０^-6.5.mL^-1种毒液，将病毒５６℃，３０min灭活后免疫螯虾，不能使螯虾形成免疫保护，ＷＳＳＶ匀浆液－３０℃冻存１年后失活，而－３０℃冻存于螯虾体内ＷＳＳＶ保存１年后仍有活力。     

三种杀虫剂对克氏原螯虾急性毒性研究

采用换水式渔药毒性试验的方法,在水温20℃~23℃条件下,用敌百虫、克虫威及敌杀死对克氏原螯虾进行急性毒性试验研究。结果表明:敌百虫、克虫威及敌杀死对体重20g左右的克氏原螯虾48hLC50值分别为2.78mg/L、0.31μg/L和0.19μg/L;安全浓度分别为0.264mg/L、0.024μg/L、0.043μg/L。     

环介导等温扩增技术检测克氏螯虾样品中的副溶血性弧菌

建立了环介导等温扩增技术检测副溶血性弧菌的方法。以副溶血性弧菌tlh基因作为靶基因,设计特异性引物,建立了环介导等温扩增(LAMP)检测方法,并分别采用LAMP检测方法和国家标准方法(GB/T4789.7-2008)对克氏螯虾样品中的副溶血性弧菌进行检测。结果表明,建立的LAMP方法最低检出限为1×101 cfu/mL;对6种细菌共8株菌进行LAMP法扩增,仅3株副溶血性弧菌得到阳性扩增。建立的LAMP检测方法与国家标准检测方法检测结果一致,准确度高。     

克氏原螯虾白斑病毒株(WSSV-Cc)基因组的一个印迹

从自然感染、濒死的克氏原螯虾中分离出的白斑病毒株(Cambarus clarkii whispovirus,WSSV-Cc或Cc株)是一株基因组较小的新毒株。为寻找白斑病毒进化过程在基因组中留下的印迹,进行了显微和超微观察、基因组架构与系统发育分析及相关基因扩增等研究。选择Cc株74L、86L、87R、88R、92R和95R的6个基因,与8个白斑病毒株的同源基因所编码蛋白序列构建进化树,结果可分为克氏原螯虾病毒(Cc株、CN02株、Pc株)和海水对虾病毒(CN株、CN01株、CN03株、CN04株、TW株和KR株) 2支。再对不同毒株的同源蛋白进行多重序列比对,显示Cc-87R是与海水对虾病毒株同源蛋白差异显著、缺失跨膜区(TMD)及其相邻287 aa序列、但仍有完整PI3K_rbd结构域的病毒膜蛋白。进一步设计和使用87R-F/87R-R和238-F/87R-R两对引物,分别以淡水小龙虾病毒Cc株和海水对虾病毒CN株的基因组为模板进行核酸扩增,结果从Cc株模板中扩增到大小为709 bp,含Cc-87R全部序列的核酸片段;而从CN株的模板中却扩增到大小分别为1 600和4 810 bp,仅含Cc-87R部分序列的核酸片段,为Cc-87R是Cc株基因组中一个序列结构独特的印迹提供了实验证据。这一发现将有助于克氏原螯虾白斑病毒病原的检测及其流行趋势预警。     

克氏原螯虾工厂化繁育条件下胚胎发育时间序列

[目的]观察克氏原螯虾在工厂化繁育条件下的胚胎发育形态与时间序列。[方法]选择健康的克氏原螯成虾作亲本,在室内水泥池进行工厂化繁殖育苗,采集抱卵虾的受精卵,测定水温,观察胚胎发育状况,记录胚胎心跳情况,并进行数码摄影显微镜观察。[结果]克氏原螯虾在工厂化繁育条件下的胚胎过程可分为7个主要时期,即受精卵、卵裂期、囊胚期、原肠期、无节幼体期、复眼色素期和孵化期,胚胎发育各期出现的时间序列分别为0、1．5,4、6、11、21和32d,有效积温分别为0、31、61、96、181、340和520℃·d。[结论]克氏原螯虾在工厂化繁育条件下的胚胎发育中,在室内水温控制在15～19℃时,仍能进行工厂化繁育苗,发育时闻为32d。有效积温为520℃·d,可提高克氏原螯虾养殖产业链的整体效益。     

南四湖虾类调查

对南四湖虾类资源进行了２年调查，采集的标本经鉴定共有６种，隶属于３科，５属，这里首次发现克氏螯虾。对南四湖虾类所占渔业地位进行了评价，探讨了保护，利用对策。