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1.
旨在构建以乙肝核心抗原(HBcAg)为载体呈现猪流行性腹泻病毒(PEDV)S1抗原表位的病毒样颗粒。将PEDV S1蛋白中含B细胞表位的270 bp片段插入到HBcAg主要免疫显性区域(MIR),构建重组质粒pET-32a(+)-HBcAg-PEDV S1,转化到感受态细胞BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE鉴定纯化后的重组蛋白,通过透射电镜观察其形态结构。结果显示,成功构建重组质粒pET-32a(+)-HBcAg-PEDV S1,并在BL21(DE3)中以包涵体形式表达,纯化、复性后的重组蛋白经过2%磷钨酸负染后透射电子显微镜检测到病毒样颗粒结构。HBcAg-PEDV S1重组蛋白能够自发形成病毒样颗粒,在原核表达中,乙肝核心抗原可作为载体呈现PEDV S1抗原表位,为今后新型PED疫苗的研究提供了思路。  相似文献   
2.
为了调查新疆某规模化奶牛场犊牛腹泻的原因并确定病原,无菌采集15份腹泻犊牛粪样进行病原的分离培养,采用形态学观察、生化试验、血清学和致病性分析等方法鉴定分离菌株,利用大肠杆菌16S rRNA通用引物进行基因序列扩增并测序,使用DNAStar软件将分离菌株测序结果与GenBank中的其他菌株序列进行同源性比对,采用Mega 6.0软件依据16S rRNA序列构建分离株系统进化树并进行分析,同时对分离菌株的黏附性基因进行鉴定。结果从15份样品中分离获得2株分离菌株;试验显示,分离株均发酵葡萄糖,MR试验、吲哚和甲基红试验呈阳性,硫化氢、氧化酶、DNA酶、VP试验呈阴性。2株分离菌株血清型均为O78,且均具有致病性。药敏试验显示,分离菌株均对环丙沙星、卡那霉素、氟哌酸、庆大霉素、磺胺甲唑、头孢哌酮、壮观霉素、多黏菌素B、呋喃妥因敏感。分离株16S rRNA基因序列与大肠杆菌菌株NF738(GenBank登录号:MT649856)同源性为≥99.7%,且处于同一大分支。经PCR鉴定,分离菌株具有K88黏附性基因。本研究结果证实了引起新疆某规模化奶牛场犊牛腹泻的病原为致病性产肠毒素型大肠杆菌。  相似文献   
3.
Liver abscesses in feedlot cattle are polymicrobial infections. Culture-based studies have identified Fusobacterium necrophorum as the primary causative agent, but a number of other bacterial species are frequently isolated. The incidence of liver abscesses is highly variable and is affected by a number of factors, including cattle type. Holstein steers raised for beef production have a higher incidence than crossbred feedlot cattle. Tylosin is the commonly used antimicrobial feed additive to reduce the incidence of liver abscesses. The objective of this study was to utilize 16S ribosomal RNA amplicon sequence analyses to analyze the bacterial community composition of purulent material of liver abscesses of crossbred cattle (n = 24) and Holstein steers (n = 24), each fed finishing diet with or without tylosin. DNA was extracted and the V3 and V4 regions of the 16S rRNA gene were amplified, sequenced, and analyzed. The minimum, mean, and maximum sequence reads per sample were 996, 177,070, and 877,770, respectively, across all the liver abscess samples. Sequence analyses identified 5 phyla, 14 families, 98 genera, and 102 amplicon sequence variants (ASV) in the 4 treatment groups. The dominant phyla identified were Fusobacteria (52% of total reads) and Proteobacteria (33%). Of the top 25 genera identified, 17 genera were Gram negative and 8 were Gram positive. The top 3 genera, which accounted for 75% of the total reads, in the order of abundance, were Fusobacterium, Pseudomonas, and Bacteroides. The relative abundance, expressed as percent of total reads, of phyla, family, and genera did not differ (P > 0.05) between the 4 treatment groups. Generic richness and evenness, determined by Shannon–Weiner and Simpson’s diversity indices, respectively, did not differ between the groups. The UniFrac distance matrices data revealed no clustering of the ASV indicating variance between the samples within each treatment group. Co-occurrence network analysis at the genus level indicated a strong association of Fusobacterium with 15 other genera, and not all of them have been previously isolated from liver abscesses. In conclusion, the culture-independent method identified the bacterial composition of liver abscesses as predominantly Gram negative and Fusobacterium as the dominant genus, followed by Pseudomonas. The bacterial community composition did not differ between crossbred and Holstein steers fed finishing diets with or without tylosin.  相似文献   
4.
对内蒙古农业大学校园内表现花器绿变症状的菊花样品进行采集和DNA提取,应用植原体16S rRNA基因和rp基因的引物进行巢式PCR扩增,从感病样品中分别扩增得到了长度均约为1.2 kb的片段。序列一致性分析表明,菊花绿变植原体16S rRNA基因与翠菊黄化植原体匈牙利风信子株系(GenBank登录号MN080271)、印度玉米株系(KY565571)、印度繁缕株系(KC623537)和印度马铃薯株系(KC312703)的核酸一致性最高,为99.9%,rp基因序列与翠菊黄化植原体立陶宛洋葱株系(GU228514)的核酸一致性最高,为99.8%。基于16S rRNA基因和rp基因构建系统进化树时发现,菊花绿变植原体均与16SrI-B亚组成员聚为一起。16S rRNA基因相似性系数分析表明,菊花绿变植原体与洋葱黄化植原体(AP006628)的相似性系数最高为1.00,洋葱黄化植原体(AP006628)在分类上属于16SrI-B亚组。因此,我们可以确定该菊花绿变植原体属于16SrI-B亚组。这是我国首次报道菊花绿变病的发生。  相似文献   
5.
利用传统育种技术与分子标记辅助选择技术有机结合,成功培育出了株型理想、不育转换起点温度低于23.5℃、育性稳定、异交性好、配合力强的两用核不育系隆科638S,于2014年通过湖南省品种审定。全基因组重测序分析结果表明,隆科638S含有约56.0%的早籼稻遗传背景,以及约8.7%的粳稻遗传背景,为充分利用“早晚生态型间和籼粳亚种间”双重杂种优势奠定了遗传基础。依据分子设计和杂种优势群理论,按“双亲抗性基因互补”和“双亲品质基因一致性”配组原则,高效培育出一批绿色、优质、广适、高产的隆两优系列品种,迅速成为我国南方杂交水稻主栽品种,推动了长江流域杂交中籼品种的更新换代。  相似文献   
6.
Soybean seed includes various bioactive substances. Also, they contain a variety of antinutritional factors including lipoxygenase, Kunitz trypsin inhibitor (KTI), lectin, and 7S α' subunit proteins. The genetic removal of these proteins will improve the nutritional value of soybean seed. The objective of this research was to breed new soybean with tetra recessive alleles (lox1lox2lox3/lox1lox2lox3ti/tile/lecgy1/cgy1) for lipoxygenase, KTI, lectin, and 7S α' subunit proteins. Seven parents were used to breed tetra null strain. SDS‐PAGE and Western blot analysis were used to determine the presence or absence of lipoxygenase, 7S α' subunit, KTI, and lectin proteins in mature seed. Tetra null soybean line has a purple flower, determinate growth habit, tan pod, and yellow seed coat colour. Stem height of the breeding line was 62.3 cm. The 100‐seed weight of the breeding line was 27.1 g and yield (t/ha) was 2.84. This is the first soybean strain with lox1lox2lox3/lox1lox2lox3ti/tile/lecgy1/cgy1 genotype (absence of lipoxygenase, KTI, lectin, and 7S α' subunit proteins).  相似文献   
7.
青海省不同生态区蚕豆根瘤菌16S rDNA分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
为了阐明青海省蚕豆根瘤菌的遗传多样性和亲缘关系,同时为发现和获得新的根瘤菌物种提供资源,采集和分离了青海省不同生态区蚕豆主栽品种青蚕14中的根瘤菌,并对其中分离到的6个菌株(CD1~6)进行16S rDNA鉴定分析。将6株蚕豆根瘤菌的全序列结果与NCBI中已报道的序列进行相似性比对,发现其相似度较高,其中供试菌株CD4与KF008225.1相似度最高,达到98%,其余均在95%到96%之间。6株供试菌分属4个菌属,CD1和CD2共属节细菌属,CD3属于分枝杆菌属,CD4和CD5属于快生根瘤菌属,CD6属于中慢生根瘤菌属,表明来自不同地区的蚕豆根瘤菌存在较大差异。聚类分析结果显示,蚕豆根瘤菌的6个菌株分属5个不同系统发育分支,证明青海省不同生态区蚕豆根瘤菌种类多样性较为丰富。  相似文献   
8.
黄土丘Ⅴ区因其独特的土壤及地形和水文地质条件,使淤地坝坝控区的重力侵蚀严重,以至于毁坏耕地、道路和桥梁等,严重影响淤地坝效益的发挥。针对黄土丘Ⅴ区典型小流域坝控区在运行期间因沟岸崩塌和岸坡滑塌等产生的重力侵蚀导致淤地坝泥沙淤积量计算失真的问题,采用实测库容与3S技术生成库容资料和原设计库容曲线复核率定的三重复核分析方法,对运行期淤地坝坝控区域的重力侵蚀来源、诱发因素及预测进行分析。结果表明:(1)反映淤地坝淤积形态的形态判别系数α'为0.711~208.517,均值48.238,说明除阳山上小型坝小于临界数2.2为椎体淤积外,其他淤地坝为三角洲淤积;(2)坝控区形态参数如淤积面面积、周长、淤积体积及淤积形态判别系数等对重力侵蚀影响较大,给出了重力侵蚀量及侵蚀模数的计算关系;(3)重力侵蚀模数的范围184.79~812.80t/(km~2·a),均值360.68t/(km~2·a),坝控区淤积产沙模数的范围225~2 719t/(km~2·a),均值1 382t/(km~2·a)。重力侵蚀模数约占淤积产沙模数的26.1%,说明在黄土丘陵沟壑区第Ⅴ副区淤地坝的库区拦沙既有上游因水力侵蚀产沙又有库区自身重力侵蚀所致,淤地坝的运行管理既要防止重力侵蚀破坏现有耕地,又要防止淤地坝淤积出的土地被沟道基流苦咸水破坏,从而导致淤地坝淤地无法高效利用。  相似文献   
9.
To systematically explore the microbial diversity and function in the rumen of Chinese Simmental cattle,this experiment used 16S rRNA gene high-throughput sequencing technology to detect and analyze the rumen fluid samples of Simmental cattle (about 20 months old,the average weight was 550 kg),and its function was predicted by PICRUSt.The results showed that a total of 66 712 high-quality sequences were obtained from the Illumina Miseq sequencing platform,and 1 797 operational classification units (OTU) were obtained by cluster analysis.The taxonomic identification was divided into 13 phylums,20 classes,22 orders,33 families and 59 genuses;Firmicutes and Bacteroidetes were dominant bacteria,accounting for 62.46% and 22.45%,respectively;Based on the genus composition,[Eubacterium]_coprostanoligenes_group (9.16%),Ruminococcus_2 (7.90%),norank_f__Bacteroidales_RF16_group(6.23%),norank_f__Ruminococcaceae(4.79%),Rikenellaceae_RC9_gut_group(4.72%),norank_f_Bacteroidales_BS11_gut_group(4.49%),Ruminococcus_1(4.43%),etc.The PICRUSt function of the 16S rRNA genome predicted that the rumen flora function was mainly concentrated in carbohydrate transport and metabolism,and might contain a large amount of cellulose and lignin degrading enzyme genes.In summary,the high-throughput sequencing technology based on 16S rRNA gene fully revealed the diversity of rumen bacteria in Simmental cattle,and predicted that it was rich in protein decomposition and lignocellulose degrading enzymes.The basis of microbial cognition provided a reference for further research on rumen microbial functional genes closely related to some important nutritional and physiological functions.  相似文献   
10.
小麦-玉米轮作体系中土壤细菌菌群结构及多样性分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
合理的轮作可以改善土壤微生物群落结构,提高土壤肥力,减少病虫害的发生。为了探讨小麦和玉米轮作对土壤细菌的影响,采用传统PCR克隆文库构建、克隆测序并结合EzBioCloud细菌分类鉴定,对河南小麦-玉米轮作体系下农田土壤细菌的菌群结构变化及多样性特征进行了分析。结果表明,变形菌门(33.73%)和拟杆菌门(31.50%)细菌是小麦-玉米轮作体系土壤中最主要的优势菌群,其次为酸杆菌门、芽单胞菌门、放线菌门和疣微菌门等。在小麦和玉米生长期内细菌的丰度和多样性明显高于二者的间隔期;玉米生长期间细菌菌群丰度和物种多样性更高。不同的微生物群落在土壤中担负不同的生态功能。  相似文献   
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