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1.
3.
克隆了拟穴青蟹(Scylla paramamosain)Na~+/H~+-exchanger基因,其cDNA序列全长3 624 bp,开放阅读框(ORF)长2 886 bp,可编码961个氨基酸,预测蛋白质分子量和等电点分别为110.8 kDa和7.42,具有信号肽和典型的Na~+/H~+-exchanger蛋白结构域,含12个跨膜α螺旋。拟穴青蟹Na~+/H~+-exchanger的氨基酸序列与三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)的一致度最高,达到84.9%;该基因在卵巢中表达量最高,其次是精巢、鳃等;该基因在受精卵时期表达水平最高,大眼幼体时期次之。拟穴青蟹大眼幼体在低盐(盐度7和17)胁迫过程中,Na~+/H~+-exchanger基因在20 min表达水平最高,之后基本恢复到正常表达水平;在高盐(盐度37)胁迫(20 min~2 h)期间,该基因表达水平先下降再逐渐上升。Na~+/H~+-exchanger基因在拟穴青蟹大眼幼体阶段盐度适应中发挥着重要作用,且低盐显著诱导Na~+/H~+-exchanger基因的高表达,推测拟穴青蟹Na~+/H~+-exchanger基因在低盐环境下发挥重要的渗透调节功能。 相似文献
4.
5.
为了研究酵母细胞壁对白羽肉鸡生长性能指标以及新城疫抗体水平的影响,试验选用1日龄科宝肉鸡432羽,随机分为6个处理组,每个处理组6个重复,每个重复12羽。对照组A饲喂基础日粮,B组饲喂含金霉素(50 mg/kg)的基础日粮,C、D、E、F组饲喂添加不同含量(0.5、1、2、10 kg/t)的酵母细胞壁的基础日粮。结果表明:日粮中添加酵母细胞壁能提高肉鸡的生长性能,出栏体重较对照组分别提高6.16%、9.45%、5.09%、1.09%;同时酵母细胞壁可提高肉鸡的新城疫抗体水平和免疫器官指数,增强肉鸡免疫水平。在本试验条件下,添加1 kg/t酵母细胞壁,增重及抗体水平最高。 相似文献
6.
旨在对制备的甘露糖修饰的壳聚糖聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly (D,L-lactide-co-glycolide),PLGA]纳米微球作为口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)核酸疫苗递送载体进行评价。采用西佛碱反应和元素分析制备具有一定取代度的甘露糖修饰的壳聚糖衍生物(mannose modified chitosan,MCS),然后,经双重乳化挥发法制备得到甘露糖修饰的壳聚糖PLGA纳米微球(MCS-PLGA-NPs)。采用纳米粒径仪检测MCS-PLGA-NPs粒径分布和表面电势(zeta)、扫描电镜考察其形态、琼脂糖凝胶电泳观察其对质粒的吸附和吸附质粒后抵抗核酸酶降解能力、CCK-8法检测MCS-PLGA-NPs的细胞毒性、激光共聚焦观察巨噬细胞对MCS-PLGA-NPs-质粒DNA复合物的摄取、荧光显微镜和Western blot验证MCS-PLGA-NPs加载质粒DNA在细胞中的表达。元素分析结果表明,成功制备了取代度为5%~10%的MCS。纳米粒径测定和扫描电镜结果表明,MCS-PLGA-NPs的zeta为正值、粒径分布均匀且形态规则呈球形。琼脂糖凝胶电泳结果显示,MCS-PLGA-NPs吸附质粒的能力随着其质量的增加而增强并且可以在一定程度上抵抗核酸酶降解质粒DNA。在细胞毒性试验中,不同浓度的MCS-PLGA-NPs与RAW264.7细胞共孵育24 h后,细胞存活率仍在85%以上。在细胞摄取试验中,用激光共聚焦显微镜可以明显观察到质粒DNA结合到纳米微球表面被RAW264.7细胞摄取。荧光显微镜和Western blot试验证明MCS-PLGA-NPs加载质粒DNA可以在细胞中进行表达。综上表明,本研究成功制备了MCS以及具有递送核酸疫苗能力的MCS-PLGA-NPs,为FMDV核酸疫苗的递送研究提供了新的方向和见解,也为该递送载体携带特定抗原靶向抗原递呈细胞表面甘露糖受体以及应用于动物免疫的研究奠定基础。 相似文献
7.
《动物医学进展》2021,42(10)
为建立一种早期诊断动物细粒棘球蚴病的方法,诱导表达含PET-EgAgB8/2载体的原核表达菌,以表达纯化蛋白为抗原,制备单克隆抗体,并以制备的抗体建立检测细粒棘球蚴病夹心ELISA方法。结果显示,原核表达菌在37℃诱导培养,菌体上清中大量表达,经验证为目的蛋白,用纯化蛋白免疫小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选得到9株具有良好特异性、稳定分泌单克隆抗体的细胞株,经两两配对,选择75C86/15作为包被抗体,27E57/32为酶标二抗,当包被抗体浓度为1.42μg/mL, 4℃包被过夜、用含50 g/L脱脂奶粉的PBST封闭、抗原作1∶100稀释、酶标二抗1∶1 000稀释、反应底物作用15 min时效果最佳,检测方法的特异性为98.8%,敏感性为95.3%。成功制备细粒棘球蚴抗原B8/2蛋白单克隆抗体并建立了ELISA检测方法。 相似文献
8.
9.
【目的】为提高鸡蛋风味,同时增加蛋中硒含量,观测探究鸡群饲喂添加有红枣粉和有机酵母硒的日粮后,鸡蛋在风味和硒含量方面的变化情况。【方法】试验设1个对照组,3个不同有机酵母硒添加浓度处理试验组。对照组日粮添加无机硒亚硒酸钠0. 3mg/kg;试验组用红枣粉代替玉米粉,同时添加有机酵母硒,有机酵母硒添加浓度分别为0. 3mg/kg、0. 5mg/kg、0. 7mg/kg。【结果】鸡群饲喂3周后,对照组和试验各组的鸡蛋均达到了富硒鸡蛋的标准,对照组鸡蛋中硒含量0. 21mg/kg,三个试验组鸡蛋中硒的含量均在0. 41~0. 44mg/kg之间,蛋中硒含量约是对照组的2倍;同时,添加了红枣粉和有机酵母硒后,各试验组鸡蛋的风味优于对照组,香味更浓郁。【结论】有机酵母硒比无机硒能更好地提高鸡蛋中的硒含量,鸡群饲喂添加有红枣粉和有机酵母硒的日粮后,可明显提高鸡蛋硒含量,并可改善鸡蛋的风味。从成本控制和鸡蛋硒含量的角度考虑,建议有酵母硒的添加量以0. 3~0. 5mg/kg为最佳。 相似文献
10.