盐度和无机碳对蛋白核小球藻生长、胞外碳酸酐酶活性及其基因表达的影响

为探讨小球藻中碳酸酐酶对环境调控的响应规律，提高小球藻对无机碳的利用和生物量，本文采用生化和荧光定量PCR方法研究了盐度和2种无机碳对蛋白核小球藻（Chlorella pyrenoidosa）生长、胞外碳酸酐酶（CA）活性及3种亚型碳酸酐酶基因（ca）表达的影响。结果表明，15和30盐度培养藻生长较快，45盐度藻细胞密度降为15盐度的0.83倍；CA活性随着盐度增加而降低，45盐度长时间处理酶活性降低更为明显，而3种亚型ca基因表达量则随盐度升高而增加。2倍空气CO2浓度培养藻密度可达正常空气CO2浓度的1.23倍，但其CA活性较低，第8 天为正常空气CO2浓度的0.41倍，α-ca和γ-ca基因表达量比正常空气CO2浓度略有升高。在0~10 mmol/L HCO3-范围内蛋白核小球藻随HCO3-升高生长加快，CA活性在5 mmol/L HCO3-最高，而3种亚型ca基因表达量在1 mmol/L HCO3-处理组最高。可见，蛋白核小球藻生长比较适合中低盐度、2倍空气CO2浓度和高HCO3-浓度，其CA酶活性可被低盐、空气CO2浓度和5 mmol/L HCO3-所诱导，而ca基因表达在高盐、2倍空气CO2浓度和低HCO3-浓度条件下较高。  

水体中生石灰和漂白粉对小球藻生长抑制的研究

研究了水体中生石灰和漂白粉对淡水小球藻的生长的影响.淡水小球藻在含有不同浓度的生石灰或漂白粉的培养液中培养,培养24 h 后开始使用分光光度计检测培养液在650 nm的吸光度值,每隔24 h检测1次,连续检测3次.研究结果表明,培养液中生石灰和漂白粉的存在均对小球藻的生长起到抑制作用,并且2者的浓度越高,抑制作用越明显.在24 h、48 h和72 h,生石灰抑制小球藻生长的半效应浓度(EC50)分别是28.57、10.77和9.79 mg/L,漂白粉抑制小球藻生长的半效应浓度(EC50)分别是2.17、1.10和0.91mg/L.  

营养方式对小球藻生长性能及营养价值的影响

分别对小球藻Chlorellasp.2003ZGH023进行光合自养、混合营养高碳、混合营养低碳和异养低碳培养,探讨不同营养方式对小球藻生长及细胞营养组成的影响。结果表明,在基础培养基中添加有机碳源,可显著提高小球藻的细胞密度和生物量,其中异养低碳组细胞密度可达54.73×106cell/ml,生物量6.86 g(dw)/L,且混合营养和异养小球藻细胞体积变大。在细胞营养组成上,与自养小球藻细胞相比,异养培养的小球藻细胞内蛋白含量显著下降而脂肪含量显著增加。光合自养组、混合营养高碳组、混合营养低碳组和异养组小球藻细胞粗蛋白含量分别是41.88%±0.14%、24.60%±0.07%、21.93%±0.13%和12.91%±0.35%。不同营养方式下小球藻的氨基酸总量变化与其粗蛋白含量的变化趋势相一致,光合自养组>混合营养高碳组>混合营养低碳组>异养组。小球藻总脂肪含量最高的为混合营养高碳组(15.32%±1.58%)和异养低碳组(14.15%±0.93%),显著高于混合营养低碳组(12.35%±0.25%)和光合自养组(10.04%±0.39%)。小球藻的脂肪酸组成会随着营养方式的改变而改变,光合自养组小球藻...  

小球藻锌结合类金属硫蛋白的结构表征及抗菌活性

小球藻经60μmol/L的锌胁迫培养5d后,离心收集藻泥,经超声波细胞破碎后,离心得到上清液即蛋白质粗提液,再经葡聚糖凝胶层析柱G-75及脱盐柱G-25分离、纯化后,收集的蛋白组分经真空冷冻干燥后获得小球藻锌结合蛋白。通过Tricine-SDS-PAGE电泳、氨基酸组成及紫外光谱等方法进行表征,测得该蛋白的分子量约为8.2ku,半胱氨酸含量为15.4%,具有金属硫蛋白典型的紫外光谱特征,称为类金属硫蛋白(Zn-MT-like proteins)。试验采用琼脂糖孔穴扩散法,研究了小球藻Zn-MT-like蛋白对3种细菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽胞杆菌)和3种真菌(青霉菌、曲霉菌、酵母菌)的抗菌活性,并与兔肝Zn-MTs的抗菌能力进行比较。结果表明,小球藻Zn-MT-like蛋白对革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌)和霉菌(青霉、曲霉)具有显著的抗菌活性,1mg/mL的Zn-MT-like蛋白对金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、青霉和曲霉的抑菌圈直径分别为13.2、17.4、7.2和9.8mm;而对大肠杆菌、酵母菌则无抗菌活性。同样条件下,未加锌胁迫的小球藻蛋白质本身和兔肝Zn-MTs并不具有这些抗菌...  

小球藻核rDNA ITS与叶绿体rbcL基因序列分析及应用

用核基因组rDNA的内转录间隔区(ITS)和叶绿体rbcL基因对小球藻属((Jhlorella)6株小球藻的种间和种内关系进行了分析.克隆序列与GenBank数据库检索到的相关小球藻序列(ITS和rbcL序列各为15条)一起进行比较分析.结果显示:ITS序列长度在小球藻种内高度保守,在种间变异较大;而rbcL序列长度在种间和种内水平都高度保守.15株小球藻ITS序列间遗传距离在0.000～0.663.之间;而15株小球藻rbcL序列间距离在0.000～0.216之间.6株实验藻中原始小球藻F-2与蛋白核小球藻F-5、F-9近似种内关系;蛋白核小球藻820与普通小球藻Cvq亲缘关系极近;椭圆小球藻Ce与其它5株小球藻亲缘关系最远.研究表明将变异程度较高的核ITS序列与相对保守的叶绿体rbcL基因相结合可以用于小球藻系统发生分析和分子鉴定.  

铜绿微囊藻和小球藻室内竞争实验研究

对铜绿微囊藻和小球藻进行藻类竞争实验,并通过模拟计算,分别得到铜绿微囊藻和小球藻纯培养和竞争条件下的生长模式,并计算了2种藻之间的相互竞争抑制强度。纯培养时铜绿微囊藻和小球藻的增长速率r分别为0.451/d和0.419/d,最大环境容量K分别为1414×104个/mL和812×104个/mL;混合培养时铜绿微囊藻对小球藻的种间竞争强度为1.44,小球藻对铜绿微囊藻的种间竞争强度为0.9。  

共培养系统中4种微藻生态因子的研究

通过二次回归通用旋转组合设计安排实验，研究光强、温度和盐度对分离自对虾池塘水环境中的啮蚀隐藻、新月菱形藻、微绿球藻和蛋白核小球藻的增长率的影响。获得各微藻的最适生态因子及其影响度。啮蚀隐藻的最适生态因子为：光强5750～7944lX，温度21．3～28．3℃，盐度13．3～23．0；影响度依次为：盐度〉温度〉光强。新月菱形藻的最适生态因子为：光强5761～86971X，温度23．4～29．6℃，盐度11．9～25．7；影响度依次为：盐度〉光强〉温度。蛋白核小球藻的最适生态因子为：光强6754～8775iX，温度17．1～20．7℃，盐度19．6～26．4；影响度依次为：温度〉盐度〉光强。微绿球藻的最适生态因子为：光强7128～9012lX，温度18．7～26．7℃，盐度17．9～24．3；影响度为光强〉温度〉盐度。啮蚀隐藻和新月菱形藻的增长率受到以盐度为基础、以光强和温度为协同因子的显著影响。  

不同饵料结构对海蜇生长和存活率的影响

为探究不同饵料结构对海蜇生长和存活率的影响,通过在一定时间内改变海蜇的饵料结构,观察海蜇的生长和存活情况,并与单纯摄食丰年虫的海蜇进行对比.试验结果显示:以丰年虫和小球藻为饵料共同饲喂,小伞径海蜇和大伞径海蜇的存活率分别为74.0％和88.0％;单纯以丰年虫为饵料,小伞径海蜇和大伞径海蜇的存活率分别为52.8％和59.7％;以自然海区海水中的浮游生物饲喂,小伞径海蜇的存活率为14％.结果表明:以丰年虫和小球藻共同饲喂的海蜇,其存活率明显高于单纯饲喂丰年虫,而且摄食小球藻的海蜇色泽比较深,活力较强.  

用小球藻进行缢蛏人工繁育技术试验

利用轮虫培养设施.以小球藻作为缢蛏浮游幼虫的开口饵料.采取贝类育苗的一般工艺进行缢蛏的室内人工育苗.试验结果表明.缢蛏一般于晚上产卵.一直持续至凌晨;2.5 kg亲蛏共获受精卵3.0×107个.缢蛏受精卵在平均水温约15℃时.经25 h发育成2.5×107个D形幼虫,孵化率为83.3%.投喂小球藻后经12 d培育幼虫能够正常变态附着.共获1.0×10,个眼点幼虫.幼虫成活率40%,刚附着稚蛏于室内经40 d的培育获得平均壳长为3 mm稚蛏3.0×106粒,平均成活率30%.  

两种微藻在无菌和带菌状态下生长特点比较研究

对无菌和带菌的波吉卵囊藻(Oocystis borge)和小球藻(Chlorella sp.)生长特点进行比较研究,并且研究光照和盐度对无菌和带菌的波吉卵囊藻和小球藻生长的影响.结果表明:与带菌藻相比,无菌藻更加稳定,不易老化. 光照和盐度对无菌和带菌的波吉卵囊藻和小球藻的生长均有显著影响(P<0.05),但在相同条件下,无菌和带菌藻的增殖率差异不显著(P>0.05).这说明可以直接利用无菌化微藻代替自然带菌藻进行微藻的生理特征以及微藻与其它生物之间关系的研究.