近江牡蛎和长牡蛎的配子兼容性及合子育性

为了评估长牡蛎(GG)和近江牡蛎(AA)的配子兼容性和合子育性，本实验探究了盐度(16、20、24、28和32)、温度(18、21、24、27和30 ℃)和精子浓度(10⁰、10¹、10²、10³和10⁴个/μL)对受精率、胚胎畸形率和孵化率的影响。结果显示，随盐度的增加，GG组的受精率和孵化率逐渐上升，而AA组和AG组的受精率和孵化率先上升后下降；GA组和AG组分别在盐度28和24时具有较优的配子兼容性和合子育性，受精率、畸形率、孵化率分别为7.45%±5.05%、2.00%±0.90%、63.60%±9.88%和14.26%±9.26%、1.74%±0.93%、66.16%±9.43%。随温度上升，AA、GA和GG组的受精率和孵化率先升高后下降，而畸形率先下降后上升；GA组和AG组均在27 ℃时表现出较优的配子兼容性和合子育性，此时GA组和AG组的受精率、畸形率、孵化率分别为7.95%±4.04%、1.79%±1.04%、57.11%±9.95%和14.70%±7.27%、1.66%±0.85%、67.25%±15.19%。随精子浓度的增加，GG组的受精率逐渐上升，孵化率逐渐下降，GA组和AG组的受精率逐渐上升；GA组和AG组均在10⁴个/μL时表现出较优的配子兼容性和合子育性，此时二者的受精率、畸形率、孵化率分别为9.09%±7.53%、1.59%±0.48%、67.97%±19.96%和14.30%±6.04%、1.06%±0.68%、67.33%±12.65%。研究表明，温度、盐度和精子浓度对长牡蛎和近江牡蛎种间配子兼容性影响较小，但对合子育性影响较大。     

金乌贼雄性规格和社群数量对求偶与交配行为的影响

为探讨不同规格雄性金乌贼(Sepia esculenta)在求偶交配过程中的竞争及优势等级,采用实验生态学方法,在室内可控条件下分别设置1L1S组、1L2S组和1L4S组(L和S分别表示大规格雄性和小规格雄性,数字表示实验中雄性金乌贼数量),连续摄像观察和记录金乌贼的繁殖行为。结果显示:(1)繁殖过程中金乌贼具有明显的领域行为和护卫伴游行为。(2)随着群体中小规格雄性比例的增加,处于优势地位的大规格雄性个体的优势等级发生变化,主要表现为大规格雄性护卫伴游时间、成功交配次数逐渐减少,而小规格雄性护卫伴游时间、成功交配次数逐渐增多。(3)当群体中小规格雄性较少时,大规格雄性常常主动攻击小规格雄性,而当小规格雄性数量远大于大规格雄性时,小规格雄性主动向其他雄性发起攻击,以争取护卫权和交配权。研究表明,雄性金乌贼的规格和数量对于求偶竞争以及交配行为具有显著影响。随着繁殖群体中小规格雄性增多,大规格雄性成功交配次数逐渐降低。1L4S组成功交配次数稍高于1L2S组,显著高于1L1S组(P0.05)。人工苗种繁育过程中选择合适规格的雄性亲体和合理的雌雄比例,对提高金乌贼繁殖效率具有重要意义。     

凡纳滨对虾养殖体系中群体感应淬灭菌的筛选、安全性评估及发酵条件优化

从凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamai)养殖体系中筛选得到具有群体感应淬灭(Quorum quenching, QQ)活性的潜在功能菌，并对菌株进行16S rDNA鉴定、安全性评估及发酵条件优化。采用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens) A136液体X-gal法进行活性菌株筛选，发现2株细菌(BDZ5和W1B)的发酵液对信号分子己酰基高丝氨酸内酯(C6-HSL)具有显著的降解作用，但经沸水浴处理后均丧失降解活性。经16S rDNA基因序列分析，菌株BDZ5和W1B分别被鉴定为芽孢杆菌属(Bacillus)和科贝特氏菌属(Cobetia)。安全性评估结果显示，菌株BDZ5和W1B均无溶血性，且对多数抗生素具有敏感性，注射2株活性菌未提高凡纳滨对虾死亡率，且对凡纳滨对虾血清免疫酶活性无显著影响。单因素条件优化结果显示，在起始pH为7.0、盐度为20、0.0005%的MnCl2条件下培养48 h后，菌株BDZ5达到最大生长量；在起始pH为6.0、盐度为40、0.05%的CaCl2条件下培养48 h，菌株W1B达到最大生长量。2株菌的最适信号分子C6-HSL降解条件与其生长条件有所不同，在起始pH为7.5、盐度为30、0.0005%的MnCl2条件下培养48 h，2株活性菌对信号分子C6-HSL的降解率达到最大值。研究表明，菌株BDZ5和W1B可作为益生菌应用于水产养殖，为基于QQ角度防治对虾细菌性病害提供优良菌种。     

对虾养殖池副溶血弧菌的分离鉴定及其耐药特征、毒力基因分析

为了解对虾养殖池中副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)的耐药性和毒力基因的携带情况，2018年从山东4个地区的对虾养殖池收集分离副溶血弧菌，采用Kirby-Bauer纸片法检测其对12种抗生素的耐药性，用PCR方法检测其携带耐热直接溶血素基因(tdh)和耐热相关溶血素基因(trh)的情况。从对虾养殖池共分离副溶血弧菌50株。药敏实验结果显示，副溶血弧菌对庆大霉素、硫酸新霉素和氨苄西林的耐药情况最为严重，耐药率分别高达98%、90%和86%，对氟苯尼考、氯霉素、头孢他啶等敏感性较高，耐药率分别为10%、10%和20%。88%的菌株具有多重耐药性。毒力基因检测结果显示，所有菌株均不携带tdh基因，4%的菌株表现为trh阳性。本研究表明，对虾养殖水环境中的副溶血弧菌对抗生素的耐药性较为严重，应加强副溶血弧菌的病原学监测，在养殖过程中合理使用抗生素，以实现水产养殖业健康发展。     

花鲈cox6a基因与相关miRNA的鉴定及其在盐度适应中的表达调控分析

细胞色素c氧化酶（COX）是线粒体电子传递链的末端酶，COX6A是细胞色素c氧化酶的核编码亚基之一。为丰富花鲈（基因及相关miRNAs在花鲈渗透调节机制中的潜在作用，本研究开展了花鲈cox6a基因的miRNAs，并对其与）。系统进化树分析进一步确认了两个花鲈在垂体、脑、肝脏和肾脏中的表达量较高，基因的miRNA：miR-30e-5p、miR-223、miR-200a-3p和miR-155-5p，但没有发现可能靶定基因以及miR-30e-5p、miR-223、miR-200a-3p都呈现显著差异表达，而miR-155-5p仅在适应高盐环境时出现了显著的差异表达。这表明，基因和4个miRNAs在花鲈的渗透调节过程中发挥潜在作用。其中miR-30e-5p、miR-223和miR-200a-3p的表达趋势与cox6a2基因的表达调控。本研究为探讨花鲈适应不同盐度环境的渗透调节机制提供了基础数据。     

饲粮中添加迷迭香提取物对吉富罗非鱼生长性能、血清脂质代谢和肝脏抗氧化功能的影响

通过60 d的吉富罗非鱼(genetic improvement of farmed tilapia, GIFT, Oreochromis niloticus)生长试验,探讨迷迭香提取物(Rosmarinus officinalis L.)对其生长性能、血清脂质代谢和肝脏抗氧化功能的影响。选择540尾健康、体重平均(6.42±0.06)g的吉富罗非鱼随机分成6个处理组,分别投喂含不同浓度的迷迭香提取物饲粮(0、0.01%、0.05%、0.10%、0.15%和0.20%)。试验结果表明:(1)与对照组(添加浓度为0)相比,饲粮中添加迷迭香提取物促进吉富罗非鱼的生长,包括体重和特定生长率的提高,肝体比、饲料系数和脏体比的降低,当饲粮中的迷迭香提取物添加水平达到0.05%时呈现显著差异(P<0.05)。(2)迷迭香提取物添加到吉富罗非鱼饲粮中可改善其脂质代谢水平,主要表现在血清中低密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇、谷草转氨酶、三酰甘油、谷丙转氨酶水平的下调。(3)迷迭香提取物添加到吉富罗非鱼饲粮中可提高其抗氧化能力,主要表现在肝脏中过氧化氢酶、谷胱甘肽硫转移酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化...     

大口黑鲈对饲料中乙氧基喹啉的耐受性评价

本试验旨在通过生长性能、抗氧化应答和肝脏组织学变化研究大口黑鲈对乙氧基喹啉的耐受性。在基础饲料中依次添加0(FFO组)、150(FFO-150组)、300(FFO-300组)和1 500 mg/kg(FFO-1500组)的乙氧基喹啉,其中300和1 500 mg/kg分别是欧盟最高推荐剂量(150 mg/kg)的2和10倍。另设1个负对照组(OFO组),即以氧化鱼油替换基础饲料中的新鲜鱼油。以初始体重为(4.01±0.01)g的大口黑鲈为靶动物,进行为期10周的生长试验,每组6个重复,每个重复30尾鱼。结果表明:OFO组的生长性能最差,其余各组增重率、特定生长率、饲料系数、摄食率均差异不显著(P0.05)。此外,FFO-300和FFO-1500组的存活率显著高于OFO和FFO组(P0.05)。FFO-150组的肥满度显著高于OFO组(P0.05);FFO-1500组的脏体比、肝体比与FFO组差异不显著(P0.05),但显著高于其他各组(P0.05)。FFO-300、FFO-1500组的肝脏谷胱甘肽硫转移酶活性显著高于其他组(P0.05)。饲料中添加300和1 500 mg/kg乙氧基喹啉可以显著提高大口黑鲈肌肉中超氧化物歧化酶活性和总抗氧化能力(P0.05)。乙氧基喹啉的添加对大口黑鲈鳃中抗氧化酶活性的影响无规律性变化。大口黑鲈心脏中过氧化氢酶活性、总抗氧化能力由于乙氧基喹啉的添加而显著降低(P0.05)。肝脏、鳃、心脏中丙二醛含量随乙氧基喹啉添加量增加呈下降趋势。各组大口黑鲈的肝脏有不同程度的损伤,但FFO-150、FFO-1500组的损伤相对比较少。由此得出,饲料中添加150 mg/kg乙氧基喹啉具有一定的抗氧化保护作用且对大口黑鲈是安全的,安全系数为10倍。但从存活率和抗氧化保护功能来看,建议大口黑鲈饲料中乙氧基喹啉的最高推荐量为300 mg/kg。     

不同蛋白质、脂肪水平对三疣梭子蟹生长和卵巢色素沉积的影响

以鱼粉和豆粕为蛋白源,鱼油和大豆油为脂肪源,配制蛋白质水平分别为35％、40％、45％和脂肪水平分别为7％、9％、11％的二因子三水平的实验饲料,并以鲜杂鱼饲料为对照,对三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)(体质量36.5～42.9 g)进行为期20周的养殖实验,研究三疣梭子蟹对蛋白质、脂肪的需要量,以及对卵巢色素沉积的影响.养殖实验采用海区串笼吊养方式,每个吊笼放养1只雌蟹.实验共10个处理,每个处理18个蟹,3个重复.结果表明,不同蛋白质、脂肪水平饲料对三疣梭子蟹增重率(269.2％～404.90％)、饲料系数(2.01～2.55)、蛋白质效率(1.02％～1.29％)和肥满度(16.26％～23.97％)均有显著影响（P＜0.05）；增加饲料蛋白质和脂肪水平,可显著提高三疣梭子蟹生长,降低饲料系数（P＜0.05）.对照饲料组的三疣梭子蟹获得了最高的增重率(461.69％),但饲料系数也是最高(6.35),而且肥满度(21.15％)低于P40Lll组（蛋白质40％、脂肪11％组）.三疣梭子蟹水分、肌肉蛋白、脂肪、灰份和卵巢灰份不受饲料蛋白质、脂肪水平变化的影响(P＞0.05),但卵巢蛋白质、脂肪影响显著(P＜0.05),而且高蛋白饲料组的卵巢脂肪含量总是显著低于其他各组.在同一饲料蛋白质水平下,9％脂肪饲料组的三疣梭子蟹卵巢类胡萝卜素总量、虾青素含量和成色比色值都显著高于其他各饲料组（P＜0.05）.与对照饲料组比较,实验饲料组的三疣梭子蟹卵巢类胡萝卜素总量和虾青素含量呈显著优势.综合考虑生长、饲料系数和色素沉积,三疣梭子蟹饲料的适宜蛋白质水平和脂肪水平分别为40％～45％和9％.本研究旨在为制定三疣梭子蟹饲料配方和改善其品质提供理论依据.     

草鱼不同混养模式下围隔底泥反硝化、硝化和氨化速率

应用乙炔抑制法测定了草鱼(Ctenopharyngodon idellus)不同混养模式围隔底泥的硝化、反硝化和氨化速率,以探究草鱼不同混养模式对池塘底泥－水界面N元素动态变化的影响,并为草鱼养殖模式的优化提供必要的参考依据.混养组合分别为一元组（草鱼）、二元组（草鱼+鲢、草鱼+凡纳滨对虾）、三元组（草鱼+鲢+凡纳滨对虾,设2种放养比例）.结果显示:1）草鱼不同混养模式中底泥的反硝化速率范围为0～734.15 μmol/(m2·d),硝化速范围为0～1 209.20 mmol/(m2·d),化速率范围为0～41.25 mmol/(m2·d).2)草鱼不同混养模式底泥的反硝化速率较高,与很多河口和湖泊数值接近；在养殖中期,底泥的硝化速率很小甚至检测不到；底泥的氨化速率呈逐月递增趋势,以三元混养组最高.3）混养组中凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的放养密度越大,草鱼的放养密度越小,反硝化作用出现得越早,但反硝化速率很难保持开始的水平；反之,反硝化作用出现得较晚,并会随着养殖周期的推移迅速升高；放养种类越单一,底泥的硝化速率越低,且鲢(Hypophthalmichthys molitrix)放养密度越高,硝化速率越高.从养殖模式优化的角度来看,草鱼三元混养组要优于单养和二元混养组,但三元混养组中两种放养密度各有优劣,有待进一步优化以确定最佳放养比例.     

从许氏平鲉体表分离海分枝杆菌的鉴定及其脂多糖的抗原性分析

从许氏平鲉粘液、背鳍、鳃等部位分离筛选到同一菌株FZ09,经形态学观察、生理生化特性及热激蛋白65(HSP65)基因序列分析,鉴定菌株FZ09为海分枝杆菌。分别用酚-氯仿-甲醇法、乙醇-酚水法和传统热酚水法提取菌株FZ09的脂多糖(LPS),分析了LPS的组成和抗原性差异。SDS-PAGE结果表明,3种方法提取的LPS条带分布基本相同,主要条带分子量分别为14、16和23 ku,其中以乙醇-酚水法提取的LPS含量和纯度最高,热酚水法提取的LPS条带最多,抗原性最好。Western-blotting显示,海分枝杆菌抗血清主要与LPS的14 ku条带发生特异性免疫反应。高碘酸氧化免疫印迹结果表明,仅传统热酚水法提取的LPS在14 ku分子量区域有弱的阳性条带出现,其他方法提取LPS与抗血清的免疫反应呈阴性。高碘酸氧化ELISA反应显示,LPS经高碘酸氧化后与海分枝杆菌FZ09抗血清的反应活性降低,OD₄₀₅明显减弱。