金银花等复方草药对牙鲆生长、消化和免疫能力的影响

将大(394.5～401.8g)、中(283.8～324.3g)、小(94.5～112.3g)3种规格的牙鲆(Paralichthysolivaceus)放养在8个10.0m×10.0m×0.8m水泥池中,投喂含金银花、人参和山楂等中草药的饲料。经28d、56d和83d的饲养表明,摄食含中草药饲料的大、中、小规格鱼的瞬时增重率分别比对照组提高22.4%、18.9%和2.9%(P<0.05);饲料系数分别下降20.77%、4.26%～39.42%和12.14%,饲料转化效率提高3.0%～36.4%、23.53%和11.1%(P<0.05);胃和肠蛋白酶活性分别显著地提高11.66%、13.49%、9.13%和11.3%、16.64%、8.55%(P<0.05);胃和肠淀粉酶活性分别提高2.63%、3.77%、2.31%和6.5%、14.47%、5.54%,但差异不显著(P>0.05);血清溶菌酶和总蛋白含量分别提高12.43%、15.38%～17.31%、14.43%～17.56%和7.07%、5.28%～11.54%和7.82%～8.75%,但各组间差异不显著(P>0.05);血清SOD活力显著提高9.53%、9.09%和15.14%(P<0.05)。  

哲罗鱼基因组微卫星富集文库的构建与分析

采用磁珠富集法构建哲罗鱼（Hucho taimen Pallas）荩因组微卫星文库。哲罗鱼基因组DNA经MboⅠ限制性内切酶消化后，选取400-900bp的片段，用生物素标记的简单重复序列（ACA）15作探针与其杂交，杂交复合物结合到包被有链霉亲和素的磁珠上，获得目的片段，连接T载体克隆，构建基因组微卫旱富集文库。再用同位素标记的（ACA）15探针进行二次筛选，筛选出686个阳性克隆，阳性克隆率为35．94％。对其中140个阳性克隆进行测序，共获得149个微卫星序列，4个小卫星序列，其GenBank Accession Number为DQ110955～DQ121108。其中perfect（完美型）62个，占41．61％；imperfect（非完美型）92个，占61．74％；compound（混合型）5个，占3．36％，重复次数主要分布于6～45（81．21％），平均重复次数为32．5，这表明（ACA／TGT）。在哲罗鱼基因组DNA中含最非常丰富。本研究旨为从DNA水平上研究哲岁鱼种群结构、遗传多样性及目前群体现状等方面提供有效工具。  

刺参增养殖业现状、存在问题与展望

海参是棘皮动物门海参纲动物的统称，海参纲约有900多个种类，全部生活在海洋中，世界上可以食用的海参有40种左右。我国有海参140种，约20种海参可以食用，其中以北方沿海产的刺参（仿刺参）[Apostichopus japonieus（Selenka）]品质最好。刺参具有很高的营养与药用价值，几百年前我国人民就把刺参做为一种珍贵的海昧，列为海产“八珍”之一。明朝《五杂俎》就有关于海参的记载。  

大口黑鲈形态性状对体重的影响效果分析

对大口黑鲈全长、体长、体高、体宽、眼间距、头长、吻长、尾柄长、尾柄高和体重共 10个性状进行测定，运用相关分析、通径分析和多元回归分析，剔除与体长存在显著共线性的全长、体高、头长，尾柄高及回归方程中不显著的吻长和尾柄长，计算以体宽、体长、眼间距 3个形态性状为自变量，体重为依变量的相关系数、通径系数、决定系数及相关指数，定量分析大口黑鲈形态性状对体重的影响效果。结果显示，3个形态性状与体重的相关系数（0.942，0.979，0.928）均达到极显著水平（P＜0.01）；通径分析中，3个形态性状对体重的通径系数亦达到极显著水平（P＜0.01）,它们是直接影响体重的重要指标,其中体宽（P⁴=0.599）对体重的直接影响最大。所选形态性状与体重的相关指数R²＝0.980 ,说明所选性状是影响体重的主要形态性状。应用逐步多元回归分析建立了以体重为依变量(Y),体宽(X⁴)、体长(X²)和眼间距(X⁵)为自变量的回归方程：LgY=1.065 + 0.765 LgX²＋1.441 LgX⁴+0.543 LgX⁵。以上形态性状对体重影响效果相关数据的获得为大口黑鲈选育测量指标的确定提供了理论依据。  

虾夷扇贝微卫星标记的分离及其养殖群体的遗传结构分析

采用新型生物素-磁珠吸附微卫星与同位素杂交相结合的方法筛选出15对微卫星引物,并对大连地区3个虾夷扇贝(Patinopecten yessoensis)养殖群体(黑石礁海区、小长山岛海区、广鹿岛海区)的遗传结构进行分析.获得175个阳性克隆并测序,得到160个含微卫星的序列,其中完美型,非完美型和混合型分别占42.69%(73)、46.20%(79)和11.11%(19),经筛选得到15个微卫星标记.虾夷扇贝3个群体的有效等位基因数在1.000 0～8.857 3之间;期望杂合度在0.0211～0.9111之间;观测杂合度在0.000 0～0.877 8之间.表明这几个群体遗传多样件水平较高.群体间遗传相似系数在0.929 1～0.962 4,相似性较高.聚类分析显示,黑石礁群体与小长山岛群体遗传距离最小,亲缘关系最近.基于Hardy-Weinberg平衡的卡方检验表明3个群体均在一定程度上偏离了平衡.本研究所获得的微卫星位点可以为虾夷扇贝的群体遗传多样性分析和遗传图谱的构建等研究提供参考,群体的遗传结构分析对虾夷扇贝的养殖和遗传育种具有一定的指导意义.[中国水产科学,2009,16(1):39-46]  

磁珠富集法筛选虾夷扇贝微卫星序列

采用生物素-磁珠吸附微卫星富集法，筛选虾夷扇贝（Patinopecten yessoensis）微卫星分子标记，并用同位素法进行二次筛选。结果在筛选的192个菌落中获得136个阳性克隆，经测序分析，获得微卫星序列179个，其中完美型占50.8％，非完美型43.0％，混合型占6.1％。除探针中使用的CA重复外，还得到TC、AG、ACA、CTAT的重复序列。用引物设计软件Primer Premier5.0设计引物85对，挑选其中的40对合成并进行筛选。  

大黄鱼微卫星标记的富集与筛选

根据生物素与链霉亲和素的亲和原理，采用生物素-磁珠富集微卫星，与传统放射性同位素杂交法相结合，构建筛选大黄鱼的微卫星文库。用生物素-微卫星捕捉单链限制性酶切片段（含有接头和大黄鱼微卫星序列），经PCR扩增单链目的片段形成双链，然后连接至T载体上，转化感受态细胞。将移至硝酸纤维素膜的重组菌用^32P标记的放射性同位素探针50[γ-^32P]ATP（CA）15筛选出阳性克隆菌。测序结果发现，阳性克隆率为71.9％，105个微卫星位点。其中选取设计合成30对并筛选出22对可用引物。说明所建大黄鱼微卫星文库是一个高质量的文库，可为大黄鱼基因组结构分析、大黄鱼精密微卫星连锁图谱构建、分子进化和系统发育研究、分子标记辅助育种以及经济性状的QTL定位提供大量的微卫星标记。  

多糖和益生菌对暗纹东方纯免疫功能的调节

2003年春以来，山东、辽宁等地区养殖的仿刺参出现急性口围肿胀症，其症状是口围肿胀，体表溃烂，排脏，管足附着力下降，脱落沉至池底，死亡率较高。从病参口围、体表及体壁分离出优势菌10株，经人工感染试验证实其中菌株KW21、KW22、KW23、NB13和NB14是引起仿刺参出现急性口围肿胀症的病原菌。通过16S rRNA基因序列同源性及系统发育分析表明，菌株KW21为Mahnomonas dokdonens／s；菌株KW22和菌株NB13具有相近的亲缘关系，两者均与Vibrio splendidus有较高的相似性（99％，98％）；菌株KW23为Vibrio tapetis；菌株NB14为Vibrio sp．。5株病原菌均为革兰氏阴性菌，电镜下观察菌株KW21棒杆状；菌株KW22、KW23、NB13和NB14分别为杆状、弧状、卵圆形和卵圆形，且都具有单极生鞭毛。药物敏感性试验结果表明，诺氟沙星、氧氟沙星和红霉素对5株菌均有较强的抑菌作用。Vibrio tapetis，Vibrio splendidus和Marinomonas dokdonensi作为仿刺参的病原菌属首次报道。  

微生态制剂对幼刺参生长及消化酶活性的影响

以马尾藻、鼠尾藻、海泥、贻贝粉等原料配制成基础饲料为对照组饵料,在基础饲料的基础上分别添加光合细菌、芽孢杆菌和复合菌(主要成分为光合细菌和芽孢杆菌)制剂为试验组饵料。试验结果表明,试验组特定生长率均大于对照组,在试验的第1阶段:试验组与对照组特定生长率差异显著(P<0.05);在试验的第2阶段:试验组与对照组特定生长率差异都极显著(P<0.01),3组之间差异不显著(P>0.05)。两个阶段成活率试验中试验组都高于对照组,第2阶段成活率高于第1阶段成活率。在两次试验阶段,益生菌对刺参肠道消化酶活性的影响有一定的相似性,试验组刺参消化酶活性都高于对照组。试验表明益生菌可以提高幼刺参的消化酶活性和成活率,并有促生长作用。  

镜鲤两个繁殖群体的遗传结构和几种性状的基因型分析

利用扩增效果好、在群体中具有多态性的28个微卫星标记，检测国家换新良种场的镜鲤繁殖群体和黑龙江水产研究所松浦实验场的镜鲤繁殖群体的遗传组成，计算了两个群体的有效等位基因数，期望杂合度和多态信息含量等遗传参数，换新与松浦两个群体的有效等位基因数分别为2.874和3.102, 期望杂合度分别是0.565和0.603,多态信息含量分别是0.534和0.568；遗传结构分析研究结果表明这两个群体的多样性较高,信息含量丰富,具有进一步筛选出优良品种的遗传基础。但连锁不平衡分析表明这两个群体在较大的选择压力下，已严重偏离Hardy-Weniberg平衡，要保持群体的优良性状相关的遗传基础，应该在进一步的选种中注意增加群体的遗传多样性。也用28个基因座的不同基因型与换新208个亲本的体重值进行了连锁分析，得到12个与镜鲤体重相关的基因型，其中紧密相关的基因型3个；分析了一些严重偏离平衡的基因型，并分析了出现这种现象的可能原因，同时探讨了一些基因型与胚胎期致死或易感病基因连锁的可能性。为描述基因型偏离程度，创造了基因型偏离指数，并用其对群体中一些基因型出现的偏离现象进行了探讨。图1表2参19