Cu↑（2+）对黄鳝肝脏保护酶SOD、CAT、GSH-PX活性的影响

以肝脏组织保护酶SOD，CAT，GSH－PX活性为指标研究了CuSO4污染对黄鳝的损伤作用，实验测得CuSO4对黄鳝的LC50为5．5mg/L，据此设定CuSO4浓度梯度，结果表明，0．7，1．5mg/L的CuSO4处理液对黄鳝的损伤较小，3．0，4．5mg/L的CuSO4处理液对黄鳝损伤较大，保护酶SOD，CAT，GSH－PX的活性在黄鳝暴露24h时被显著抑制，在处理48h后酶活性逐渐恢复并超过对照组水平，之后又回落到低于对照组水平，其变化幅度与CuSO4质量浓度呈正相关，可以证实，SOD，CAT，GSH－PX活性变化可以反映黄鳝的伤害程度。  

三倍体湘云鲫性腺指数分析

对三倍体湘云鲫和作为对照的二倍体日本白鲫的性指数进行了比较分析。三倍体湘云鲫的卵巢指数、精巢指数、脂肪型“性体”指数都分别低于日本白鲫的卵巢指数、精巢指数及两者的平均值，日本白鲫的卵巢指数是湘云鲫卵巢指数的2.85倍，日本白鲫的精巢指数是湘云鲫精巢指数的1.94倍，日本白鲫卵巢和精巢的平均指数是湘云鲫脂肪型“性体”指数的5.60倍，具脂肪型“性体”的湘云鲫生长速度最快，其次是雌性湘云鲫，最后是雄性湘云鲫，根据性体指数对照，说明三倍体湘云鲫的性腺发育受到不同程度的抑制，其中脂肪型“性体”中生殖细胞的发育完全被抑制；卵巢发育的抑制程度大于精巢，其主要抑制效应表现在具有卵黄的卵母细胞的大幅度减少，无论从生殖角度还是生长角度来考虑，具有脂肪型“性体”的湘云鲫是最理想的不育三倍体鱼。  

黄鳝微卫星引物筛选及其在保护遗传学上的应用

研究了远缘种鲤的微卫星引物对黄鳝的适用性。结果显示，31对鲤微卫星引物中有11对引物能对黄鳝DNA模饭扩增出特异性带谱。每对引物扩增的等位基因数在3～13个，平均每个位点有5．6个等位基因，显示了较高的多态性。其中引物P1最理想，其PCR扩增产物能区分来自湖南、广东和孟加拉3个不同地域的黄鳝种群。应用微卫星技术对3个不同地域的黄鳝基因组DNA多态性分析结果显示，湖南、广东和孟加拉黄鳝群体内平均相似率依次为95．5％，95.8％和93．5％，平均变异度依次为0．045，0．042，0．063。群体间的相似率及变异度分析显示：湖南黄鳝和广东黄鳝群体间平均相似率为91．0％，变异度为0．045；湖南黄鳝和孟加拉黄鳝群体间平均相似率和变异度分别为55．7％和0．443；广东黄鳝和孟加拉黄鳝群体间平均相似率和变异度分别为58．6％和0．414。综合微卫星分析结果、黄鳝的外形特征及地理位置，可以推测，广东黄鳝与湖南黄鳝为同一个生物种的不同地理种群，而孟加拉黄鳝为同属中另一个种。  

三倍体湘云鲫及其亲本线粒体DNA的比较研究

用人工选育的异源四倍体鲫鲤（♂）与白鲫（♀）杂交获得具有明显生长优势的三倍体湘云鲫。采用差速离心和核酸酶处理等方法，从三倍体、白鲫和异源四倍体鲫鲤肝组织中提取线粒体DNA，并用9种限制性内切酶进行单酶酶切分析。经琼脂糖凝胶电泳后计算出各酶切片段的大小，测得三倍体、白鲫和异源四倍体鲫鲤mtDNA的分子大小分别为16．24kb、16．60kb和16．20kb。根据各单倍型间的酶切片段共享度，估算出3个群体间的遗传距离，说明了mtDNA母系遗传的特性。  

异源四倍体鲫鲤肝组织线粒体DNA的研究

用密度梯度离心和DNaseI、RNase消化法从异源四倍体鲫鲤(R8)和鲫鲤F2肝组织中提取和纯化线粒体DNA(mtDNA).用9种限制性内切酶对异源四倍体鲫鲤和鲫鲤F2的mtDNA进行了分析,结果表明XbaI和BglⅡ两种限制性内切酶在异源四倍体鲫鲤mtDNA上存在酶切位点多态性.通过凝胶电泳测得异源四倍体鲫鲤mtDNA相对分子量平均约10.29×106道尔顿,分子大小为16.20kb;鲫鲤F2mtDNA相对分子量为10.18×106道尔顿,分子大小为16.02kb.根据单酶解和双酶解的片段数目和分子大小,构建了异源四倍体鲫鲤mtDNA的7种限制性内切酶(KpnI、PstI、SalI、XhoI、BglⅡ、BamHI和XbaI)酶切图谱.  

中华鳖与砂鳖线粒体DNA 12S rRNA基因序列的比较分析和分子鉴定标记

对中华鳖和砂鳖线粒体DNA 12S rRNA基因进行了引物设计、PCR扩增、序列测定和PCR-RbLP分析。研究结果表明：中华鳖、砂鳖线粒体DNA 12S rRNA基因片段的碱基序列长度相同，均为562bp，其A、T、C、G含量相似，分别为209个(37．2％)、121个(21．5％)、145个(25．8％)、87个(15．5％)和207个(36．8％)、120个(21．4％)、145个(25．8％)、90个(16％)。两序列间共有13处碱基不同，序列差异率为2．3l％，中华鳖与砂鳖各自个体间的平均核苷酸序列差异率分别为0．53％和0．36％，种间差异显著；用内切酶MspⅠ酶切两种鳖的12S rRNA基因片段，在砂鳖中可得到大小为519bp和43bp两个片段，而中华鳖无此酶切位点，这可作为准确鉴别中华鳖和砂鳖的分子鉴定标记。从两种鳖线粒体DNA 12S rRNA基因片段碱基的显著差异和MspⅠ酶切位点的变化，可以进一步证明砂鳖是不同于中华鳖的鳖属一新种。  

异源四倍体鲫鲤及其原始亲本遗传变异的RAPD分析

在优化RAPD检测条件的基础上，从100个随机引物中筛选出60个扩增较好的引物对异源四倍体鲫鲤及其原始亲本红鲫和湘江野鲤相互间扩增DNA片段的异同性进行比较研究。结果显示，60个引物共产生1554条带，单一引物扩增的DNA片段数在6～20条之间，片段大小在200～3500bp之间。遗传相似率分析表明，异源四倍体鲫鲤与其原始母本红鲫的相似率为69．41％，与其原始父本野鲤的相似率为64．47％，说明异源四倍体鲫鲤接受原始母本红鲫的遗传物质要多一些；而红鲫和野鲤之间的相似率为42．18％，说明两者的基因组成有较大的相似性，从分子水平证实了红鲫和野鲤的远缘杂交具有较大的亲和性。在分析中，还发现异源四倍体鲫鲤有4条非亲本带，非亲本带谱率达0．72％，这些非亲本带可以作为异源四倍体鲫鲤特异性的分子标记。  

红鲫(♀)×湘江野鲤(♂)F2和F3的染色体研究

采用血细胞培养制片法和肾脏细胞直接制片法对红鲫(♀)×湘江野鲤(♂)杂交种F2和F3代的染色体数目和核型进行了比较分析，得出F2代染色体数目为100条，染色体组型为22m＋34sm＋22st＋22t，NF＝156；F3代染色体数目为4n＝200，染色体组型为44m＋68sm＋44st＋44t，NF＝312。为证明红鲫×湘江野鲤杂交后代由异源二倍体转变为异源四倍体发生于F2与F3代之间提供了直接证据。  

彭泽鲫雌核发育的细胞学研究

通过对彭泽鲫(♀)×彭泽鲫(♂)的受精细胞学观察,彭泽鲫卵子受精后,具有与两性生殖鱼类相同的精子入卵过程和排出极体,但精子入卵后精核始终不解凝,也不与雌性原核融合。对精母细胞成熟分裂中期染色体观察表明,彭泽鲫精母细胞在进行成熟分裂时未发生同源染色体配对,全部为单价体形式,其精子形成过程中第一次成熟分裂异常;对精子与体细胞DNA含量进行比较,体细胞DNA含量与精子DNA含量比为2.218:1,精子DNA含量发生了减半。以上实验结果说明彭泽鲫为雌核发育鱼类。同时,作者对卵核染色体倍性保持稳定的方式及精卵不同的形成机制进行了初步的分析。  

脆肉鲩肌肉游离氨基酸初步分析

采用气相色谱仪测定来自于同一养殖场的脆肉鲩和普通草鱼肌肉游离氨基酸含量，测得脆肉鲩肌肉游离氨基酸总量为762．96mg／hg，其中必需氨基酸为281、67mg／hg；普通草鱼肌肉游离氨基酸总量为406、29mg／hg,其中必需氨基酸含量为108、54mg／hg。通过和其它鱼的肌肉游离氨基酸比较，探讨了脆肉鲩肌肉结构和口感发生改变的原因。