疣吻沙蚕胚胎发育观察及盐度对其孵化的影响

采用显微镜观察了疣吻沙蚕(Tylorrhynchus heterochaeta)胚胎发育不同时期特征,并依据疣吻沙蚕人工孵化经验设置6个盐度梯度组(A:0,B:5,C:10,D:13,E:15,F:20),每组3个平行,研究了盐度对疣吻沙蚕受精率和孵化率的影响。结果表明,疣吻沙蚕胚胎发育可分为受精卵、卵裂期、囊胚期、原肠期、前担轮幼虫期、后担轮幼虫期、膜内三刚节疣足幼虫期和三刚节疣足幼虫期8个时期;盐度对疣吻沙蚕孵化影响显著(P0.05),C组受精率和孵化率最高,与其他组存在显著差异(P0.05)。适宜受精的盐度范围为10~13,最适孵化的盐度为10。     

翘嘴鳜微卫星标记及其与主要经济性状的相关分析

利用筛选出的7对具有较高多态性的微卫星标记,检测106尾翘嘴鳜Siniperca chuatsi选育个体的基因组DNA,分析这些微卫星标记与翘嘴鳜体长、体质量和体高的相关性。结果获得67个等位基因,各位点的等位基因数为3~19,片段大小在147~530bp之间;期望杂合度0.5092~0.9207,均值为0.7574;各位点的多态信息含量在0.4639~0.9101之间,均值为0.7197,表明所选择的SSR标记识别力较高,适用于翘嘴鳜选育群体遗传分析和标记辅助育种研究。相关性分析结果表明,G4位点中含有的片段为219bp等位基因的基因型(229/219或219/219)个体的体质量、体长和体高的表型效应显著高于其他的基因型,G10位点中246/246基因型的体质量和体高表型效应显著高于其他基因型,可作为未来翘嘴鳜分子标记辅助育种的重要参考位点。     

生长激素释放肽的研究进展

生长素释放肽（GHRPs）依据蛋氨酸-亮氨酸脑啡肽（met-enkephalin）的结构于20世纪70年代末首次合成以来，人们又陆续合成了数种类型的GHRPs，虽然其结构已远不同于met-enkephalin的结构，但均可强烈刺激生长素（GH）分泌。GHRPs在动物体内具有促进GH 释放、刺激动物食欲、促进动物生长、提高动物生产性能和免疫水平等多方面的功能。     

普通质粒载体与Semliki森林病毒复制子载体表达GHRH的比较

新一代Semliki森林病毒RNA复制子源自甲病毒属Semliki森林病毒的基因组，它克服了一些现有的DNA和RNA载体表达效率低的缺点。复制子保留了编码病毒复制酶的基因，结构基因被外源基因所取代。复制酶能够使RNA在胞质中高水平的复制以及外源基因高水平的表达。为了评价SFV复制子载体提高外源基因表达的效力，本研究首先对pIRES-neo表达载体用BamHⅠ酶切和去磷酸化，连接LacZ基因，构建了普通真核表达载体pIRES-neo-LacZ。然后采用脂质体介导分别将含报道基因LacZ复制子载体pCMV-rep-LacZ和两个普通表达载体pLNCX-LacZ、pIRES-neo-LacZ转染293细胞；将表达GHRH的复制子载体pCMV-Rep-GHRH和普通载体pIRES-GHRH、pCDNA3-GHRH转染293细胞。分别对不同载体转染细胞表达的β-半乳糖苷酶以及利用RIA 、RT-PCR对表达的GHRH进行了定量分析，结果表明：复制子载体表达外源基因的效率比非复制子载体高2～3倍。本研究为提高外源基因在真核细胞的表达提供了有益的探索。     

马氏珠母贝混养紫海胆对污损生物防除效果的研究

利用我国南方紫海胆(Anthocidaris crassispina)与大亚湾马氏珠母贝(Pinctada martensi)进行不同比例混养,探讨了紫海胆对马氏珠母贝贝体和养殖网笼污损生物的防除效果,以及紫海胆和马氏珠母贝的生长状况。试验设混养组(PA3、PA6、PA9)和对照组(P),即在养殖马氏珠母贝30只/层的基础上,分别混养紫海胆3、6、9、0个/层;另设紫海胆单养组(A3、A6、A9),养殖密度分别为3、6、9个/层。试验结果显示：各混养组及P组间马氏珠母贝的存活率无显著差异(P>0.05),混养组紫海胆的存活率均接近100%,组间无显著差异(P>0.05);PA6、PA9组马氏珠母贝的特定生长率大于P组(P<0.05),而PA3组与P组之间差异不显著(P>0.05);就马氏珠母贝的壳长日平均增长率而言,PA3、PA9组与P组间无显著差异(P>0.05),但PA6组显著大于P组和PA3组(P<0.05);PA6、PA9组马氏珠母贝的肥满度显著大于P组(P<0.05),PA3组与P组间无显著差异(P>0.05);混养与单养各组之...     

卵形鲳鲹配合饲料中酶解鱼浆蛋白和陆生复合蛋白替代鱼粉的研究

为了评估卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)配合饲料中酶解鱼浆蛋白和陆生复合蛋白替代鱼粉的可行性,本研究设计了4种等蛋(42%)等脂(12%)配合饲料(D1~D4),其中,D1(对照组)含30%鱼粉,D2~D4(处理组)都含14%陆生复合蛋白且还分别含有16%、11%、6%鱼粉和0、5%、10%酶解鱼浆蛋白;各处理组都补充蛋氨酸和赖氨酸。将360尾初始体重为(7.28±0.10) g的卵形鲳鲹幼鱼随机分配到12个海上网箱中,每个网箱30尾鱼,每种饲料设3个网箱。将鱼以上述4种饲料饲养62 d后,测定其生长性能、体组成、血清生化指标、肠道消化酶活性与组织抗氧化指标。结果显示,各实验组鱼的增重率(WGR)、特定生长率(SGR)、蛋白质效率(PER)、饲料系数(FC)、胃蛋白酶(PEP)、脂肪酶(LPS)和淀粉酶(AMS)活性均无显著差异(P>0.05)。D3和D4组全鱼粗蛋白含量显著高于D1和D2组,D4组鱼肌肉脂肪含量显著低于D1~D3组(P<0.05);D2~D4组鱼血清谷草转氨酶(AST)及D2和D3组鱼谷丙转氨酶(ALT)活性都显著低于D1组(P<0.05),D1和D4组血清总蛋白(TP)和球蛋白(GLO)水平显著高于D2和D3组(P<0.05);D2~D4组肝脏过氧化氢酶(CAT)活性、总抗氧化能力(T-AOC)和肌肉超氧化物歧化酶(SOD)活性显著高于D1组(P<0.05),且肝脏丙二醛(MDA)含量低于D1组(P<0.05)。研究表明,含6%鱼粉的D4组鱼的生长性能与30%鱼粉D1组无差异,且全鱼蛋白含量及肝脏和肌肉抗氧化能力显著提高,说明14%陆生复合蛋白配合10%酶解鱼浆蛋白可有效替代卵形鲳鲹饲料中80%鱼粉,使饲料鱼粉使用量低至6%。本研究是首次探讨酶解鱼浆蛋白在卵形鲳鲹配合饲料中应用的可行性,结果可为研发高效低成本配合饲料提供参考依据。     

离子对萝卜中具有溶菌酶活性的几丁质结合蛋白活性的影响

萝卜中有具有溶菌酶活性的几丁质结合蛋白(Chitin-binding proteins,CBPs),为了了解CBPs作用机制以及在萝卜中的生理功能,研究了各种离子对CBPs溶菌酶活性的影响.结果显示,一价阳离子对CBPs溶菌酶活性的影响随阴离子不同有差异,当阴离子为Cl-时,阳离子Na+、K+和NH4+对CBPs溶菌酶活性均有抑制作用,当阴离子为NO3-时,K+和NH4+低浓度时具有激活CBPs溶菌酶活性作用,K+和NH4+高浓度时具有抑制CBPs溶菌酶活性作用;二价阳离子对CBPs溶菌酶活性均具有抑制作用,Mn2+和Ca2+低浓度时具有激活CBP2溶菌酶活力作用.     

特异性识别草鱼呼肠孤病毒感染细胞的ssDNA核酸适配体筛选与鉴定

[目的]筛选出能高特异性和高亲和性识别草鱼呼肠孤病毒(GCRV)感染细胞的核酸适配体,为研发操作便捷、成本低、耗时短、准确度高的GCRV检测技术打下基础,同时为提高水产疫病检测及防控效率提供技术支持.[方法]以草鱼呼肠孤病毒I型(GCRVI)感染的宿主细胞为靶标,采用指数富集的配体系统进化技术(SELEX)进行特异性核酸适配体筛选,并通过激光共聚焦显微技术和流式细胞术对筛选获得的核酸适配体性质进行系统分析.[结果]筛选获得的核酸适配体GVIK1能特异性识别并结合在GCRVI感染的草鱼肾脏组织细胞系(CIK)表面,但不识别正常的CIK细胞及石斑鱼神经坏死病毒广西株(GNNV)感染的石斑鱼脾细胞(GS);其二级结构具有独特复杂的茎环结构,吉布斯自由能(△G)为-32.93 kJ/mol,无细胞毒性.核酸适配体GVIK1结合靶标细胞的亲和常数(Kd)为148.22 nmol/L,即核酸适配体GVIK1与靶标细胞间的亲和力极强,达纳摩尔级别.核酸适配体GVIK1在靶标细胞表面的结合位点是细胞膜蛋白或膜蛋白相关结构,其在靶标细胞表面的结合位点出现在病毒感染后的第5h.临床试验结果表明,筛选获得的核酸适配体GVIK1可作为高特异性分子探针用于诊断GCRV感染所致的草鱼出血病.[结论]基于SELEX技术筛选获得能特异性识别GCRVI感染宿主细胞的核酸适配体GVIK1,可作为核酸分子探针用于研发操作便捷、成本低、耗时短、准确度高的GCRV快速检测技术,实现实时监测和有效防控.     

投喂抗应激饲料对翘嘴鲌肠道结构的影响

该试验以翘嘴鲌(Culter ablurnus)为试验对象,将相同浓度的抗应激饲料添加到基础饲料中,研究抗应激饲料作为饲料添加剂喂养不同时长(0、7、14、21、28和35 d),分为6组(S0、S1、S2、S3、S4、S5)对翘嘴鲌肠道组织结构的影响。结果表明,肌层厚度方面,总体呈现随着时间的增加逐渐增厚。同对照组相比,S1、S2与S3无明显差异,S4、S5有统计学意义差异(P0.05)。褶皱高度方面,总体呈现随着时间的增加逐渐增厚。同对照组相比,S1、S2、S3差异不具统计学意义,S4、S5出现极具统计学意义差异(P0.05)。褶皱宽度方面,总体呈现随着时间的增加逐渐增大。同对照组相比,S1、S2、S3和S4差异均不具统计学意义,S5与对照组有具统计学意义差异(P0.05)。横截面积方面,总体呈现随着时间的增加逐渐变大。同对照组相比,每组差异均具统计学意义(P0.05),S1组和S3组增长最为明显。     

两种鲤血液生理生化及部分免疫指标的比较分析

为综合评价不同养殖模式下的鲤鱼品种的免疫能力,该试验比较分析了清远连山禾花鲤稻田养殖品种和肇庆麦溪鲤养殖品种的血液生理生化及免疫指标。结果显示:在两个鲤品种的血液生理指标中,禾花鲤血液中的红细胞计数、血红蛋白、平均红细胞血红蛋白含量、平均红细胞血红蛋白浓度、淋巴细胞百分比、嗜酸性粒细胞百分比显著低于麦溪鲤;在两个鲤品种的血液生化指标中,禾花鲤的血清总蛋白、血清白蛋白、球蛋白显著高于麦溪鲤(P0.05),禾花鲤的血清丙氨酸氨基转移酶、血清天门冬氨酸氨基转移酶、肌酐极显著高于麦溪鲤(P0.01)。在两个鲤品种的免疫指标中,麦溪鲤血液中的丙二醛(MDA)含量、溶菌酶(LZM)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)均显著强于禾花鲤(P0.05)。研究表明:禾花鲤的免疫能力、耐低氧能力和肝脏、肾脏的解毒能力均在一定程度上弱于麦溪鲤。可以认为禾花鲤的养殖难度大于麦溪鲤,应在养殖中更加注重养殖环境的调控。