我国云南、湖北和山东葡萄产区霜霉病菌对甲霜灵的抗性检测

为明确我国云南省宾川县、湖北省公安县和山东省烟台市葡萄产区霜霉病菌对甲霜灵的抗性发生态势,采用叶盘漂浮法测定了这3个产区共127株葡萄霜霉病菌对甲霜灵的抗性频率及抗性水平。结果显示,不同区域间病菌的抗性频率和抗性水平均存在差异。其中,湖北省公安县霜霉病菌的抗性频率和抗性水平均较高,抗性频率达92.0%,高抗菌株占76.0%,低抗菌株占16.0%,敏感菌株占8.0%;山东省烟台市霜霉病菌的抗性频率为74.0%,低抗菌株占64.0%,高抗菌株占10.0%,敏感菌株占26.0%;云南省宾川县霜霉病菌的抗性频率和抗性水平均较低,抗性频率为29.6%,敏感菌株占70.4%,低抗菌株占29.6%,无高抗菌株。     

不同寄主来源的葡萄霜霉病菌致病力测定及孢子囊大小比较

对采自我国不同地区、不同主栽葡萄品种‘红地球’、‘巨峰’及‘赤霞珠’上的12份葡萄霜霉病菌的致病力及孢子囊大小进行了比较和分析,结果表明:采自不同葡萄品种的病原菌对感病葡萄品种‘奥迪亚无核’叶片的致病力具有明显差异,其中‘巨峰’及‘红地球’来源的病原菌致病性较强,明显大于‘赤霞珠’来源的病原菌致病力;采自不同葡萄品种的霜霉病菌孢子囊大小存在一定的差异,‘赤霞珠’来源的病原菌孢子囊明显大于‘巨峰’及‘红地球’来源的霜霉病菌孢子囊。上述结果表明,采自不同寄主的葡萄霜霉病菌的致病力及孢子囊大小均存在一定程度的分化。     

我国葡萄灰霉病菌对四霉素和啶酰菌胺的敏感性测定

灰霉病是葡萄生产上的重要病害之一,严重影响葡萄果实的品质和产量。为明确葡萄灰霉病菌对四霉素和啶酰菌胺的敏感性,本研究分别采用菌丝生长速率法和孢子萌发法测定了四霉素和啶酰菌胺对采自云南省宾川县、湖北省武汉市和辽宁省北镇市60株葡萄灰霉病菌的有效抑制中浓度EC₅₀,建立了敏感性基线,并分析了二者之间的交互抗性。结果显示,葡萄灰霉病菌对四霉素和啶酰菌胺的敏感基线分别为0.245和1.115 μg/mL;上述葡萄灰霉病菌均对四霉素敏感,而11.7%的菌株表现为啶酰菌胺抗性。并且四霉素与啶酰菌胺之间不存在交互抗性(r=-0.040,P>0.05)。因此,四霉素可作为防治葡萄灰霉病的候选药剂,研究结果对两种杀菌剂的科学使用以及葡萄灰霉病的可持续防控具有重要的理论和实践意义。     

中国4省份葡萄霜霉病菌群体对烯酰吗啉的抗性及适合度

为明确我国山西、山东、河北和云南省葡萄霜霉病菌对烯酰吗啉的抗性以及田间病菌群体的适合度,本研究采用Taqman-MGB技术检测了2020年-2021年采自上述4省份292株葡萄霜霉病菌对烯酰吗啉的抗性频率;采用叶盘法测定了田间抗性菌株与敏感菌株的适合度。结果表明,上述4个地区的平均烯酰吗啉抗性频率及抗性等位基因频率分别为64.0%和74.7%,其中山东省蓬莱区最高(91.2%和96.3%),河北省廊坊市(73.8%和85.0%)和云南省宾川县(75.0%和82.6%)次之,山西省清徐县(16.7%和34.7%)最低。适合度分析发现,田间抗性菌株的产孢能力明显高于敏感菌株,但二者的复合适合度指数无显著差异。上述结果表明,4省份霜霉病菌群体均对烯酰吗啉产生了不同程度的抗性,田间抗性菌株与敏感菌株相比无明显适合度变化。     

不同抗性黄瓜品种连作对枯萎病菌群体遗传分化的影响

 尖孢镰刀菌黄瓜专化型(Fusarium oxysporum f. sp. cucumerinum, Foc)是引起黄瓜枯萎病的病原真菌,为了明确不同抗性黄瓜品种连作对枯萎病菌遗传分化的影响,本研究采用TEF1-α、H3基因片段对不同抗性黄瓜品种连作及对轮作后分离的枯萎病菌群体进行遗传分化分析。结果表明,感病品种连作及轮作后菌群分化程度较低( 0.007< F_ST <0.045 );与种植抗病品种一茬后的菌群相比,连作三、五茬后的菌群均发生显著分化(F_ST > 0.050),其中连作三茬后的菌群遗传分化程度最高(F_ST > 0.300)。单倍型分析发现,抗、感病品种连作后部分菌株形成新的单倍型,且分离自抗病品种的病原菌群体分化产生的单倍型数量多于感病品种。主成分分析结果进一步证明,与感病品种连作及轮作相比,抗病品种连作后病原菌菌群呈现出更显著的菌群分化。综上所述,抗病品种连作能够加剧黄瓜枯萎病菌群体的遗传分化。     

云南省葡萄霜霉病菌群体遗传结构的SSR分析

为明确云南特色葡萄产区葡萄霜霉病菌的群体遗传结构,本研究采用7对SSR分子标记对采自云南3个地区的155株葡萄霜霉病菌进行了群体遗传多样性研究,并分析了病原菌群体遗传结构与地域之间的关系。7对引物共检测出41个等位基因,114种基因型,病原菌群体的Shannon’s信息指数和Nei’s无偏基因多样性指数分别为0.942和0.600。分子方差分析和群体连锁不平衡分析显示,不同群体间存在相当大的遗传变异。遗传分化系数、基因流以及Structure分析表明,元谋群体与宾川、寻甸两群体之间均具有较高的基因交流,宾川和寻甸两群体间则存在一定的遗传分化。上述结果表明,云南葡萄霜霉病菌群体存在较高水平的遗传多样性,且群体遗传结构与地理距离之间存在一定相关性。     

川中丘陵区面向现代化的文化旅游发展战略研究

以川中丘陵区为例,分析了其现代化水平落后的主要原因,指出了旅游业作为第三产业的龙头产业,必将成为知识经济时代推动地区现代化发展的新生产力,总结出川中丘陵区文化旅游资源类型多样、主题突出、分布集聚的优势特点,并针对该区文化旅游的发展提出了主题化、多样化、集聚化和可持续发展四大战略途径。     

黑龙江和云南葡萄产区灰霉病菌对多菌灵和异菌脲的抗性检测

为明确黑龙江省和云南省葡萄灰霉病菌对多菌灵和异菌脲的抗性频率, 从两省分别采集?分离到葡萄灰霉病菌 Botrytis cinerea 39株和38株, 利用菌丝生长速率法测定其对多菌灵和异菌脲的敏感性, 并分别检测上述菌株两种药剂靶标基因 β-tubulin 和 Bos1 的突变情况?结果表明, 黑龙江省葡萄灰霉病菌对多菌灵和异菌脲的抗性频率以及对两种杀菌剂的多药抗性频率分别为100.0%?51.3%和51.3%; 云南省葡萄灰霉病菌对多菌灵和异菌脲的抗性频率以及对两种杀菌剂的多药抗性频率均为97.4%?两地区的多菌灵抗性菌株的 β-tubulin 基因上均发生了E198A或E198V突变?异菌脲抗性菌株的 Bos1 基因存在I365N?I365S?Q369P+N373和Q369P等4种突变类型?研究结果表明, 在上述两个地区不宜单独使用多菌灵和异菌脲防治葡萄灰霉病, 应使用其他作用机制不同且抑菌效果好的杀菌剂?     

澧县‘红地球’葡萄表面黑色组曲霉种群结构及产毒情况研究

葡萄和葡萄制品面临着真菌毒素的威胁, 这些真菌毒素主要来自于黑色组曲霉Aspergillus section Nigri?本研究对采自湖南省澧县‘红地球’葡萄上的黑色组曲霉进行了分离鉴定及种群结构分析, 并采用超高效液相色谱串联质谱技术(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, UPLC-MS/MS)对12株代表菌株产赭曲霉毒素(ochratoxin A, OTA)和伏马毒素B2(fumonisin B2, FB2)的能力进行了测定?结果表明, 澧县地区‘红地球’葡萄带菌率为92%?基于钙调素序列, 分离得到的131株黑色组曲霉分属于5个种, 其中A.aculeatinus为优势种?12株代表菌株均不产生OTA; A.welwitschiae(4/5)及A.niger(2/2)可产生FB2, 平均产毒量分别为3.36 ng/g及741.37 ng/g?上述结果为评估国内葡萄表面黑色组曲霉及其毒素的污染风险提供参考?     

葡萄霜霉病菌PCR检测方法的建立与应用

通过对已测序和已报道的葡萄霜霉病菌［Plasmopara viticola (Berk et Curtis) Ber.et de Toni］细胞色素c氧化酶亚型2（cytochrome c oxidase Ⅱ，cox2）的基因序列进行同源性比对分析，设计合成了一对用于P.viticola的检测引物F Pv/R Pv。利用该引物对包括P.viticola在内的30种常见植物病原真菌（包括15种Plasmopara属真菌、8种葡萄常见致病菌）的基因组DNA进行了PCR扩增，验证引物F Pv/R Pv的特异性，结果表明：该引物特异性强，仅P.viticola基因组DNA作为模板的PCR扩增产物呈现一条600 bp左右的特异性条带，其他参照菌株及阴性对照均无任何条带；灵敏度验证结果表明，该检测法可以检测出3.3 pg/μL 水平的P.viticola基因组DNA；应用该方法对来自全国不同葡萄产区的不同品种的78份葡萄霜霉病菌进行了检测，结果表明，该检测法适用范围广，且检测准确率达100%。