莱茵衣藻type Ⅰ metacaspase基因克隆及其参与调控程序性细胞死亡研究

Metacaspase是在原生动物、真菌和植物中发现的一种具有底物精氨酸/赖氨酸特异性的半胱氨酸蛋白酶。根据蛋白质结构特征可将metcaspase分为typeⅠ与typeⅡ两种类型,均参与调控多种植物与原生动物程序性细胞死亡。本研究根据GenBank数据库莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii) type Ⅰ metacaspase基因(GenBank No. XM_001696904)序列,采用巢式PCR克隆获取type Ⅰmetcaspase基因开放阅读框(ORF)序列并命名为CrMC1。CrMC1 ORF全长987 bp,推测编码1个包含405个氨基酸的蛋白质。通过与已知物种type Ⅰ metacaspase氨基酸序列进行同源序列比对发现,CrMC1具有高度保守的p20、p10、连接区结构域以及精氨酸、半胱氨酸活性中心位点。研究显示,在H_2O_2诱导的莱茵衣藻程序性细胞死亡过程中,CrMC1表达量显著提高(P0.05),2 h后达到峰值,3 h时下降至对照组同一水平。结果表明,莱茵衣藻typeⅠ metacaspase基因CrMC1参与H_2O_2诱导的莱茵衣藻程序性细胞死亡调控。     

莱茵衣藻type I metacaspase基因克隆及其参与调控程序性细胞死亡研究

Metacaspase是在原生动物、真菌和植物中发现的一种具有底物精氨酸/赖氨酸特异性的半胱氨酸蛋白酶。根据蛋白质结构特征可将metcaspase分为typeⅠ与typeⅡ两种类型，均参与调控多种植物与原生动物程序性细胞死亡。本研究根据GenBank数据库莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii) type I metacaspase基因(GenBank No. XM_001696904)序列，采用巢式PCR克隆获取type I metcaspase基因开放阅读框(ORF)序列并命名为CrMC1。CrMC1 ORF全长987 bp，推测编码1个包含405个氨基酸的蛋白质。通过与已知物种type I metacaspase氨基酸序列进行同源序列比对发现，CrMC1具有高度保守的p20、p10、连接区结构域以及精氨酸、半胱氨酸活性中心位点。研究显示，在H2O2诱导的莱茵衣藻程序性细胞死亡过程中，CrMC1表达量显著提高(P<0.05)，2 h后达到峰值，3 h时下降至对照组同一水平。结果表明，莱茵衣藻type I metacaspase基因CrMC1参与H2O2诱导的莱茵衣藻程序性细胞死亡调控。