黑水虻幼虫替代饲料直接投喂对锦鲤生长消化、肝胰脏抗氧化酶和血清非特异性免疫指标的影响

以锦鲤为试验对象,将黑水虻幼虫活虫和黑水虻幼虫干虫分别替代饲料对锦鲤进行投喂,投喂30 d后测定血清和组织中抗氧化酶活性和非特异性免疫指标。结果表明,干虫组的特定生长率、增重率显著低于对照组和活虫组(P<0.05),而体均重与肥满度各组间差异不显著(P>0.05)。血清中ALT活力活虫组显著高于干虫组(P<0.05),AKP活力对照组显著低于活虫组和干虫组(P<0.05),AST活力、ACP活力和溶菌酶活力各组间差异不显著(P>0.05)。肝胰脏T-SOD活力和T-AOC对照组显著低于活虫组和干虫组(P<0.05),CAT活力和GSH-Px活力各组间差异不显著(P>0.05)。前肠淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶活力各组间差异不显著(P>0.05)。可见,将黑水虻作为一种环保、价格低廉的饲料投喂锦鲤,对其生长、抗氧化能力和非特异性免疫有促进作用,作为新型饲料具有可行性。     

锦鲤肠道不同部位菌群组成结构及多样性分析

【目的】研究锦鲤（Cyprinus carpio var.koi）肠道的菌群组成结构及多样性,为深入研究锦鲤肠道菌群的功能及肠道不同部位的生理功能的分化提供参考。【方法】收集锦鲤前肠、中肠和后肠的肠道细菌,通过传统培养技术,采用细菌微量生化鉴定管对肠道细菌进行各项生理生化指标的测定;分别提取3个肠段的肠道菌群基因组DNA,进一步采用16S rDNA高通量测序技术,分析3个肠段的菌群组成和生物多样性。【结果】前肠、中肠和后肠样本测序后分别得到48659、47013和47819条有效序列,按97%相似性水平划分OTU后,分别得到1555、1294和1423个OUTs。α多样性分析结果显示,后肠菌群样本的Shannon指数、Chao1指数最高。在门水平上,前肠、中肠和后肠丰度最高的5个菌门均是变形菌门（Proteobacteria）、梭杆菌门（Fusobacteria）、拟杆菌门（Bacteroidetes）、厚壁菌门（Firmicutes）和黏胶球形菌门（Lentisphaerae）,推测这些菌门是锦鲤肠道的核心细菌类群,但各菌门在不同部位的相对丰度有差异。构建的物种丰度热图显示相对丰度最高的前10类菌属相同,但某些菌属在肠道不同部位的相对丰度有较大差异,如代尔夫特菌属（Delft）、弓形菌属（Toxoplasma）。UniFrac分析显示中肠和后肠的肠道菌群聚为一支,表明这2个部位菌群组成结构相似度较高。【结论】锦鲤肠道不同部位具有独特的菌群结构,可能会影响肠道不同部位功能的分化。     

神经型一氧化氮合酶在大菱鲆脑组织中的分布及定位

[目的]探明神经型一氧化氮合酶(nNOS)在大菱鲆(Scophthalmus maximus)脑组织中的分布情况,为揭示大菱鲆脑组织中一氧化氮(N0)的生理功能提供形态学资料.[方法]分别采用NADPH-d组织化学染色法和免疫组织化学法对大菱鲆脑组织中的nNOS进行定位研究.[结果]NADPH-d组织化学染色结果显示,大菱鲆大脑皮质中有蓝色的神经元和神经纤维存在.神经元呈梭形、锥形等形状,神经纤维呈串珠状且无序交织;小脑中NOS阳性神经元在分子层分布稀疏,在颗粒层分布密集,浦肯野细胞胞核淡染.经免疫组织化学法染色后,可观察到大脑皮质中nNOS免疫组化反应阳性物质呈深棕色;小脑皮质的分子层、颗粒层及浦肯野细胞层均有nNOS阳性神经元分布,浦肯野细胞呈免疫组织化学阳性反应.[结论]大菱鲆脑组织中的NOS类型主要限于nNOS,且nNOS在神经活动中发挥重要作用,也进一步证实N0在不同物种中具有一些共同的作用,但不同物种或相同物种不同组织中NO分布及含量存在差异.     

苯酚对红鳍东方鲀肝胰脏CuZn-SOD和Mn-SOD基因表达的半定量分析

应用半定量RT-PCR法,研究苯酚对红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)幼鱼肝胰脏CuZn-SOD和Mn-SOD基因相对表达量的影响。试验鱼饲养在苯酚浓度为0、0.18、0.32、0.56、1.00和1.35 mg/L的海水中,分别在苯酚暴露前和暴露4、8、12和16 d后取样。结果表明,在苯酚暴露前,鱼体肝胰脏中CuZn-SOD和Mn-SOD基因均有基础表达。在整个暴露时间(16 d)下,CuZn-SOD和Mn-SOD mRNA相对表达量呈现出逐渐上调的趋势,即苯酚诱导了两种基因的表达。在苯酚暴露第4天时,各浓度处理组CuZn-SOD mRNA和Mn-SOD mRNA的相对表达量均达峰值,显著高于暴露前水平(P0.05)。     

肉桂醛纳米乳的制备及其抑菌效果研究

为评价肉桂醛纳米乳对水产动物致病菌的抑菌效果,以吐温-80为表面活性剂、乙醇为助表面活性剂、乙酸乙酯为油相,加蒸馏水按比例配制成空白纳米乳,加入肉桂醛制备得肉桂醛纳米乳,并评价了肉桂醛纳米乳的部分特性;探究肉桂醛纳米乳对迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、温和气单胞菌(Aeromonas sobria)、鳗败血假单胞菌(Pseudomonas anguilliseptica)4种常见水产动物致病菌的抑菌效果。结果显示,肉桂醛纳米乳中吐温-80、乙醇、乙酸乙酯、蒸馏水和肉桂醛质量比为10∶5∶11∶73∶1,空白纳米乳对肉桂醛的最大载药量为20.11 mg/m L,肉桂醛纳米乳为水包油型淡黄色澄清透明液体,粒径5~20 nm,平均粒径10.74 nm;与同浓度肉桂醛溶液相比,肉桂醛纳米乳具有更强的抑菌活性,在最大载药量时,对嗜水气单胞菌、鳗败血假单胞菌、迟缓爱德华氏菌、温和气单胞菌的抑菌强度分别提高了65.56%、46.99%、41.94%、26.91%。肉桂醛纳米乳对嗜水气单胞菌、温和气单胞菌、鳗败血假单胞菌、迟缓爱德华氏菌的最小抑菌浓度(MIC)分别0.31、0.51、0.72、1.00 mg/m L。研究表明,肉桂醛纳米乳在水产养殖中具有潜在的应用价值。     

鲫鱼肠道蜡样芽孢杆菌的分离鉴定及生物学特征

从健康鲫鱼(Carassius auratus)肠道中分离纯化出1株细菌,命名为CS4,通过形态学观察、生理生化特性、16S rDNA测序以及系统发育分析等方法鉴定为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus),并对其致病性及药物敏感性等生物学特征进行研究。结果表明,菌株CS4具有β溶血性(完全溶血),对健康鲫鱼感染9 d的半数致死量为4.6×10~6 CFU/g。该菌株对复方新诺明、利福平、呋喃唑酮、头孢孟多、阿莫西林等16种抗生素耐药;对红霉素、诺氟沙星、庆大霉素、丁胺卡那、林可霉素等17种抗生素敏感。笔者从健康鲫鱼肠道中分离到致病性较强的蜡样芽孢杆菌,表明该菌是一种重要的条件性致病菌,研究结果对防治由蜡样芽孢杆菌引起的鱼类疾病具有实际意义。     

短途运输胁迫对珍珠龙胆石斑鱼血清酶活力及葡萄糖含量的影响

研究分析了运输胁迫后0,6,12,24,48,96,168 h珍珠龙胆石斑鱼血清酶及葡萄糖含量的变化。选取平均体质量为(205.5±34.76)g的珍珠龙胆石斑鱼240尾为试验对象,进行30 min的短途运输胁迫后,测定珍珠龙胆石斑鱼部分血清指标。结果表明:总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力在6 h达到最低值,胁迫后的0,6,12,24 h与胁迫前和胁迫后96,168 h差异性显著(P0.05)。过氧化氢酶(CAT)活力在胁迫后的6 h达到最高值,胁迫后的0,6,12,24 h显著高于胁迫前水平(P0.05)。谷胱甘肽(GSH)含量在胁迫后0 h最高,显著高于胁迫前及胁迫后各时间段(P0.05)。总抗氧化能力(T-AOC)在胁迫后24 h达到最大值,显著高于胁迫前及胁迫后0,168 h值(P0.05)。谷草转氨酶(GOT)和谷丙转氨酶活力(GPT)均在胁迫后6 h达到最大值,在胁迫后的6~24 h显著高于胁迫前及其余各时间组水平(P0.05)。酸性磷酸酶(ACP)活力变化趋势与碱性磷酸酶(AKP)活力基本一致,胁迫后24 h达到最大值,显著高于胁迫前及胁迫后除12 h的其余各组(P0.05)。乳酸脱氢酶(LDH)活力在运输后6 h达到最高值(P0.05),6~48 h酶活力值显著高于胁迫前和胁迫后其余各时间组(P0.05)。葡萄糖(GLU)含量在胁迫后48 h达到最大值,随后恢复到胁迫前水平,胁迫前与胁迫后各时间组间差异不显著(P0.05)。研究表明:短途运输胁迫造成了珍珠龙胆石斑鱼的应激反应,但在胁迫后168 h血清部分生理指标趋于胁迫前水平,对其生理机能不会产生持久性影响。     

七里海中华绒螯蟹遗传多样性的RAPD和ISSR分析

利用RAPD-PCR及ISSR-PCR两种分子标记技术,分析了七里海中华绒螯蟹第6代繁育群体的遗传多样性。用10个多态性高的RAPD引物对24个七里海中华绒螯蟹样本个体进行扩增,共检测出107个不同的扩增位点,扩增片段大小为300~2300bp。其中多态位点总数为66个,平均多态位点比例为61.32%,群体内香农-维纳多样性值为0.1714。用8个多态性高的ISSR引物对24个个体共检测到106个位点,扩增片段为200~1500bp。其中多态性位点79个,平均多态位点百分率为74.53%,群体内香农-维纳多样性值为0.1778。结果显示,该群体的多态位点比例和香农-维纳多样性值均较大,说明其有较丰富的遗传多样性,同时也说明RAPD和ISSR技术用于七里海中华绒螯蟹核基因组的遗传多样性分析,具有较高的检出率和灵敏度。     

不同盐度下5种中草药对2种水产动物致病菌的抑菌效果比较

采用牛津杯法比较不同盐度(0、1%、2%、3%、4%)下五倍子、石榴皮、诃子、黄芩、乌梅5种中草药对迟缓爱德华氏菌和嗜水气单胞菌的抑菌效果,测定了最小抑菌浓度。结果表明,5种中草药对迟缓爱德华氏菌和嗜水气单胞菌都有不同程度的抑菌效果,其中黄芩和五倍子抑菌作用较强,乌梅抑菌作用较差,而诃子和石榴皮的抑菌作用一般,但石榴皮对嗜水气单胞菌的抑菌作用较为明显。不同盐度下,5种中草药对这2种致病菌的最小抑菌浓度(MIC)有差异。高盐度时,5种中草药对迟缓爱德华氏菌的MIC较低,均≤25 mg/m L,抑菌效果较好;而低盐度时,各个中草药MIC均在25 mg/m L及以上,抑菌效果较差。在盐度为0时,5种中草药对嗜水气单胞菌的MIC最低,抑菌效果最好。