鸡传染性法氏囊病病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

R-PCR扩增IBDV的VP5基因保守片段,将其克隆到pMD18-T载体,经测序鉴定得到阳性质粒.以阳性质粒为标准品,建立SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR的标准曲线和溶解曲线.结果表明,IBDV荧光定量PCR的标准曲线Ct值与3.29×10～3.29×108之间的病毒基因拷贝数呈现良好的线性关系.该方法...     

福建省蛋鸡血管瘤型J亚群白血病的分子生物学诊断

针对福建省某鸡场的蛋鸡群发生产蛋下降和部分死亡,病鸡脚趾明显呈现血管瘤特征,运用实时荧光定量PCR方法对病鸡组织和血液样品进行检测,检出了J亚群白血病病毒(ALV-J);通过基因序列的比较分析,发现其氨基酸序列与国外及国内其他省份报导的ALV-J有很高的同源性,从病原分子生物学诊断角度证实福建省蛋鸡群中ALV-J的存在。     

柠檬花期、幼果期抹梢对产量的影响

不同树龄柠檬在开花期与幼果期,通过抹除全部不带花蕾的嫩梢,研究其对柠檬产量的影响.结果表明,在第一次生理落果至第二次生理落果结束时,均未出现生长的新梢.柠檬的结果量、春花着果量及其坐果率均较对照增加,春花着果量比对照增加46.0％～92.4％.3年生、4年生、5年生柠檬树平均单株产量分别比对照高11.8、9.9、9.8 kg,平均产量分别为26 748、40 570.5、51 720 kg/hm2,分别比对照增产18 813、16 626、17 652 kg/hm2；经济效益分别比对照增加49 467、43 300.5、50 775元/hm2.梢抽生数量、平均梢长都与第二次生理落果后春花着果、柠檬着果率呈极显著负相关；柠檬落果数量与平均单株产量及实际测定产量呈极显著相关.     

多鳞鱚vhl基因克隆及其低氧胁迫下的表达变化

[目的]克隆多鳞鱚林岛综合征基因(vhl)并分析其在低氧胁迫下的表达变化,为揭示多鳞鱚应对低氧的适应机制提供研究资料,也为今后开展多鳞鱚新品种选育提供候选基因.[方法]采用PCR克隆多鳞鱚vhl基因cDNA全长序列,利用EditSeq、SMART、Signal IP 4.1及ClustalX等在线软件进行生物信息学分析;并以半定量PCR检测多鳞鱚vhl基因在不同组织中的表达情况,采用实时荧光定量PCR分析低氧胁迫对多鳞鱚vhl基因在鳃组织和心脏中表达的影响.[结果]多鳞鱚vhl基因cDNA序列全长727 bp,包括120 bp的5'端非编码区(5'-TUR)、106 bp的3'端非编码区(3'-TUR)和504 bp的开放阅读框(ORF),共编码167个氨基酸残基,编码蛋白存在4个结构域,即Pfam:VHL(第12~93位氨基酸)、Pfam:VHL_C(第5~22、31~39和98~153位氨基酸)、ParB结构域(第100~162位氨基酸)和SOCS_box结构域(第104~140位氨基酸).多鳞鱚vhl氨基酸序列与盲曹鱼vhl氨基酸序列的同源性最高(81%),但系统发育进化分析结果显示多鳞鱚与攀鲈的亲缘关系最近.多鳞鱚vhl基因在不同组织中均有表达,其中以鳃组织、卵巢和精巢的表达量较高,其次是心脏和肝脏,在肌肉和脑组织的表达量较低.经低氧胁迫后,多鳞鱚vhl基因在鳃组织中的相对表达量显著上调(P<0.05,下同);在心脏中表现为随低氧胁迫时间的延长显著上调,恢复氧气4 h后vhl基因的相对表达量虽然呈显著下调趋势,但仍显著高于正常水平.[结论]多鳞鱚vhl基因编码蛋白存在Pfam:VHL、Pfam:VHL_C、ParB和SOCS_box等4个结构域,且低氧胁迫前后其表达量存在显著差异,即多鳞鱚vhl基因在低氧应答信号通路中扮演着重要角色.     

蛋鸡J亚群禽白血病病毒gp85基因遗传进化分析

为了解福建省蛋鸡J亚型禽白血病病毒(ALV-J)的遗传进化关系,对来自福建省蛋鸡场发病蛋鸡中分离鉴定的3株ALV-J的gp85基因进行克隆与测序,并与国内外18株ALV-J参考株的基因序列进行分析。结果表明:3株蛋鸡分离株的gp85基因与亚群2的国内蛋鸡分离株(CL09DP02、GL09DP01和HuB09JY03)以及原型株HPRS-103的亲缘关系较近,达97.8%~99.6%,表明福建省蛋鸡ALV-J株很可能与国内部分蛋鸡ALV-J分离株有着共同的来源。     

半番鸭源鸭1型甲肝病毒亚型的分离鉴定及其VP1基因分析

自胰腺泛黄的雏半番鸭中分离获得1株病毒(命名为FJ1605株),经RT-PCR检测为鸭1型甲肝病毒,通过鸭胚中和试验发现该株病毒可被鸭1型甲肝病毒亚型(DHAV-1a)高免血清特异性中和,确定该株病毒为鸭1型甲肝病毒亚型。对该株病毒VP1基因进行分子特征分析,发现其核苷酸大小为714bp,与GenBank登录的DHAV-1a同源性为98.1%~99.7%,与DHAV-1FJ1220毒株同源性最高达99.7%;而与鸭2型甲肝病毒(DHAV-2)、鸭3型甲肝病毒(DHAV-3)VP1基因的核苷酸同源性仅分别为65.7%和68.3%左右。基于VP1基因的遗传进化分析表明,FJ1605分离株属鸭1型甲肝病毒亚型谱系。以该株病毒对7日龄雏半番鸭进行人工感染试验,可完全复制出同于临床病例的病变。以上结果显示,雏半番鸭也可感染DHAV-1a,且表现为胰腺泛黄。     

早春蛋鸡群优质高产管理11要点

正春季气候由冷变暖,日照逐渐延长,是鸡产蛋最旺盛的季节,更提高鸡群养殖效益的关键时期。因此,加强此期的饲养管理,是确保鸡群安全,优质、高产的关键。1保暖早春气候寒冷多变,给养鸡生产带来许多不便,特别是低温对产蛋鸡的影响十分明显。因此,一般情况下,可采取适当增加饲养密度,并闭门窗,加挂草帘,饮用温水和火炉取暖等方式进行御寒保温,使鸡舍温度最低维持在3~5℃之间。     

春季猪呼吸道疾病的鉴别诊治

正1支原体主要症状是体温不高,咳、喘、呼吸高度困难、痉挛性咳嗽;伴有腹式呼吸,有喘鸣音。本病大小猪均可发病,发病率高,死亡率低;病程长,反复发作。解剖主要表现肺气肿,水肿,有对称性肉变,呈紫灰色、灰白、灰黄色。预防应坚持自繁自养、全进全出,保持舍内空气新鲜,减少灰尘,降低氨气浓度,减少应激,减少密度,提供适宜的温度。治疗上常用的敏感类抗生素有:喹诺酮类、泰乐菌素类、替米考星等。需要注意的是,使用抗生素不能阻止感染的发生和清除猪体内的病原体,停药后仍有复发的可能。     

福建省H9N2亚型禽流感病毒HA和NA基因的进化分析

为进一步了解福建省H9N2亚型禽流感病毒的基因遗传进化关系,本研究将福建省2011年分离的毒株FZ-04、FZ-11与GenBank上登录的2000～2011年福建省分离的H9N2毒株及国内外典型代表株进行HA、NA基因的序列比对和遗传进化分析。结果表明,分离株FZ-04和FZ-11的HA基因与CK/FJ/G9/09株核苷酸同源性最高,属于国内常见的CK/BJ/1/94亚系。HA裂解位点处的氨基酸序列为-PSRSSR/GL-,符合低致病性禽流感病毒的分子特征。NA基因在遗传进化关系上呈现独立的分支,与CK/FJ/10954/05毒株核苷酸序列同源性最高,属于CK/HK/G9/97亚系,且NA基因推导的469个氨基酸序列中没有缺失。同时,从HA和NA基因的遗传进化树上可知,2000～2011年福建省H9N2禽流感病毒进化相对比较稳定,可能有一个共同的起源。