尼罗罗非鱼精巢支持细胞分离培养体系建立及优化

本研究分离培养尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)精巢支持细胞(Sertoli cells, SCs)，建立并优化尼罗罗非鱼精巢支持细胞分离培养体系。无菌条件下，取发育至第Ⅲ期的尼罗罗非鱼精巢，PBS清洗后，剪碎精巢组织，0.25%胰蛋白酶消化，用含10%犊牛血清(Newborn bovine serum, NBS)的L-15培养液终止消化，过滤、离心，获得细胞。差速贴壁法获得SCs后，在26℃、无CO2饱和湿度恒温培养箱中培养。分别采用含10% NBS的L-15、M199、F12培养液，含5%、10%、15% NBS的L-15培养液，含1%罗非鱼血清的L-15+10% NBS培养液培养尼罗罗非鱼SCs。各组每2 d取细胞计数，绘制SCs生长曲线；甲基绿染色，倒置显微镜下观察SCs的形态。尼罗罗非鱼SCs培养1~2 d，细胞贴壁；培养3~5 d，细胞完全贴壁并迅速增殖。单个SCs呈不规则多边形，其核位于胞质中央，呈卵圆形，胞质中可见吞噬颗粒和空泡，空泡聚集于支持细胞胞质的两极或散布于核的四周。SCs在L-15培养液中贴壁生长，在F12、M199培养基中较难贴壁。与F12、M199培养液相比，L-15培养液更有助于尼罗罗非鱼SCs生长增殖(P<0.01)。与添加5%和15% NBS相比，在L-15培养基中添加10% NBS更有助于尼罗罗非鱼SCs生长增殖(P<0.05)。与未添加尼罗罗非鱼血清相比，在10% NBS+L-15培养中添加1%尼罗罗非鱼血清，能显著促进SCs生长增殖(P<0.05)。研究表明，采用胰酶消化差速贴壁法获得尼罗罗非鱼精巢支持细胞，10% NBS+1%罗非鱼血清+L-15培养液培养，能显著促进尼罗罗非鱼精巢支持细胞生长增殖。     

人口性别比失调男人多女人俏

现状 从沿海向中西东部蔓延 最近,一个数字成为人们关注的焦点.不少媒体称,中国男女比例出现严重失衡,到2020年,中国处于婚龄的男性人数将比女性多出3000万到4000万,相当于整个大洋洲的人口数量.这意味着平均五个男性中将有一个找不到配偶,将有数千万的男子将无妻可娶,成为传统意义上的"光棍".而且这一现象从明年开始将逐渐显现出来.     

2012年忻州市秋季初次寒潮天气过程分析

本文利用micaps系统资料和常规观测资料,从大尺度环流背景、高低空天气形势场及物理场等方面,对造成9月11至13日忻州市大范围的强降温和大风天气过程的成因进行了诊断分析。结果表明：500hpa横槽转竖并东移后,引导冷空气大举南下,是产生本次强降温和大风的必要条件。500～850hpa高空横槽、地面冷锋和蒙古冷高压是本次寒潮过程的主要影响天气系统。     

微塑料对小鼠生长和小肠结构的影响

为了探究微塑料对生物体的生长特性及肠道结构的影响,选取微塑料聚乙烯(PE)和聚苯乙烯(PS)作为原料,分别按0.3%(3 g kg-1鼠粮)、3%(30 g kg-1鼠粮)两种浓度混合添加于昆白小鼠日粮。饲喂期间记录小鼠的体重、饮食行为,27 d后进行剖检并采集小肠(十二指肠、空肠、回肠)制成石蜡切片观察显微结构。结果表明:对照组与微塑料添加组小鼠饮食与精神状态均正常,对照组小鼠体重在整个饲喂周期内逐渐增加,微塑料添加组在饲喂的前期体重增加,但在后续大部分小鼠体重增长停滞,甚至下降。不论是PE或PS微塑料添加组,整个小鼠体重增长均显著慢于对照组(P<0.01),并呈现浓度依赖性,但两种微塑料相比没有显著差异。肠道显微结构表明,微塑料添加组小鼠出现小肠绒毛肿胀、结构破坏、杯状细胞减少、黏膜下层增生等现象。小鼠摄入微塑料导致小肠显微结构破坏,生长减慢。     

Activin A诱导大鼠胰腺导管干细胞分化形成胰岛β细胞

[目的]研究Activin A体外定向诱导大鼠胰腺导管干细胞分化形成胰岛β细胞的作用,为移植体外新生β细胞治疗宠物犬糖尿病打下基础,同时为胰岛细胞体外再生培养的优化提供科学依据.[方法]采用培养液RPMI-1640+10%FBS+10 ng/mL EGF+1%青霉素—链霉素扩增大鼠胰腺导管干细胞至单层,空白对照组加基础培养液,诱导组在基础培养液中分别添加5、10、15和20 ng/mL Activin A,连续培养28 d.诱导培养期间于倒置显微镜下观察细胞形态变化,诱导结束后通过双硫腙(DTZ)染色、细胞免疫荧光染色、ELISA检测及实时荧光定量PCR等方法对分化形成的类胰岛细胞团功能和性状进行验证.[结果]大鼠胰腺导管干细胞经Activin A诱导分化形成球形细胞,并聚集成团(类胰岛),DTZ染色结果均呈阳性.诱导28 d后,20 ng/mL Activin A诱导组的类胰岛细胞团数量及其Insulin基因表达水平均极显著高于其他3个Activin A诱导组(P<0.01,下同),且类胰岛细胞体积最大,类胰岛细胞的Pdx1基因表达水平最高;无论在低葡萄糖(5 mmol/L)还是高葡萄糖(25 mmol/L)的刺激下,20 ng/mL Activin A诱导组类胰岛细胞的Insulin和C-peptide分泌量均极显著高于其他3个Activin A诱导组.[结论]Activin A能体外诱导大鼠胰腺导管干细胞分化形成胰岛β细胞,且以基础培养液中添加20 ng/mL Activin A的诱导效果最佳.     

猪血管内皮细胞中与猪瘟病毒相关microRNA的初步筛选

本试验旨在筛选猪脐静脉血管内皮细胞(SUVECs)内作用于猪瘟病毒(CSFV)的microRNA。通过构建CSFV3′和5′非翻译区(Untranslated region,UTR)的双荧光素酶报告基因载体,经生物信息学预测可能与CSFV相互作用的microRNA,然后瞬时共转染重组载体与microRNA的抑制物,最后通过发光检测仪测定荧光素酶活性。结果表明,成功构建了CSFV5′非翻译区(373 bp)和3′非翻译区(252 bp)的报告基因载体,并合成了4条预测出的microRNA(ssc-mi R-let7c、ssc-mi R-106a、ssc-mi R-18、ssc-mi R-139)的抑制物,共转染后发光检测仪检测到荧光素酶的活性被不同程度抑制。本研究发现microRNA作用位点主要在CSFV的3′-UTR,而且以上4种microRNA都对CSFV3′-UTR有不同程度的抑制作用,其中ssc-mi R-18的抑制作用比较明显。     

嬗变中的生育观

家庭是社会结构中最基本构成单元的表述，完整的家庭结构，有助于增加一个家庭的稳定性。     

基于GSM的对虾养殖场增氧机监控系统设计

增氧机是实现高密度、高产量对虾养殖的重要设备。为保障增氧机连续可靠运行,减少因增氧机故障给养殖户带来的损失,研究并设计了一套基于GSM通信网络的增氧机监控系统。该系统由手机终端和监测执行终端组成,监测执行终端以STC12C5A32S2为主控芯片,并采用AC电流检测电路及SIM900模块对增氧机运行状态进行监测及远程通信。通过手机终端,养殖户可实现对增氧机运行状态的实时监测和控制。当增氧机工作异常时,系统会立即以电话方式通知养殖户,并开启本地声音报警;如果养殖户配备了备用增氧机,系统会自动打开备用增氧机。实际应用效果显示,该系统能够满足养殖户对增氧机实时监控的需求,运行稳定、装配简易、操作方便,可有效降低养殖户巡查和维护的强度。     

高效液相色谱-质谱法检测乳及乳制品中青霉素类残留及其代谢产物的研究进展

综述了近年来高效液相色谱-串联质谱、超高效液相色谱-串联质谱法、超高效液相色谱-高分辨飞行时间质谱法、基质辅助激光解吸电离-傅里叶变换离子回旋共振质谱,在乳及乳制品中青霉素类残留及其主要酶解代谢产物、体内代谢产物等方面检测中的应用.从样品的提取、净化、色谱分离方式和质谱检测方式四方面进行了分析.