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1.
为进一步研究鲤疱疹病毒Ⅱ型 ( Cyprinid herpesvirus 2, CyHV-2) ORF4蛋白的功能, 通过PCR扩增CyHV-2 ORF4基因, 并构建重组穿梭质粒pFastBac HTA-ORF4, 将其转化至大肠杆菌DH10 Bac感受态细胞后获得重组杆粒Bacmid-ORF4; 采用脂质体法转染Sf9细胞后, 利用间接免疫荧光法 ( IFA) 和West-ern blot鉴定重组蛋白, 采用His亲和层析柱纯化重组蛋白, 并通过小鼠免疫试验分析其免疫原性.结果表明: 转染72 h后Sf9细胞逐渐呈现出细胞变圆、细胞核明显增大的形态变化; 间接免疫荧光结果显示, 重组杆状病毒感染的Sf9细胞中出现了明显的绿色荧光; Western blot结果显示, 纯化的CyHV-2 ORF4蛋白能够与抗His单抗发生特异性反应; 小鼠免疫试验显示, 纯化的CyHV-2 ORF4蛋白能诱导小鼠产生特异性免疫反应.研究表明, 本研究中获得的CyHV-2 ORF4蛋白有较好的免疫原性, 为CyHV-2 ORF4蛋白的功能解析提供了良好材料.  相似文献   
2.
本研究通过人工抽离中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)体质量10%的体腔液诱导体腔细胞的修复更新,分组测定6、12、18和24 h后海胆围脏腔内的体腔细胞密度,分析体腔细胞的修复规律;同时,取各时间点海胆的中轴器进行组织学观察,并利用鼠抗人Ki-67(细胞增殖抗原)单克隆抗体检测中轴器内的细胞增殖信号。结果显示,人工抽离体腔液后6 h,体腔细胞密度与初始密度相比明显偏低;12 h后逐步升高,密度略低于初始密度,恢复度为(92.78±29.40)%;18 h后已明显高于初始密度,恢复度为(137.08±32.40)%,显著高于6 h和12 h的恢复度(P<0.05),随后,体腔细胞密度逐渐降低。海胆损失体腔液后,中轴器表现为内部组织消减、空腔化,外壁上皮细胞层崩解、脱离,凸起结构空泡化等变化,18 h后内部疏松组织略有增加,24 h后中央腔内出现明显的新生组织。利用Ki-67单克隆抗体检测发现,正常海胆中轴器内具有一定的细胞增殖信号,该信号在损失体腔细胞18 h后明显增强。结果表明,损失体腔细胞后,中间球海胆可启动快速恢复机制,而海胆的中轴器发生明显的组织结构变化,组织内的细胞增殖活动也明显增强。研究结果可为海胆体腔细胞的造血组织与发生机制研究提供依据。  相似文献   
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