中华蛸vasa基因的克隆及表达分析

vasa基因编码的蛋白是DEAD-box (Asp-Glu-Ala-Asp)蛋白家族成员,对真核生物生殖细胞的形成具有关键作用。本研究使用cDNA末端快速扩增技术(RACE)克隆了中华蛸(Octopus sinensis) vasa基因全长,共2438 bp,其中,开放阅读框长2067 bp,编码688个氨基酸,5′-UTR长128 bp,3′-UTR长244 bp (包含A尾巴)。基于ExPASy、Signal 4.1、TMHMM、SMART等在线软件对Os-vasa基因的蛋白质结构进行预测,得出其氨基酸分子量为76 580.53 Da,理论等电点为5.89。无信号肽,跨膜区域没有明显的信号,因此,推测其为胞内蛋白,不属于膜蛋白。该蛋白具有DEXDc和HELICc 2个功能结构域,而且有9个DEAD-box家族蛋白的典型保守区域,表明所得cDNA属于vasa基因家族。使用qRT-PCR对中华蛸各时期胚胎、初孵幼体及2个发育时期的卵巢及雌雄不同组织的表达模式进行分析。结果显示,Os-vasa基因在性腺中特异性表达,且在卵巢中的表达大于精巢,未成熟和成熟卵巢中均有vasa mRNA表达,且未成熟期表达量较高。因此,推测Os-vasa基因可能在卵巢发育过程和功能维持等方面起到重要作用。在中华蛸早期胚胎发育阶段,均能检测到Os-vasa基因转录本,前10 d微弱表达,从第13天开始,表达量逐渐上升,至第19天达到最高。在初孵幼体阶段,Os-vasa分别在第8天和第20天出现最低和最高表达量。本研究结果可为中华蛸原始生殖细胞起源、迁移和分化提供理论资料,有助于加深对中华蛸卵巢发育和卵子发生过程的理解。     

狼鳗的外部形态、消化系统和生殖系统的观察

采用观察、测量、解剖和拍照的方法，对狼鳗(Anarrhichthys ocellatus)的外部形态、可数可量性状及消化系统、生殖系统进行研究，并描述了狼鳗的相关特征。结果显示，狼鳗体型为鳗形，整体呈黑色或灰黑色，头部、背部及背鳍鳍条上有若干似眼睛的黑色圆斑，体表无鳞。背鳍鳍条数为232~267，胸鳍鳍条数为15~22，臀鳍鳍条数为189~220，无腹鳍，背鳍和臀鳍因与尾鳍相连而无明显区分界限，侧线左右各2条，均不完整，雄性侧线点明显，而雌性侧线点不明显。上排侧线点数为18~25，下排侧线点数为76~85。上鳃耙数为49~70，下鳃耙数为55~73，脊椎骨数为232~271。全长/体长线性相关性最好，雌、雄差异很小，稳定性最好。头长/吻长、头长/眼径、体长/肠长的变化范围较大，雌、雄间差异较大，线性相关性差，可以作为区分狼鳗雌、雄的重要特征；狼鳗体重与体长关系：W=0.0337Sl2.4798(R2=0.9992)，雌性：W=0.0326Sl2.4864(R2=0.9990)，雄性：W= 0.0359Sl2.4672 (R2=0.9995)。消化系统由消化道和消化腺构成，口咽腔大，具颌齿，无腭齿、犁齿，咽喉齿发达；胃大，呈“Ⅰ”型，无幽门盲囊；肠短粗，比肠长为0.45；相关性状及特征显示狼鳗为肉食性鱼类。雌雄异体，卵巢(Ⅲ~Ⅳ)呈椭圆形，粉红色，左右对称，精巢(Ⅲ~Ⅳ)呈黄白色，“Y”形。