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1.
鱼类的葡萄糖感知与糖代谢调节研究进展   总被引:2,自引:2,他引:0       下载免费PDF全文
为加深对鱼类糖的感知与代谢调控的认识,本文综述了鱼类的葡萄糖感知与摄食调控、糖代谢调控等领域的研究进展。鱼类的下丘脑不仅是中枢葡萄糖感受器所处的主要部位,同时也是食欲调节中枢。leptin、ghrelin、CCK、NPY等内分泌因子均能调控鱼类对糖的感知与摄食。另一方面,鱼类糖代谢受到胰岛素、GLP-1、ghrelin、CCK、NPY、SS等内分泌因子和糖、脂、蛋白质等营养素的双重调节。尽管鱼类对糖的利用能力低于陆生动物,但鱼体内亦存在较完善的糖的感知、摄食与代谢调节机制。因此,将来的重点工作应在于研究鱼类中枢神经系统整合营养和内分泌等信号的机制,研究草食性鱼类、杂食性鱼类在糖耐受力及糖异生调控机制上与肉食性鱼类存在的差异。  相似文献
2.
淇河鲫IL-8 cDNA克隆及组织表达分析   总被引:2,自引:2,他引:0       下载免费PDF全文
IL-8是最早发现的趋化因子,属于CXC亚家族,与鱼类非特异性免疫水平关系密切。实验采用同源克隆和cDNA末端快速扩增(RACE)方法,从淇河鲫总RNA反转录产物中获得了641 bp IL-8cDNA序列,其中包含102 bp的5’非编码区,242 bp的3’非编码区和297 bp的开放阅读框。该基因编码由98个氨基酸残基组成的前体蛋白,前22个氨基酸残基为信号肽。肽链中含有4个保守半胱氨酸,前2个半胱氨酸被1个精氨酸分隔,形成CXC结构。第一个半胱氨酸前缺乏ELR基序,其组成是DPR。由氨基酸同源性分析和进化分析可知,淇河鲫IL-8与鲤、鳙、草鱼、鲢等鲤科鱼类的进化关系较近,与鲤IL-8的同源性最高(94%)。通过实时荧光定量PCR检测,淇河鲫IL-8在被检测的8个组织中都有表达,其中在肌肉中的表达量最高,其次为脾脏、头肾和脑等。研究结果对调控淇河鲫非特异性免疫能力,提高淇河鲫健康养殖水平具有一定参考价值。  相似文献
3.
草鱼SREBP-1基因的克隆及糖对其在肝脏中表达的影响   总被引:1,自引:1,他引:0       下载免费PDF全文
固醇调节元件结合蛋白(SREBPs)是调控糖脂代谢相关基因表达的关键核转录因子。为获知草鱼SREBP-1基因的序列及其在肝脏中的表达规律,本实验采用同源克隆和RACE的方法获得了草鱼SREBP-1的cDNA序列,并通过生物信息学方法对该基因及所编码蛋白的结构特征进行了分析;利用实时荧光定量PCR的方法,对SREBP-1在八种不同组织的表达规律及低糖(糖含量24%)和高糖(糖含量42%)投喂条件下肝脏中的表达水平进行了研究。结果显示:草鱼SREBP-1的cDNA长为4760 bp,其中开放读码框为3426 bp,编码1141个氨基酸;草鱼SREBP-1具有一个典型的碱性螺旋-环-螺旋亮氨酸拉链结构(bHLH-zip);氨基酸序列比对结果显示,草鱼SREBP-1与其他鱼类的同源性在76%-88%之间,与斑马鱼的进化关系最近;草鱼SREBP-1基因在脑中的表达量最高,肝脏和肠次之,在肾脏、脾脏、肌肉、脂肪和性腺中均有少量表达;与对照组相比,SREBP-1在高糖诱导下表达量显著提高(P<0.05),低糖诱导下没有显著性差异。结果表明:在高糖负荷条件下,草鱼肝脏中SREBP-1可能会促进糖的利用和转化,从而参与糖代谢调节过程,为丰富鱼类糖代谢调控机理提供研究资料,并有望为提高鱼饲料糖的利用效率提供理论依据。  相似文献
4.
为了筛选草鱼肝细胞脂肪变性的最佳诱导剂及浓度,并初步分析脂肪乳剂(lipid emulsions,LE)引起草鱼肝细胞脂肪变性的作用机理,以草鱼(Ctenopharyngodon idellus)正常肝细胞为研究对象,建立草鱼脂肪变性肝细胞模型,以含10%胎牛血清的基础培养液为对照组,处理组为含20%脂肪乳剂0.5~2 m L/L和含20%、50%胎牛血清的诱导培养液,孵育草鱼肝细胞48 h后,定量分析肝细胞内的甘油三酯(TG)含量,观察脂滴积聚情况及肝细胞超微结构的变化,检测细胞培养上清中谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)的活性,q RT-PCR技术检测脂代谢关键基因(PPAR?、PPAR?、SREBP-1c、LPL、Lep和UCP2)的转录水平变化,蛋白质印迹技术检测PPAR?、SREBP-1c的蛋白水平变化。结果发现,含1~2 m L/L LE的诱导液组和含20%、50%FBS的诱导液组与对照组相比TG含量均显著上升(P<0.05),且20%FBS和各浓度LE诱导组的转氨酶活性与对照组相比差异不显著(P>0.05),表明含1~2 m L/L LE的诱导液和含20%FBS的诱导液均可建立草鱼营养性脂肪肝细胞模型。在肝细胞脂变模型中,PPARγ和LPL等脂代谢基因的表达量显著升高(P<0.05),而Lep基因表达量显著降低(P<0.05),PPARγ和SREBP-1c的蛋白水平升高。结论认为:采用1~2 m L/L LE和20%的FBS均可以在短时间内建立草鱼肝细胞脂肪变性模型,含1 m L/L LE的诱导液诱导效果最佳;肝细胞内脂质的蓄积可能与脂肪代谢关键基因PPARγ、SREBP-1c、LPL及Lep等密切相关。  相似文献
5.
为了解淇河鲫甘露糖受体(mannose receptor, MR)的结构特点及其在抗感染免疫反应中的作用,实验通过同源克隆和RACE技术,获得了淇河鲫甘露糖受体(CaMR)全长cDNA,并采用实时荧光定量PCR(qPCR)技术研究了嗜水气单胞菌 感染对CaMR组织表达的影响。结果显示,CaMR cDNA全长4473 bp,5′非编码区81 bp,3′非编码区90 bp,编码一个由1433 aa组成的前体蛋白,其中前20 aa为信号肽。CaMR的氨基酸序列和分子结构与其他物种高度相似:胞外一个富含半胱氨酸的结构域(CRD)、一个纤连蛋白II型结构域(FNIID)及8个串连的C型凝集素样结构域(CTLDs),一个跨膜区和一个很短的胞内区。氨基酸同源性和进化分析显示,CaMR与草鱼、团头鲂、斑马鱼等鲤科鱼类的进化关系较近,与草鱼MR的同源性最高(82.4%)。通过qPCR检测到头肾、脾、心脏、肌肉等10种组织中均有表达,其中头肾表达量最高;嗜水气单胞菌感染后,头肾、脾和心脏MR基因的相对表达量均呈先升后降的趋势,而肠道则呈下降趋势,肌肉的表达量变化不显著。本研究为进一步揭示CaMR在免疫反应中的作用机制及其在淇河鲫疾病防治中的应用奠定了基础。  相似文献
6.
为了探讨饲料LNA/LA比对鲤幼鱼生长性能和LC-PUFA合成代谢的影响,本研究以鱼油和混合植物油(花生油和紫苏籽油)为脂肪源配制5组等氮等脂饲料.对照组(D1)以鱼油为唯一脂肪源,其他5组实验饲料以花生油和紫苏籽油为脂肪源,且LNA/LA比分别为0.02(D2)、0.46(D3)、1.09(D4)和1.53(D5).8周养殖实验后,分析各处理组鱼体的生长性能指标、肝脏脂肪酸组成,肝脏Δ6 fad-a/b和elovl5-a/b基因表达水平.结果显示,与对照组相比,植物油饲料对鱼体增重率(WGR)、特定生长率(SGR)和饲料系数(FCR)无显著影响,但显著影响了鱼体肝脏LC-PUFA水平,提高了肝脏Δ6fad-a和elovl5-a mRNA表达水平.在各植物油组之间,饲料LNA/LA比显著影响了鱼体WGR和SGR指标,其中D2和D4组鱼体生长表现较好;随着饲料中LNA/LA比的升高,鱼体肝脏LC-PUFA水平,以及Δ6fad-a和elovl5-a mRNA表达水平也随之增加,其中D4组鱼体肝脏Δ6fad-a和elovl5-a mRNA表达量最高,且其LC-PUFA含量显著高于D2和D3组.由此可见,植物油饲料尽管不影响鲤正常生长,但影响了鱼体肝组织LC-PUFA含量.然而,饲料中添加适宜的LNA/LA比(1.09:1)可促进鲤肝脏Δ6fad-a和elovl5-a mRNA的表达,最大限度地提高鱼体内源LC-PUFA合成量,从而有效地降低植物油饲料对鱼体组织LC-PUFA含量的负面影响.  相似文献
7.
MicroRNAs (miRNAs)是一类内生性的、进化上高度保守的单链成熟非编码RNA,长度约21~25个核苷酸,广泛存在植物、动物及微生物中[1-2],参与生物体的胚胎形成、个体生长发育、机体免疫、疾病防御以及繁殖和糖脂类代谢等生命过程[3-8].目前,基于生物信息学预测,miRNAs约占整个基因组的2%~3%[9].自Lee等[10]利用定位克隆法从秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)中克隆到第1个miRNA lin-4基因以来,目前在果蝇(Drosophila melanogaster)、人(Homo sapiens)、家鼠(Mus musculus)、鸡(Gallus domestiaus)、牛(Bovine)、斑马鱼(Danio rerio)以及植物的拟南芥(Arabidopsis thaliana)中均分离到了miRNAs.笔者就目前miRNAs在鱼类中的最新研究进展进行综述,以期为更多的了解其在鱼类中的作用提供基础资料.  相似文献
8.
过去认为 ,脂肪组织只是能量贮存的"仓库" ,在营养充足的情况下 ,过剩的能量以甘油三酯等形式贮存于脂肪组织中.然而 ,近年来研究发现 ,脂肪组织还能够分泌内分泌因子 ,参与机体多种生理过程 ,包括调节能量代谢与平衡、参与免疫反应和炎症反应等.因此 ,目前一致认为,脂肪组织还是一个功能活跃的内分泌器官[1-3 ] .由脂肪组织或脂肪细胞合成和分泌 ,持续释放到血液循环系统的蛋白质类内分泌因子 ,统称为脂肪因子或脂肪细胞因子.  相似文献
9.
为揭示淇河鲫(Carassius auratus var.Qihe)白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)的功能,本研究构建了原核表达系统,并制备了兔抗鲫IL-8多克隆抗体.首先采用RT-PCR法扩增淇河鲫IL-8基因编码序列中不含信号肽的基因片段,克隆到pET-32a(+)载体后转化入Rosetta菌株构建原核表达系统.经IPTG诱导表达出相对分子质量约27.8 kD的目标融合蛋白.将纯化的融合蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,效价达1:105.经免疫亲和层析纯化的抗体能特异性识别重组和天然的淇河鲫IL-8蛋白.比较不同组织的免疫组化和荧光定量PCR结果,IL-8蛋白量和mRNA的表达量在不同组织间变化趋势一致,在肌肉、脾和头肾均检测到较高的表达量,肠道的表达量较低.本研究为进一步探讨淇河鲫IL-8的生物学功能奠定了基础.  相似文献
10.
为探讨AdipoR1-B在鱼类糖类和脂质代谢中的作用,本实验采用RACE方法获得了草鱼AdipoR1-B的全长cDNA序列(登录号:KP733846),利用生物信息学技术对该基因及其所编码蛋白的结构特征进行了分析;采用实时定量PCR技术,检测了AdipoR1-B在19个不同组织中的表达特性以及高糖(45%)、高脂(8%)和高糖高脂饲喂对草鱼肝脏中该基因表达的影响.结果显示,草鱼AdipoR1-B cDNA全长2186bp,其中开放读码框为1122 bp,编码373个氨基酸;跨膜结构分析表明草鱼AdipoR1-B为典型的7次跨膜蛋白;同源性分析结果显示,草鱼AdipoR1-B与其他物种的AdipoR1-B高度同源(氨基酸相似度78%以上),并与斑马鱼AdipoR1-B的进化关系最近;组织分布结果显示,AdipoR1-B在草鱼肝脏中表达量最高,中枢神经系统和红肌次之;此外,高脂和高糖高脂饲喂均能够显著提高草鱼肝脏中AdipoR1-B的表达水平.因此,草鱼肝脏中AdipoR1-B的表达水平受到日粮中脂类水平的调控,推测该受体可能在调节鱼类脂质代谢中发挥重要作用.  相似文献
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