一起育苗场海带幼苗绿烂的病因分析

绿烂病是海带育苗期间常见的一种病害。2018年在山东一海带育苗场的调查中发现海带苗存在大面积绿烂现象。为了探析病害发生的原因，进行了育苗场水质分析、养殖模拟实验、褐藻酸降解菌分离鉴定和细菌回接感染，从环境因子和微生物相互作用角度进行了分析。水质分析结果显示，海带育苗池水的氮营养盐含量(30～35 mg·L^-1)比育苗规程高近10倍左右，磷营养盐含量(2.1～2.2 mg·L^-1)比海带育苗规程要求高5～6倍；养殖模拟实验显示，在10℃、光照2 000 ～ 4 000 lx、与育苗场近似的高营养盐浓度条件下，养殖的海带苗发生绿烂；从绿烂海带苗分离鉴定的附生优势菌属为Yangia和Glaciecola；回接感染实验结果显示，在氮磷浓度偏高情况下，细菌Glaciecola.DH-2-3可以引起海带苗发生绿烂，Yangia.SJ-H-12未引起海带苗发生绿烂。根据这些结果，判断此次海带幼苗病烂是由高营养盐引起。     

海洋细菌来源低温褐藻胶裂解酶的分泌表达和酶学性质研究

为了筛选稳定性较好的低温褐藻胶裂解酶,本研究进行了海洋细菌分离鉴定、酶的编码基因克隆与分析、酶分泌表达与纯化、不同因素对酶活力和稳定性的影响以及酶解产物分析实验。结果显示,用以褐藻胶为唯一碳源的平板,筛选出一株能分泌低温褐藻胶裂解酶的海洋细菌SJ-H-12,基于16S rDNA序列构建进化树,该菌株鉴定为Yangia sp. SJ-H-12。进而克隆酶的编码基因Alyya,ALYYA属于PL5家族褐藻胶裂解酶。将基因在食品级宿主解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)中进行分泌表达,重组ALYYA的活力达到34.2 U/mL,分子量约为39.0 kDa,具有较强的PolyM偏好性。ALYYA在25℃~35℃时表现出80%以上的活力,且在30℃时表现出最高活力;在pH为5.0~10.0的范围内稳定性较好,孵育后剩余超过60%的活力;0~2.0 mol/L的NaCl能明显激活ALYYA的活力。ALYYA降解褐藻胶的产物主要是二糖,另有少部分单糖和三糖,该酶是一种内切褐藻胶裂解酶。综上所述,本研究筛选到一株产低温褐藻胶裂解酶细菌,所产ALYYA是典型的低温褐藻胶裂解酶,具有优良的酶活力和稳定性。本研究为低温褐藻胶裂解酶的筛选和开发利用提供了参考数据。