鳜下丘脑神经元细胞培养

为了建立可行、高效的下丘脑神经元细胞技术,本研究通过分离鳜下丘脑组织,用Ⅰ型胶原酶将组织消化成单细胞悬液,并用完全培养液进行培养,在培养的第3、4、5和6天观察细胞的形态。结果显示,培养第3天时细胞贴壁量少,胞体小并且呈单个分布;在培养第4天,细胞的数量显著增多,且具有典型的神经元的形态,胞体饱满;第5天神经元胞体的融合度进一步增大,突起增长增粗,许多分支互相交错连接而形成密集的神经纤维网络;第6天细胞活性减弱,开始凋亡。使用CCK-8法检测细胞活性,结果显示,在培养第5天,细胞活性最高;采用荧光定量PCR(RT-PCR)法和免疫荧光鉴定法对神经元细胞进行鉴定,经RT-PCR检测发现,培养的下丘脑细胞可以表达神经元特异基因noggin,经免疫荧光鉴定,下丘脑神经元细胞纯度为95.9%。研究表明,通过此培养方法能够获得纯度较高的鳜下丘脑神经元细胞,为进一步在细胞水平研究鳜的摄食与能量代谢相关机理奠定基础。     

鱼类解偶联蛋白（UCP）基因研究新进展

通过生理性解偶联调节氧化磷酸化效率可能是进化早期发展起来的一种普遍策略,对生命的存在至关重要. 解偶联蛋白（uncoupling protein,UCP）家族是位于线粒体内膜的转运蛋白,哺乳动物基因组中已发现5个成员,其中UCP1~UCP3紧密相关,而UCP4和UCP5（即BMCP1,brain mitochondrial carrier protein-1）与它们差异较大. UCP1~UCP4不仅在哺乳类、鸟类等恒温脊椎动物中普遍存在,而且在鱼类等变温动物中也被证实存在,但UCP5目前仅在哺乳类中被发现. 哺乳动物褐色脂肪组织的UCP1,介导呼吸链产生的质子梯度泄漏,使氧化产生的能量以热的形式散发,但鱼类等变温动物UCP1的功能尚待进一步研究确立. UCP2和UCP3在产热、控制活性氧生成、脂肪酸氧化以及肥胖、糖尿病的发生中均发挥重要作用,二者的转录调节较复杂. UCP4和UCP5与其他UCP关系较远,UCP4仅在脑中表达,而UCP5在脑中高表达,它们的功能还不十分明确,但研究表明很可能与UCP2和UCP3的功能相似.     

温水鲈类食性驯化和营养饲料研究进展

温水鲈类是生活于热带及亚热带水域、分类上属鳕科或相近科的低等鲈类，多数种类为海水鱼类或广盐性鱼类，少数种类终生定居于淡水。狼鲈、黑鲈、尖吻鲈、花鲈、石斑鱼、鳜鱼等温水鲈类不仅具有很高的食用价值，而且由于它们外形优美、抢食凶猛，亦是十分重要的游钓对象。目前，世界上有关国家温水鲈类资源普遍呈下降趋势，     

鳜鱼驯食人工饲料原理与技术

鳜鱼驯食人工饲料原理与技术梁旭方（水利部、中国科学院水库渔业研究所，武汉４３００７３）鳜鱼是我国一种经济价值极高且很有发展前途的淡水养殖对象，由于它终生以活鱼虾为食，拒食人工饲料，因而限制了其养殖规模的发展。１９８９－１９９２年在刘建康研究员指导下，...     

3H-亮氨酸在幼草鱼肠道中的吸收积累作用

采用强行喂饲法将3H-亮氨酸喂饲到幼草鱼前肠,研究幼草鱼前肠、中肠和后肠对3H-亮氨酸的吸收积累情况.结果表明:草鱼前肠、中肠和后肠均能吸收3H-亮氨酸,其中前肠总吸收积累率最高,中肠次之,后肠最低.3H-亮氨酸在草鱼肠道中的吸收主要在前肠和中肠,以单位重量计算共占92%,后肠只占8%.如按肠道总重量计算,前肠和中肠的重量是后肠的7倍以上,则后肠吸收的3H-亮氨酸基本上可忽略不计,只占不到1%.     

肉食性水产动物营养需求和实用饲料（续二）

长吻鮠较易驯食人工配合饲料,但拒食或厌食不含鱼粉的精制饲料,在实验室环境中摄食用酪蛋白加进口鱼粉作蛋白源的半精制饲料生长良好。有关其营养需求已积累一定数量的研究资料,但质高价廉的长吻鮠实用配合饲料在全国范围尚未普遍使用。张泽芸等(1990,1991,1993)测定长吻鮠鱼种(60g)在25．3℃条件下每生产100g鱼每日营养需要量：     

草鱼肝细胞脂变模型的建立及脂代谢基因表达分析

为了筛选草鱼肝细胞脂肪变性的最佳诱导剂及浓度,并初步分析脂肪乳剂(lipid emulsions,LE)引起草鱼肝细胞脂肪变性的作用机理,以草鱼(Ctenopharyngodon idellus)正常肝细胞为研究对象,建立草鱼脂肪变性肝细胞模型,以含10%胎牛血清的基础培养液为对照组,处理组为含20%脂肪乳剂0.5~2 m L/L和含20%、50%胎牛血清的诱导培养液,孵育草鱼肝细胞48 h后,定量分析肝细胞内的甘油三酯(TG)含量,观察脂滴积聚情况及肝细胞超微结构的变化,检测细胞培养上清中谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)的活性,q RT-PCR技术检测脂代谢关键基因(PPAR?、PPAR?、SREBP-1c、LPL、Lep和UCP2)的转录水平变化,蛋白质印迹技术检测PPAR?、SREBP-1c的蛋白水平变化。结果发现,含1~2 m L/L LE的诱导液组和含20%、50%FBS的诱导液组与对照组相比TG含量均显著上升(P0.05),且20%FBS和各浓度LE诱导组的转氨酶活性与对照组相比差异不显著(P0.05),表明含1~2 m L/L LE的诱导液和含20%FBS的诱导液均可建立草鱼营养性脂肪肝细胞模型。在肝细胞脂变模型中,PPARγ和LPL等脂代谢基因的表达量显著升高(P0.05),而Lep基因表达量显著降低(P0.05),PPARγ和SREBP-1c的蛋白水平升高。结论认为:采用1~2 m L/L LE和20%的FBS均可以在短时间内建立草鱼肝细胞脂肪变性模型,含1 m L/L LE的诱导液诱导效果最佳;肝细胞内脂质的蓄积可能与脂肪代谢关键基因PPARγ、SREBP-1c、LPL及Lep等密切相关。     

MC与MG对尼罗罗非鱼和大口黑鲈游泳行为的影响

尼罗罗非鱼(Tilapia nilotica)和大口黑鲈(Micropterus salmoide)是中国主要的淡水经济鱼类,其养殖过程中常遇到微囊藻毒素(Microcystin,MC)与孔雀石绿(Malachite green,MG)的危害。MC和MG通过食物链在人体中富集,给人类的健康造成了严重的威胁。研究测定了人工饲养的尼罗罗非鱼和大口黑鲈在含有MC和MG的水体中的行为反应。结果表明,尼罗罗非鱼和大口黑鲈在0.2和0.5μg/L MC-LR的水体中处理60min内,其游泳行为相对于对照组无显著性差异,然而,在0.5mg/L MG的水体中处理30min后,尼罗罗非鱼胸鳍摆动频显著上升,大口黑鲈胸鳍摆动频率也在25、30、45min等3个不连续的时间点出现显著的变化。说明尼罗罗非鱼和大口黑鲈对天然毒素MC具有较强的抵抗能力,而对人工毒素MG较为敏感;胸鳍摆动频率可作为尼罗罗非鱼和大口黑鲈一个较为敏感的反映环境变化的行为指标。     

日本鳗鲡仔鱼摄食机理及其营养策略

鳗鲡属(Ａｎｇｕｉｌｌａ)鱼类共有19种和亚种,其中以欧洲鳗鲡(Ａ.ａｎｇｕｉｌｌａ)和日本鳗鲡(Ａ.ｊａｐｏｎｉｃａ)最为重要。鳗鲡属鱼类发育需经历奇特的柳叶状仔鱼(ｌｅｐｔｏｃｅｐｈａｌｕｓｌａｒｖａ)阶段,其人工育苗技术是一道世界难题。柳叶状仔鱼现象仅见于真骨鱼类最原始的一个类群海鲢总目Ｅｌｏｐｏｍｏｒｐｈａ(鳗鲡目Ａｎｇｕｉｌｌｉｆｏｒｍｅｓ,海鲢目Ｅｌｏｐｉｆｏｒｍｅｓ,背棘鱼目Ｎｏｔａｃａｎｔｈｉｆｏｒｍｅｓ)。有关柳叶状仔鱼的发育策略,已从形态学、生理学及生物化学等方面进行了不少研究,但柳叶状仔鱼…     

鳜胃蛋白酶基因外显子7上SNP检测及其与食性驯化相关分析

本研究旨在探寻胃蛋白酶(pepsinogen,PEP)基因的等位基因及其基因型在不同食性驯化表型鳜(Siniperca chuatsi)群体中的分布情况.通过2周食性驯化,挑选出最易驯化和最不易驯化的2组,提取各组鳜鳍条组织DNA,采用PCR产物直接测序法(direct sequencing,DS)、限制性片段长度多态...