Flg22诱导的海带（Saccharina japonica）孢子体防御反应的初步研究

以鞭毛蛋白N端一个保守的22个氨基酸多肽(flg22)为激发子,研究其诱导海带孢子体防御反应的特征,以丰富植物分子病理学理论.采用Evans blue染色方法发现,flg22诱导后2h内,未能观察到海带孢子体细胞死亡现象,诱导后4～10 h,观察到大量死亡的细胞.TUNEL(TdT-mediated dUTP-biotin nick and labeling)检测方法证实,受flg22诱导后海带孢子体有DNA断裂现象,而且3’-OH末端断裂的数量随诱导时间的延长而增多,并有从诱导部位向外扩散的趋势.运用Luminol荧光检测方法检测到受flg22诱导后海带孢子体H2O2释放量迅速增加,至3h时达到峰值,约为20 μmol/L.应用荧光染料2’,7’-二氢二氯荧光黄双乙酸钠(DCFH-DA)进行ROS组织学检测,发现flg22诱导后1h即观察到绿色的荧光信号,信号强度随诱导时间的延长而增加,诱导后3h信号最强,随后绿色荧光信号的强度逐渐减弱.ROS的产生趋势与Luminol荧光检测方法的结果相一致.结果表明,flg22也是诱导海带孢子体防御反应的有效激发子.