B—单型特异血清型对马立克氏病疫苗免疫效果的影响

以前的研究表明，Ｂ－单型地抵抗超强毒马立克病病毒攻击的效果依所使用的马立克氏病疫苗的种类不同而不同。为了测定同一血清型ＭＤ疫苗接种同一单型鸡后用ＭＤＭｄ５强毒攻击是否产生相似的保护性。     

RT-PCR及RFLP分析技术对鸡传染性支气管炎病毒的诊断和S1基因分型的研究

本研究使用分别扩增整个S1糖蛋白基因 (引物A)和S1糖蛋白基因N_端高变区Ⅰ (引物B)的 2对引物对 3个IBV标准株M41、Connecticut、Arkansas及 5个地方分离株 (C60 ,D41A ,D41B ,A112 1,A1171)进行RT_PCR扩增。用引物A时 ,有 5个IBV毒株扩增到目的片段 (172 0bp) ;用引物B时 ,所有 8个IBV毒株均得到与预计大小相符的目的产物 (2 2 8bp)。对 172 0bp的PCR产物用限制性内切酶HaeⅢ进行酶切 ,结果得出 3个不同的RFLP图谱 ,其中M41、Connecticut、D41B具有相同的HaeⅢ酶切图谱。Arkansas和D41A则分别具有互不相同的图谱 ;对 2 2 8bp的PCR产物进行DdeⅠ、RsaⅠ限制性内切酶消化 ,根据它们的RFLP图谱 ,8个IBV毒株可分为 5个基因型。综合 2对引物的PCR产物的RFLP分析结果 ,8个IBV毒株可分为 7个基因型 ,分型的结果与传统的血清学方法吻合。本研究建立的方法和技术具有快速、简单、特异、灵敏等优点 ,为现场流行毒株的定型(基因型 /血清型 )及其S1基因变异的跟踪研究以及更有效防制传染性支气管炎奠定了基础。     

多功能高效节能灶的设计与应用

生境的丧失被认为是目前大多数正濒于灭绝的脊椎动物所遭受的基本威胁[1],采伐则是对大熊猫栖息地的主要威胁.由于森林被大量采伐,使大熊猫生境片段化或丧失,栖息地面积缩小[2].砍伐薪柴是白水江自然保护区面临的仅次于盗伐林木的主要威胁因素之一.长期以来,保护区居民形成了靠山吃山的思想,随着社区人口的增多,对薪材的需求量不断增大.     

水稻特异株型材料7N5改良系R456配组的3个新组合在不同生态地区的表现

应用水稻特异株型材料7N5改良系R456与不同质源的两系不育系和三系不育系进行配组，调查杂交组合的结实率及产量，结果表明：7N5改良系R456分别与两系不育系和三系不育系配组都具有较高的恢复力和配合力，其配组的3个新杂交组合在不同地区有不同的产量表现。     

香蕉ACC氧化酶基因(MAO3)的克隆及其表达特性分析

 根据同源扩增得到香蕉(Musa acuminata) ACC氧化酶基因(MAO3) 的核心部分, 再通过3'和5'RACE扩增上、下游序列以及Genome-Walker的方法得到启动子部分, 共获得3 718 bp长度的序列。将所得结果进行聚类分析, 发现香蕉中ACC氧化酶的氨基酸序列非常保守, 各序列间的同一性高达99% ,与单子叶植物和双子叶植物中ACC氧化酶的氨基酸序列的同源性在66.7%～71.8%之间。组织原位杂交试验表明MAO3基因的表达具有组织特异性, 初步认为是在韧皮部筛管组织中特异表达。运用实时荧光定量PCR技术, 实时监测到了MAO3基因和香蕉乙烯受体基因ERS2受机械伤诱导的定量变化。     

猪弓形虫病特异PCR诊断方法的建立

以核糖体DNA第一内转录间隔区(ITS1)序列作为弓形虫种特异的遗传标记．建立了猪弓形虫病特异PCR诊断方法。应用人工感染的方法建立了猪弓形虫病动物模型．摸索出猪弓形虫病PCR检测的最佳条件。敏感性和特异性试验结果显示，该PCR方法最低能检测到10个弓形虫速殖子的DNA，且与相关的8种原虫和线虫均无交叉反应，证明该PCR方法具有高度的敏感性和特异性。动物感染试验结果证明．在试验猪出现明显临床症状时(感染后第5d)．对取材的8个组织样品用该PCR方法检测，有6个组织样品为阳性，其中检出率最高的组织为肺门淋巴结。     

大蚕、蛹组织切片核酸特异染色技术的探讨

本文对大蚕、蛹的石蜡切片制作及其核酸特异染色方法进行探讨，针对虫体大和蛹体壁高度丁质化特点，对组织固定，脱水、透明、透蜡的时间相应的增加和固定前蛹皮剪开，在截位时要考虑切片段两头保留一段仅用来起保护作用的部分，并采用了二种核酸特异染色方法染色。结果表明：制片设计方案基本可行，部分细节需进一步改进；甲基绿-派罗宁（昂纳-帕彭海姆）染色法的切片组织颜色层次分明，DNA含量丰富的丝腺组织呈紫黑色，其它组织的DNA呈紫红色，RNA呈淡红色，改良的甲基绿一派罗宁染色法的切片组织颜色偏淡；孚尔根染色法的切片组织颜色层次分明，核酸呈紫红色，其它无色，能较好的以颜色的深浅来判断核酸的丰度。更理想的染色方案还有待进一步摸索。     

25s rRNA 基因部分序列比较在香菇栽培菌种鉴定上的应用

对目前中国7个主要香菇栽培品种：科，26，939，135，9311，申10和7402和25s rRNA基因中的D1／D2片段进行了DNA序列测定，根据DNA序列测定结果对它们之间的同源性进行了分析。结果表明，所测定的7个香菇栽培品种之间的亲缘关系非常近，同源性很高。通过聚类分析，根据香菇之间的亲缘关系，可以将这7个品种分为2类，即苏香，939和9311为一类，26，申10，135和7402为一类。     

棉花黄萎病菌致病型的AFLP分析

 选用41个棉花黄萎病菌(Verticillium dahliae)代表菌系,在温室条件下,对4个棉花品种鄂荆1号(感)、中棉所12(耐)、文-5(抗)和唐棉2号(抗)进行致病性测定,结果可将供试菌系分为落叶型与非落叶型2类。选取8对AFLP引物PCR扩增的结果中,统计带型稳定、清晰且有多态性的条带,共169条作系统聚类分析,将上述菌系分为2大类,第一类为非落叶型菌系,包括10个非落叶型菌系和1个过渡菌系;第二类为30个落叶型菌系。根据聚类分析建立树状图,发现菌系与地理来源存在一定的相关性,而依据菌系致病力强弱分类则相关关系不大。选用25对EcoRⅠ和MseⅠ引物组合,对供试的41个V.dahliae进行AFLP扩增,筛选到2对引物E64(GACTGCGTACCAATTCGAC)、M53(GATGAGTCCTGAGTAACCG)和E49(GACTGCGTACCAATTCCAG)、M65(GAT-GAGTCCTGAGTAAGAG),能分别扩增出433bp和110bp2条仅为V.dahliae非落叶型菌系独有的特异片段,可将落叶型与非落叶型菌系分开,这2条特异片段被命名为EM₄₃₃和EM₁₁₀。