适用于转录组测序的大麦胚芽鞘保卫细胞分离方法优化

为获取高质量的大麦幼苗胚芽鞘保卫细胞以进行转录组相关研究,以大麦品种Morex的幼苗胚芽鞘为实验材料,分别对胚芽鞘表皮条撕取方法和保卫细胞分离方法进行优化。结果表明,通过"刮压"技术,不仅可以获得完整的大麦胚芽鞘表皮条,而且缩短了获取的时间;利用纤维素酶R-10与离析酶R-10制备酶解液,同时在酶解液中加入转录抑制剂,并结合表皮条"穿孔"进行辅助酶解,发现酶解温度为30℃、酶解时间为水浴1.5 h时,可以获取大量具有活性的大麦胚芽鞘保卫细胞。     

铅胁迫对向日葵幼苗矿质元素吸收及蛋白二级结构的影响

为探究向日葵对重金属胁迫在生理及蛋白结构上的响应机制，试验以‘2603’‘HA89’‘HA300’3种向日葵品种的三叶一心期幼苗为材料，设置5组不同质量浓度梯度铅胁迫（0、200、400、600、800 mg·L^-1），测定幼苗对6种矿质元素（Mg、Cu、Ca、Zn、Fe、K）吸收的变化及向日葵幼苗蛋白二级结构的变化，结果表明：随着铅胁迫浓度的增加，品种‘2603’对矿质元素的吸收增加、蛋白二级结构中无序结构增加，结构趋于松散，品种‘HA89’对矿质元素吸收受到抑制、蛋白二级结构中有序结构增加，结构趋于稳定，同时向日葵幼苗在铅胁迫下对矿质元素的吸收与蛋白二级结构的稳定性存在负相关关系，最显著为Ca元素与α-螺旋相关性为 -0.9、与β-转角相关性为0.95，这表明向日葵幼苗对铅胁迫的抵御机制在生理及蛋白结构上具有一致性。此研究可为进一步探索向日葵抗重金属胁迫提供理论依据，同时为后续挖掘向日葵对重金属的防御机制研究及探明植物抗重金属胁迫机理研究提供理论依据。     

大麦气孔发育相关基因HvSPCH的克隆及初步功能分析

气孔是植物与外界进行气体交换的通道,对植物的生长发育至关重要。SPCH转录因子与气孔的发育关系密切,为揭示其在大麦中的功能,以大麦G1614为材料,利用PCR方法克隆大麦SPCH（HvSPCH）基因后,进行生物信息学分析,并对该基因在干旱胁迫条件下的表达模式进行分析。结果表明,HvSPCH基因编码区长为1 098 bp,可编码365个氨基酸,相对分子量为90 504.73 Da,理论等电点为4.96,为疏水的、不稳定的碱性蛋白质。氨基酸序列分析表明,HvSPCH蛋白的氨基酸序列不含有跨膜结构域和信号肽,含有40个磷酸化位点和27个糖基化位点。二级结构分析表明,HvSPCH蛋白包含35.62%的α-螺旋、8.77%的延长链、2.47%的β-转角和53.13%的无规则卷曲。系统进化分析表明,大麦HvSPCH蛋白与水稻、野生二粒小麦、二穗短柄草的SPCH蛋白亲缘关系较近。qRT-PCR分析结果表明,干旱处理4 h和12 h时,HvSPCH基因的相对表达量显著升高,说明其有可能参与大麦的干旱逆境响应过程。     

响应面法优化混合益生菌发酵银杏叶药渣工艺条件的研究

本试验旨在优化银杏叶药渣的发酵条件，为银杏叶中物质的综合利用提供参考。以银杏酸降解率、黄酮含量变化率为考察对象，在料液比、接种量、发酵温度的单因素试验结果的基础上，采用Box-Behnken 原理设计响应面试验，对银杏叶药渣发酵中的料液比、 混合益生菌接种量、发酵时间等进行优化，确定最佳发酵条件，并对指标进行预测。结论表明：在料液比 0.13 g/mL，接种量3.5 g/mL，发酵时间15 h条件下，发酵后的银杏酸降解率为35.03%，黄酮含量变化率为 140.7%，理论值分别为34.69%、 141.8%，相对误差绝对值均小于0.01，说明该模型具有一定的可行性，可作为银杏叶中物质综合利用和研究开发的依据。 [关键词] 银杏叶药渣|响应面法|混合益生菌|发酵|降解率