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1.
2.
通过PCR方法自含NDVZF基因的克隆质粒中扩增NDVF基因 ,将其与真核表达载体pcDNA3..1/V5_His_TOPO重组。经核酸内切酶酶切 ,阳性克隆鉴定准确无误 ,核酸序列测定结果与原始基因比较 ,同源性大于 99% ,启始密码和终止密码未出现变异 ,将该重组质粒命名为pcDNANDVZF。将pcDNANDVZF在脂质体作用下转染CEF细胞 ,用间接免疫荧光试验检测 ,结果证明pcDNANDVZF可在CEF细胞中大量表达F蛋白。 相似文献
3.
硒蛋白的基因表达与调控 总被引:1,自引:0,他引:1
硒蛋白是微量元素硒以硒代半胱氯酸(SeC)形式进入多肽链的蛋白质。SeC的遗传密码是UGA。在原核细胞中,4种基因产物SELA、SELB、SELC和SELD参与了硒蛋白的合成过程。真核生物硒蛋白mRNA3’-UTR的硒代半胱氨酸插入序列(SECIS)是真核细胞UGA密码编码SeC的顺式作用元件。动物的硒营养状态不影响硒蛋白基因的转录,但影响硒蛋白mRNA的稳定性。饲料硒水平与含硒酶活性呈正相关。 相似文献
4.
从BL21(DE3)E.coli菌株中以PCR的方法扩增得到了与T7RNA多聚酶(T7RNApolymerase,T7pol)基因大小一致的DNA片断。将PCR产物纯化后直接克隆到pGEM—T载体中,经酶切鉴定和DNA序列分析表明克隆得到了正确的T7pol基因。将T7pol基因亚克隆入pET-28b( )中,构建得到原核表达质粒pET28T7。该质粒的BL21(DE3)pLysS转化菌在IPTG的诱导下可表达约98800的蛋白,这与T7pol的相对分子质量一致。将该质粒转化DH5α、JMl09、HBl01、BL21(DE3)和BL21(DE3)pLysS等5种不同的宿主菌,仅有转化T7pol酶活性受到抑制的宿主菌BL21(DE3)pLysS才能得到转化子,而其余4种T7T7pol酶活性不受抑制的E.coli宿主菌不能得到转化子。pET28T7原核表达质粒这种仅能在T7pol酶活性受到抑制的宿主菌中才能存活的现象说明本试验所克隆的T7pol基因能正确表达出具有RNA转录酶活性的蛋白。 相似文献
5.
研究目的在于探讨多巴胺受体激动剂(溴隐停)对地方良种肉鸡繁殖性能的影响。方法从628只28周龄健康的“惠州麻”黄羽肉种鸡群中随机选取1组鸡笼内的40鸡作为实验组,其余的作为对照组。实验组鸡群喂服溴隐停,每只鸡每天1.25mg,连用4d,停用4d后再用4d,对照组不使用。结果在4周的实验期内实验组和对照组的产蛋率分别为83.86%和69.96%;破蛋率分别为1.28%和1.69%,畸形蛋率分别为4.33%和1.19%;实验组平均每只鸡的产蛋总数比对照组多3.89个、合格种蛋数多3.26个;药物处理对平均蛋重无显著影响;使用溴隐停能够提高鸡血液中的雌激素水平。结论溴隐停能够通过抑制地方良种肉鸡体内促乳素的合成与分泌,减少抱窝现象的发生,提高其繁殖性能。 相似文献
6.
家蚕蛹在复眼着色期,经4℃冷藏24小时后,可被Ac NPV(苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒)感染。在蛹体内复制出的多角体大小差异较大,且比在昆虫Sf—21细胞中繁殖的Ac NPV和在蚕蛹体内形成的Bm NPV多角体小。在蛹体内繁殖的Ac NPV的游离病毒可以回返感染Sf—21细胞。由蚕蛹内分离的Ac NPV基因组DNA的限制性内切酶图谱与野生型的Ac NPV相同。以上结果证明Ac NPV可以在蚕蛹体内复制。含HBsAg基因(人乙肝表面抗原)的重组Ac NPV亦可感染家蚕蛹,并能正确表达外源基因。此外,还发现化蛹后第2天的家蚕蛹被注射约5×10~5PFU的Ac NPV,可诱导“人工滞育蛹”现象的发生,在25℃经过30天后蛹仍存活,发育停滞在复眼着色前阶段。 相似文献
7.
The effect of true milk use in the diet of Spanish Brown Swiss male calves on animal performance, carcass and meat quality, and fatty acids composition was studied. In experiment 1, the effect of milk intake [ad libitum continuous (ADLIB) feed vs. restricted 0.7 during 75 days followed by ad libitum feed (RESTR)] and slaughter endpoint (225 kg vs. 5 month) were studied. In experiment 2, ad libitum concentrate feeding [grain-fed (GF)] was compared with milk supplementation until slaughter [milk-fed (MF)] in calves slaughtered at 345 kg. As regards to milk intake, carcass weight and degree of fatness were higher in the ADLIB group (P<0.05). The RESTR group revealed a higher percentage of saturated fatty acids (P<0.05). In experiment 2, the MF group exhibited a higher fat percentage (P<0.05), lower press and cooking losses (P<0.05), and higher scores for tenderness and juiciness (P<0.05) than the GF group. The percentage of saturated fatty acids was higher in the MF group (P<0.05). The results suggest that true milk use in veal production could be an advantageous alternative in terms on production costs, animal performance, and carcass and meat quality. 相似文献
8.
9.
10.
AIM: To further investigate the role of PKARⅠβ in the growth-promoting effects of shuang long Jiegu pill (SLJGP), a Chinese medicine, on cultured osteoblasts. METHODS: pcDNA- antiPKARⅠβ, a recombinant expressing the antisense sequence of PKARⅠβ, was constructed and transformed HFOB1.19 by lipofectin. MTT was undertaken to assess the cell growth with the treatment of high dosage of SLJGP containing serum. RESULTS: Antisense gene blocked the growth-promoting effects of SLJGP containing serum on HFOB1.19. CONCLUSION: The function of SLJGP is closely related to cAMP-dependent protein kinase A. 相似文献