解淀粉芽孢杆菌SJ06脂肽粗提物与吡唑醚菌酯协同对玉米小斑病菌的抑制效果

运用对峙培养法测定解淀粉芽孢杆菌SJ06菌株对玉米小斑病菌的拮抗活性;采用菌丝生长速率法测定发酵上清液、脂肽粗提物对玉米小斑病菌的抑菌活性,以及SJ06脂肽粗提物与吡唑醚菌酯复配的协同抑菌活性。结果表明:对峙培养SJ06对玉米小斑病菌的抑制率为71.43%;SJ06发酵上清液和脂肽粗提物对病菌的EC_(50)值分别为0.88μL/mL和0.23μL/mL,吡唑醚菌酯对病菌的EC_(50)值为1.10μg/m L;SJ06脂肽粗提物与吡唑醚菌酯复配对玉米小斑病菌的毒性比均大于1,说明复配对病菌的抑制效果均为增效作用,其中,复配体积比为4∶6时毒性比为1.21,增效作用最强。     

苹果轮纹病菌对吡唑醚菌酯的敏感性及Cytb基因序列分析

为了明确苹果轮纹病菌Botryosphaeria dothidea对吡唑醚菌酯的敏感性和吡唑醚菌酯的靶标基因序列, 采用菌丝生长速率法测定了水杨肟酸对B. dothidea 菌丝生长的作用, 探讨了添加或不添加水杨肟酸的情况下病原菌对吡唑醚菌酯敏感性的变化; 并测定了不同产区的80株B. dothidea 对吡唑醚菌酯的敏感性以及440株B. dothidea 对吡唑醚菌酯的抗性; 然后, 扩增并分析了具有不同敏感性的菌株的细胞色素b基因 (Cytb) 序列?结果表明:不同浓度水杨肟酸对菌丝生长的抑制作用不同?添加40 μg/mL水杨肟酸不影响吡唑醚菌酯的EC50?菌株的敏感性频率符合近似正态分布, 各产区菌株对吡唑醚菌酯的敏感性没有显著差异, 吡唑醚菌酯平均EC50为(2.95±2.11) μg/mL, 没有检测到抗性菌株?靶标基因序列分析表明, Cytb基因在F129?G137和G143位密码子上没有产生点突变, 首次发现在143位密码子后有内含子插入?     

吡唑醚菌酯/二氧化硅微球的释放行为与生物活性评价

为了对二氧化硅载药体系进行评价，以吡唑醚菌酯为模式农药，利用其与正硅酸乙酯在碱性条件下的水解缩合反应，以十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)为模板剂，制备了吡唑醚菌酯/二氧化硅微球。通过扫描电子显微镜、Nicolet iS5傅里叶变换红外光谱及高效液相色谱等表征了微球的表面形态和化学结构，测定了其在水中的光解速率；并采用透析袋法探讨了该微球在不同pH值和不同温度下的缓释行为，通过菌丝生长速率法测定了该微球对稻瘟病菌的毒力，评价了其生物活性。结果表明:所制备的吡唑醚菌酯/二氧化硅微球外观形貌较为规整，粒径在0.998~1.428 μm之间，其最大载药量可达50.73%。该微球在碱性条件下的释药速率快于酸性条件下，且其释放均符合一级反应动力学方程，在中性条件下其释药符合Ritger-Peppas方程；与pH值相比，温度对其释药速率的影响较小。给药后第5天，所制备吡唑醚菌酯/二氧化硅微球的毒力与原药相近，给药后第9天，其毒力是原药的11.7倍，缓释效果显著。该吡唑醚菌酯/二氧化硅微球在紫外灯照射10 h后光解率为38.98%，明显低于吡唑醚菌酯原药的光解率(68.92%)。     

25%吡唑·毒氟磷悬浮剂高效液相色谱分析方法研究

采用高效液相色谱法,以甲醇+水溶液为流动相、250mm×4.6mm(id)Agilent C_(18)色谱柱和紫外检测器,在250nm波长、柱温30℃和进样体积5μL条件下,对毒氟磷和吡唑醚菌酯进行定量分析。结果表明,毒氟磷的紫外吸收标准曲线方程为v=6 166 587.557 1x+79 698.995 7、吡唑醚菌酯的紫外吸收标准曲线方程为v=2 476 571.638 9x+26 998.154 9:毒氟磷和吡唑醚菌酯标准方程的线性相关系数分别为0.999 8和0.999 9,有效成分的平均值为20.41%和5.34%,标准偏差为0.09和0.03,变异系数为0.46%和0.55%,平均回收率为99.91%和100.21%。     

38%唑醚·啶酰菌悬浮剂在草莓和土壤中的残留及消解动态

为评价38%唑醚·啶酰菌悬浮剂 (有效成分质量分数:12.8%吡唑醚菌酯，25.2%啶酰菌胺) 在农产品和环境中的安全性，于2015年和2016年在中国北京及山东分别进行了该药剂在草莓及土壤中的残留及消解动态试验，建立了同时测定草莓及土壤中吡唑醚菌酯和啶酰菌胺残留量的高效液相色谱-串联质谱 (HPLC-MS/MS) 检测方法。样品用乙腈提取，经N-丙基乙二胺 (PSA) 净化，电喷雾多反应监测模式HPLC-MS/MS检测，基质匹配标准曲线外标法定量。结果表明:在草莓和土壤中添加0.015~3.0 mg/kg吡唑醚菌酯，平均回收率分别为97%~107%和94%~106%，相对标准偏差 (RSD) 分别为1.8%~3.9%和2.2%~4.1%，定量限 (LOQ) 为0.015 mg/kg；添加0.03~6.0 mg/kg啶酰菌胺，平均回收率分别为90%~101%和92%~97%，RSD为4.6%~13%和2.9%~14%，LOQ为0.03 mg/kg。田间试验结果表明，吡唑醚菌酯和啶酰菌胺在草莓和土壤中的消解动态均符合一级动力学方程，在草莓中的半衰期分别为4.8~6.0 d和5.1~11 d，在土壤中为3.4~10.0和3.4~6.0 d。采用38% 唑醚·啶酰菌悬浮剂，分别按有效成分228和342 g/hm2于草莓幼果期施药，最多施药 4 次，采样时间距离最后一次施药的间隔时间为3、5、7 d。吡唑醚菌酯在草莓中的最大残留量为 0.13 mg/kg，低于欧盟规定的最大残留限量 (MRL)(0.5 mg/kg)；啶酰菌胺在草莓中的最大残留量为 0.78 mg/kg，低于中国的 MRL值 (3.0 mg/kg)。建议38%唑醚·啶酰菌悬浮剂在草莓上的安全间隔期为3 d，试验结果为农药在草莓中的安全使用和农产品的食用安全提供了数据支持。     

氟吡菌酰胺和吡唑醚菌酯在葡萄上的残留及膳食风险评估

为明确氟吡菌酰胺和吡唑醚菌酯在葡萄上的残留风险,开展了一年十地的规范残留试验,建立了高效液相色谱法（HPLC）测定葡萄中氟吡菌酰胺和吡唑醚菌酯残留的分析方法。结果表明,在0.1~20.0 mg·L^-1范围内,氟吡菌酰胺和吡唑醚菌酯质量浓度与其峰面积均呈良好的线性关系,相关系数大于0.99。在0.05、0.50 mg·kg^-1和2.00 mg·kg^-1添加水平下,氟吡菌酰胺和吡唑醚菌酯在葡萄中的平均回收率分别为 88.1%~112.3%和 90.5%~101.5%,相对标准偏差（RSD）分别为 3.1%~8.2%和 3.5%~9.1%,检测方法定量限（LOQ）均为0.05 mg·kg^-1。采收间隔期为14 d,时葡萄中氟吡菌酰胺和吡唑醚菌酯的残留中值（STMR）分别为0.16 mg·kg^-1和 0.12 mg·kg^-1,最高残留值（HR）分别为1.44 mg·kg^-1和1.48 mg·kg^-1。葡萄中氟吡菌酰胺和吡唑醚菌酯对一般人群的长期膳食摄入风险的贡献率分别为0.142%和0.036%,短期膳食摄入风险商分别为7.8%和5.7%,对1~6岁儿童的短期膳食摄入风险商分别为19.6%和14.4%。研究表明,按照推荐剂量规范使用,氟吡菌酰胺和吡唑醚菌酯在葡萄中的残留量对1~6岁儿童和一般人群造成的健康风险处于安全水平。     

乙嘧酚磺酸酯·吡唑醚菌酯30%微乳剂高效液相色谱分析方法

本方法采用高效液相色谱法,以甲醇-水溶液作为流动相,用HyPersil BDS C18250mm×4.6mm.10μm柱和紫外检测器,分析乙嘧酚磺酸酯.吡唑醚菌酯30%微乳剂。结果表明:乙嘧酚磺酸酯,吡唑醚菌酯的标准偏差分别为:0.13和0.16;变异系数分别为:0.36%和0.39%;平均回收率分别为:99.1%和99.2%。     

葡萄和土壤中吡唑醚菌酯的高效液相色谱残留分析方法

建立了测定葡萄及土壤中吡唑醚菌酯残留的液相色谱检测方法。样品以二氯甲烷提取和固相萃取柱（SPEC18柱）萃取净化，反向高效液相色谱法测定，乙腈和水（70＋30）为流动相，C18色谱柱分离，278nm紫外定量检测吡唑醚菌酯。该方法吡唑醚菌酯的最小检出量为2×10^-10g，线性相关系数为0．9986，葡萄及土壤加标回收率分别为80．4％-94．1％、81．8％。98．4％．相对标准偏差（RSD）分别为1．8％～3．8％、2．6％-3．0％。方法具有简便、快捷。准确的特点，适合葡萄及土壤中吡唑醚菌酯残留量的测定。     

Resistance to pyraclostrobin, boscalid and multiple resistance to Pristine® (pyraclostrobin + boscalid) fungicide in Alternaria alternata causing alternaria late blight of pistachios in California

Pristine® (pyraclostrobin + boscalid) is a fungicide registered for the control of alternaria late blight in pistachio. A total of 95 isolates of Alternaria alternata collected from orchards with and without a prior history of Pristine® sprays were tested for their sensitivity towards pyraclostrobin, boscalid and Pristine® in conidial germination assays. The EC₅₀ values for 35 isolates from orchards without Pristine® sprays ranged from 0·09 to 3·14 µg mL^?1 and < 0·01 to 2·04 µg mL^?1 for boscalid and Pristine®, respectively. For pyraclostrobin, 27 isolates had EC₅₀ < 0·01 µg mL^?1 and six had low resistance (mean EC₅₀ value = 4·71 µg mL^?1). Only one isolate was resistant to all three fungicides tested, with EC₅₀ > 100 µg mL^?1. Among 59 isolates from the orchard with a history of Pristine® sprays, 56 were resistant to pyraclostrobin; only two were sensitive (EC₅₀ < 0·01 µg mL^?1) and one was weakly resistant (EC₅₀ = 10 µg mL^?1). For the majority of these isolates EC₅₀ values ranged from 0·06 to 4·22 µg mL^?1 for boscalid and from 0·22 to 7·74 µg mL^?1 for Pristine®. However, seven isolates resistant to pyraclostrobin were also highly resistant to boscalid and Pristine® and remained pathogenic on pistachio treated with Pristine®. Whereas strobilurin resistance is a common occurrence in Alternaria of pistachio, this is the first report of resistance to boscalid in field isolates of phytopathogenic fungi. No cross resistance between pyraclostrobin and boscalid was detected, suggesting that Pristine® resistance appears as a case of multiple resistance.     

吡唑醚菌酯在水环境中的光解及微囊化对其光稳定性的影响

以紫外灯为光源,研究了吡唑醚菌酯在水环境中光化学降解及微囊化对其光稳定性的影响。结果表明:在紫外光下,吡唑醚菌酯在0.80~10.00 mg·L^-1浓度范围内的光解符合一级动力学方程,光解速率与初始浓度呈负相关;吡唑醚菌酯在不同水溶液中的光解速率由大到小依次为去离子水、自来水、池塘水、饮用纯净水和河水;在H₂O₂ 0.03~7.94 mmol·L^-1内,光解速率随着H₂O₂浓度的增大而增大,在7.94 mmol·L^-1时是吡唑醚菌酯单独光解的1.14倍。20%吡唑醚菌酯微囊悬浮剂在2.00、4.00、10.00 mg·L^-1浓度下,紫外光照射132 h的光解率低于57.90%,表明微囊化明显降低了吡唑醚菌酯在水中的光降解速率。研究结果将为吡唑醚菌酯的合理使用和评估其在水体中的安全风险提供依据。