瓜蒌皮粗多糖提取方法与膜分离纯化条件的筛选

为获得含量和纯度较高的瓜蒌皮多糖,保证其生物活性,采用UF-100膜分离法对瓜蒌皮粗多糖进行分离纯化,比较不同操作压力、料液温度和运行时间下超滤膜和纳滤膜对多糖渗透通量的影响,测定瓜蒌皮多糖各截留液总糖含量,并与水提醇沉法进行比较。结果表明:超滤膜在操作压力0.14 Mpa,溶液温度25℃,每次过膜时间不超过2h的多糖膜通量最大,为88.5L/(m2·h);纳滤膜在操作压力0.4 Mpa,溶液温度25℃,每次过膜时间不超过2h的多糖膜通量最大,为7.1L/(m2·h)。该条件下,测得UF-100,UF-50、UF-10、UF-5、NF-800、NF-400、NF-200和NF-200以下8个膜段的瓜蒌皮总糖含量分别为13.52%、8.75%、13.06%、5.61%、5.29%、4.91%、4.88%和4.59%。UF-100膜分离和水提醇沉的瓜蒌皮多糖得率分别为10.06%和7.81%,膜分离瓜蒌皮多糖的得率较高。各截留段中,相对分子质量在1万以上的总糖含量较高,相对分子质量在5 000以下的总糖含量较低。     

瓜蒌皮多酚纯化工艺及抗氧化活性

以瓜蒌皮为研究对象,采用大孔吸附树脂法纯化瓜蒌皮中的多酚类化合物,对纯化工艺参数进行筛选,对纯化产物的抗氧化活性进行检测。结果表明:AB–8大孔吸附树脂对瓜蒌皮多酚具有良好的吸附和解吸性能,最佳吸附工艺参数为提取液中多酚质量浓度0.60 mg/mL,料液pH值3.0,上样流速2 BV/h,上样体积4 BV;最佳洗脱工艺参数为洗脱液乙醇的体积分数60%,体积6 BV,洗脱流速2 BV/h;纯化后产品中多酚的含量达49.52%,较纯化前提高57倍;瓜蒌皮多酚纯化前后对DPPH+自由基清除作用的IC50分别为2.01mg/mL和0.53mg/mL,对ABTS+自由基清除作用的IC50分别为0.62 mg/mL和0.13 mg/mL,纯化后抗氧化活性增强了4～5倍。     

阜宁瓜蒌新品种引进筛选试验

为筛选出适合阜宁地区种植的高产、抗流胶病和炭疽病的瓜蒌优良品种,从安徽引进5个瓜蒌新品种,主要从瓜蒌籽、产量、品质、抗病性等方面对5个瓜蒌品种进行比较试验,试验结果表明,皖蒌17号、皖蒌7-8、皖蒌9号的综合表现较好,适合在阜宁地区推广种植。     

石榴皮水提物对猪源多重耐药大肠杆菌的抑菌作用研究

【目的】筛选腹泻仔猪中携毒力基因且多重耐药的大肠杆菌菌株,评估中药水提物对该菌株的抑菌活性,并探索中药抑菌机制。【方法】通过PCR方法与Kirby-Bauer （K-B）药敏纸片法评估临床大肠杆菌菌株的肠毒素基因携带情况和耐药性;通过微量肉汤稀释法评估中药水提物对多重耐药大肠杆菌菌株的抑菌活性,确定最小抑菌浓度（minimal inhibitory concentration,MIC）和最小杀菌浓度（minimal bactericidal concentration,MBC）;通过电导率仪以及相关试剂盒检测评估石榴皮水提物对多重耐药菌株作用不同时间后菌液电导率、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,AKP）含量及菌体内ATP含量的变化;通过SDS-PAGE和蛋白含量检测评估菌体内可溶性蛋白的含量变化;通过扫描电镜观察大肠杆菌形态变化。【结果】PCR检测14株临床大肠杆菌中肠毒素基因携带率达到78.57%,抗生素药敏试验结果显示,所有菌株至少对2种抗生素耐药,均属于多重耐药菌株。中药药敏试验结果显示,黄连、黄芩、石榴皮水提物对多重耐药菌株抑菌活性较好,其中石榴皮水提物的MIC和MBC分别为31.25和62.5 mg/mL。石榴皮水提物在1/2MIC和MIC浓度下能显著抑制质控菌株和多重耐药菌株的生长繁殖。在石榴皮水提物作用大肠杆菌3 h内,菌液电导率相比于对照组极显著上升（P<0.01）。AKP与ATP检测结果显示,与对照组相比,石榴皮水提物在作用大肠杆菌6 h内,菌液中AKP含量极显著增加（P<0.01）,菌体内ATP含量极显著降低（P<0.01）。SDS-PAGE和蛋白含量检测结果显示,随着石榴皮水提物刺激时间增加,菌体内可溶性蛋白含量减少。扫描电镜结果显示,石榴皮刺激后菌体形态发生碎裂和溶解。【结论】本研究结果表明,石榴皮水提物能显著抑制多重耐药且携带肠毒素基因的大肠杆菌生长,为临床治疗大肠杆菌性仔猪腹泻提供理论参考和药物开发依据。     

分子蒸馏技术拆分陈皮挥发油及其GC-MS分析

以陈皮挥发油为研究对象,将其经过分子蒸馏拆分,得到不同馏分物,并分别对陈皮挥发油及所得馏分物进行气相色谱-质谱(GC-MS)分析。分子蒸馏分为二级,一级条件为:蒸发温度(30±0.2)℃,真空度(0.5±0.1)k Pa,刮膜器转速150~160 r/min;二级条件为:蒸发温度(60±0.2)℃,真空度(0.5±0.1)k Pa,刮膜器转速200~210 r/min;两次进样温度25℃,冷凝管温度10℃。结果表明,陈皮挥发油经二级分子蒸馏后总回收率为98.80%,其中一级轻组分(DF1)回收率为40.20%,二级轻组分(DF2)回收率为58.06%,二级重组分(RF2)回收率为0.53%。陈皮挥发油和各馏分物经过GC-MS分析后,确定25种化合物,主要为右旋萜二烯、α-萜品烯、萜品油烯等,但陈皮挥发油及各馏分物成分种类及相对含量差异明显,说明分子蒸馏技术能有效对陈皮挥发油成分进行拆分,可用于陈皮等挥发油的加工利用。