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1.
猪GV期卵母细胞玻璃化冷冻后的体外成熟   总被引:5,自引:2,他引:3  
本研究旨在探索建立猪GV(Germinal visiele)期卵母细胞的冷冻保存方法。用抽吸法采集屠宰猪卵巢中直径为2—5mm及〉5mm的卵泡卵母细胞,再用切割法采集直径〈2mm的卵泡卵母细胞。结果表明,切割法所获卵母细胞数及每只卵巢平均采卵数均显著高于抽吸法(P〈0.05);但切割法所获卵母细胞可用率仅为33.8%,显著低于抽吸法67.5%的可用率(P〈0.05)。用抽吸法采集直径为2—5mm的卵泡卵母细胞,进行体外成熟和玻璃化冷冻研究。4组成熟培养结果表明,卵母细胞在添加激素和猪卵泡液(pFF)的成熟培养液中培养24h后转入无激素、无卵泡液的基础培养液中继续培养20h,体外成熟率达78.9%,显著高于另外3组(P〈0.05)。以EFS40作为玻璃化冷冻液,比较细管法和OPS(Open pulled straw)法对猪GV期卵母细胞的冷冻效果,从冻后形态正常率来看,两种方法间无统计学差异(P〉0.05);但OPS法冷冻猪GV期卵母细胞的冻后存活率和体外成熟率均显著高于细管法(P〈0.05)。  相似文献
2.
玻璃化冷冻对猪卵母细胞超微结构的影响   总被引:5,自引:2,他引:3  
猪体外成熟培养的卵母细胞用平皿-微滴法玻璃化冷冻,冷冻解冻后对其超微结构损伤和正常的体外成熟培养的卵母细胞进行了电镜观察比较。结果表明,玻璃化冷冻的卵母细胞解冻后有不同程度的结构损伤,包括:透明带破裂;微绒毛几乎消失;有的部位质膜模糊甚至破裂;质膜下皮质颗粒减少;线粒体膨胀,电子致密度下降,嵴消失;大量囊泡在质膜周围变形融合;细胞基质出现空白区。玻璃化冷冻引起卵母细胞结构损伤是导致卵母细胞解冻后存活力下降和受精率降低的主要原因。  相似文献
3.
使用四种类固醇激素,两种保幼激素类似物和眼柄提取物进行罗氏沼虾离体卵巢小块培育,于25℃培育24h后切片并进行光谱观察。发现17α-羟孕酮,孕酮和JHA-ZR515对卵黄发生前期卵黄发生期卵母细胞卵径增大均有极显著刺激作用。高浓度雌二醇对卵黄发生前期卵母细胞卵径增大也有明显刺激作用;高浓度JHA-ZR512对成熟前卵巢卵母细胞卵径增大有显著作用,蜕皮激素对卵径增大无作用。眼柄提取物对卵黄发生期卵母  相似文献
4.
小鼠卵母细胞第一极体的采集与保存   总被引:3,自引:0,他引:3  
用孕马血清(PMSG)和人绒毛膜促性腺激素(hCG)对6~8周龄的雌性昆明系及ICR系小鼠进行超数排卵处理,从注射hCG后10 h起每间隔2 h采集小鼠的卵丘卵母细胞复合体(COCs),对卵母细胞的第一极体(PbI)进行数量和形态分级统计,并用台盼蓝染色法鉴定第一极体的活力;同时,对新获取的卵丘卵母细胞复合体进行不同温度保存条件试验。结果表明,在注射hCG后12 h所获得的第一极体活性最高;在室温和37℃下,第一极体的活力在6 h后便完全丧失,而在4℃下保存的第一极体,经过48 h后其活力依然良好。  相似文献
5.
 【目的】探索外源促性腺激素对卵巢在雄性受体内生长、卵泡发育和卵母细胞成熟与发育能力的影响。【方法】将1日龄小鼠卵巢移植到7~12周龄雄性小鼠肾囊下,回收前用促性腺激素对受体进行处理或不处理,同龄雌性小鼠用促性腺激素进行处理后作为对照。移植21 d后回收移植卵巢,观测移植体的回收率及生长和卵泡发育;对卵母细胞进行体外成熟、体外受精,观察2-细胞胚和囊胚发育率。【结果】移植21 d后,未处理组移植体回收率为85.4%,与处理组(90.7%)差异不显著(P>0.05)。未处理组移植体卵泡发育至成熟阶段,回收卵母细胞均处在GV期,平均每枚移植体回收卵母细胞数为(41.4±25.8)枚,2-细胞胚胎发育率为17.5%,未能发育至囊胚;处理组移植体有黄体形成,有的卵泡中有扩展的卵丘卵母细胞复合体,平均回收卵母细胞数为(33.4±20.1)枚,其中MⅡ期卵母细胞为(8.5±7.1)枚,GV期、MⅡ期卵母细胞受精后2-细胞胚胎的发育率分别为33.9%和44.3%,囊胚发育率分别为0.48%和6.3%;试验组间回收卵母细胞数差异不显著(P>0.05),2-细胞胚胎发育率、囊胚发育率差异极显著(P<0.01)。试验组卵母细胞2-细胞胚胎发育率显著低于对照组(P<0.01),处理组MⅡ期卵母细胞囊胚发育率与对照组差异不显著(P>0.05)。【结论】外源促性腺激素对雄性小鼠卵巢移植体具有促进卵泡发育、卵母细胞成熟和胚胎发育的作用,但不增加卵母细胞产量。  相似文献
6.
哺乳动物有腔卵泡中的卵母细胞在体外会自发恢复减数分裂,适当延迟减数分裂的自发恢复,能促进核与胞质成熟的同步化,有利于后续胚胎的发育。本试验研究了磷酸二酯酶3(PDE 3)特异性抑制剂milrinone对山羊卵母细胞体外成熟及孤雌胚发育的影响。结果表明,milrinone抑制山羊卵母细胞体外成熟的时间为6 h,其最佳剂量为100μmol/L,经milrinone处理体外培养28 h成熟的山羊卵母细胞用于孤雌激活,能显著提高孤雌激活胚的卵裂率及囊胚率。说明成熟培养液中添加适当剂量的milrinone,能显著提高体外成熟的山羊卵母细胞的质量。  相似文献
7.
颗粒细胞对山羊卵泡卵母细胞体外成熟和体外受精的影响   总被引:2,自引:0,他引:2  
试验系统研究了颗粒细胞对山羊卵泡卵母细胞体外成熟和体外受精的影响。COCs、机械裸卵和自然裸卵的体外成熟率分别为68.3%、45.6%和6.1%,组间差异显著(P<0.05),卵裂率分别为41.5%、8.1%和0,差异显著(P<0.05)。对照组和15×104个/ml、150×104个/ml颗粒细胞组卵母细胞体外成熟率分别为65.9%、60.2%和64.6%,无显著差异(P>0.05),但均显著高于1 500×104个/ml(50.0%)和1.5×108个/ml(30.3%)颗粒细胞组(P<0.05)。颗粒细胞单层共培养系统卵母细胞成熟率为75.8%,显著高于150×104个/ml颗粒细胞条件培养液组(63.4%)和M199培养液组(66.7%)(P<0.05)。颗粒细胞单层共培养系卵裂率为50.0%,显著高于150×104个/ml条件培养液组(36.7%)和M199培养液组(38.2%)(P<0.05)。  相似文献
8.
条石鲷卵巢发育的组织学研究   总被引:1,自引:1,他引:1  
采用常规的生物学调查和石蜡组织切片法,对条石鲷Oplegnathus fasciatus卵巢发育周期和卵巢发育中各个时期卵母细胞的形态特征以及产卵类型等进行了组织学研究。结果表明,条石鲷卵母细胞的发育过程在年周期中可分为6个时相:Ⅰ时相的卵母细胞呈原始分化状态,Ⅱ时相卵母细胞出现明显的卵黄核,Ⅲ时相卵母细胞出现皮质液泡,Ⅳ时相的卵母细胞分化明显,卵黄颗粒部分融合,Ⅴ时相和Ⅵ时相分别为卵子形成和退化吸收时相。卵巢发育可分为6个时期:繁殖期主要在5—7月,其卵巢有Ⅳ期、V期;8月卵巢开始退化,9月进入重新发育的Ⅱ期,直到翌年3月都为越冬Ⅱ期卵巢;3月下旬条石鲷卵巢开始重新发育为Ⅲ期卵巢。条石鲷卵巢的平均成熟系数为0.70%~12.57%。组织学观察结果表明,各时相卵母细胞发育不同步,因此条石鲷属多次产卵。  相似文献
9.
透明质酸对山羊卵母细胞体外成熟和孤雌胚胎发育的影响   总被引:1,自引:1,他引:0  
在无血清培养体系中添加不同浓度的HA,探讨HA浓度对山羊卵母细胞体外成熟和早期胚胎发育的影响。试验结果表明,当HA浓度在1.0和1.5 mg/ml时,卵母细胞成熟率(分别为74.5%和76.3%)显著高于对照组(P<0.05),且高于其他各组,说明HA可以促进卵母细胞成熟,且浓度在1.0~1.5 mg/ml时最有利于卵母细胞成熟;当HA浓度为1.5 mg/ml时,卵裂率(85.7%)和囊胚率(44.4%)均显著高于对照组,与其他各组比较,均达最优值,说明HA可以促进早期胚胎发育,且浓度为1.5 mg/ml时,最有利于早期胚胎发育。  相似文献
10.
不同渗透压及山梨醇浓度对猪体外受精卵早期发育的影响   总被引:1,自引:1,他引:4  
探讨胚胎培养液中不同渗透压及山梨醇浓度对猪体外受精卵早期发育的影响。结果表明,用NaCl调节渗透压时,猪体外受精卵的囊胚率随着渗透压的升高而增加,当渗透压为320~335mOsm时囊胚率最高;而用山梨醇调节渗透压时,以1.8mg/mL山梨醇调节渗透压至270~285mOsm的效果较好;同一渗透压水平下,培养液中添加山梨醇与未添加的处理组间差异不显著。说明本研究条件下,适当提高胚胎培养液渗透压有利于猪体外受精卵的早期发育。  相似文献
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