藏羚粪便中类固醇激素的高效液相色谱分析

[目的]通过建立粪便中生殖激素含量的测定方法,为研究藏羚羊的繁殖特征奠定基础。[方法]以2-（11H-苯﹝α﹞咔唑）-乙基肼基甲酸酯（BCECH）为柱前衍生化试剂,探讨皮质醇、皮质酮、睾酮和孕酮4种类固醇激素衍生物的最佳色谱分离条件。通过比较4种类固醇激素标准品出峰时间,确定粪样中目标物质峰。[结果]最优衍生条件为：以乙腈为衍生化溶剂,以三氯乙酸为催化剂,衍生化温度65℃,衍生试剂用量为总摩尔类固醇的10倍以上。在建立的色谱条件下,藏羚粪样中4种类固醇激素含量色谱图有较多的杂质峰,表明粪样中的成分很复杂。[结论]该研究建立了藏羚羊粪便中类固醇激素高效液相色谱的分析方法,实现了藏羚粪便中4种类固醇化合物的定量测定。     

HPLC法检测发酵玉米粉中的黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2

发酵玉米粉用甲醇∶水(80∶20,V∶V)提取黄曲霉毒素(AFT),经免疫亲合柱(IAC)分离纯化、在线光化学衍生器柱后衍生化后,反相高效液相色谱(HPLC)荧光检测器测定AFT(B1、B2、G1、G2)含量。4种毒素在0.5ng/g和2ng/g2个水平下,样品加标回收率平均值分别为B188.0%和93.6%、B285.2%和85.3%、G192.4%和91.5%、G289.6%和85.6%;5次测定的标准差分别为:B12.5和6.3、B23.5和6.0、G12.8和9.0、G22.3和6.9;4种毒素的方法检出限均达到0.05ng/g。     

柱前衍生化高效液相色谱检测木糖液中葡萄糖含量

建立了木糖母液及发酵液中葡萄糖的柱前衍生化HPLC检测方法。以l-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）为柱前衍生化试剂,在ZORBAXEclipseXDB-C18色谱柱上,流动相采用95％A（醋酸盐缓冲液,O．1mol·L-1,pH=5．71）,5％B（乙腈）等比洗脱,检测波长245rim,带宽50nm。目标组分葡萄糖衍生物基线分离无干扰,葡萄糖在2．5-50．0mg·L-1。浓度范围内呈现良好的线性关系,方法检测限为0．2mg·L-1。方法样品前处理简便,灵敏度高,重现性好。     

糖腈乙酰酯衍生气相色谱法测定土壤水解性单糖

通过对糖腈乙酰酯衍生条件的优化,建立了一种测定土壤水解性单糖的糖腈乙酰酯衍生气相色谱分析方法。8种单糖线性范围为10～640!g,检出限(3S/N)在1.4～4.2ng之间,样品加标平均回收率为100.1%,相对标准偏差(RSD)为1.5～6.3%。试验结果表明该方法操作简便快速、灵敏度高,可准确可靠地应用于土壤单糖含量的测定。     

柱前衍生化HPLC法测定铁皮石斛破壁饮片中甘露糖的含量

采用柱前衍生化HPLC法测定了12批铁皮石斛破壁饮片中甘露糖的含量。药材采用80%乙醇回流提取除杂后,水煎煮制得石斛多糖,然后将多糖经酸水解为单糖,再用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)进行衍生化处理,以盐酸氨基葡萄糖作为内标进样测定。结果平均校正因子为0.8248,RSD为0.63%,平均加样回收率为98.03%。每批铁皮石斛破壁饮片中单糖含量存在明显差异,但均符合药典要求。     

响应面法优化高效液相色谱-柱前衍生化检测发酵乳制品中的组胺

采用高效液相色谱-柱前衍生化方法,对市售发酵乳制品(天然干酪、再制干酪和发酵乳等)中的组胺含量进行检测。对影响测定结果的衍生试剂(丹磺酰氯)用量、反应pH值、衍生反应时间和衍生反应温度4 个因素进行单因素试验和响应面优化多因素交互作用分析。结果表明:优化所得衍生化条件操作简便、高效、测定准确度和精密度均较高,能够满足精确测定乳制品中组胺含量的要求。     

氨基酸分析方法

该研究从分析化学角度,介绍了一些重要的氨基酸分析方法,其中包括柱前衍生化法以及柱后衍生化方法,总结了柱前衍生化法、柱后衍生化法及其不同衍生试剂的优缺点,为氨基酸分析方法的应用提供了理论基础。     

新型柱前衍生-高效液相荧光检测法检测水产品中河豚毒素

在稀碱条件下,河鲀毒素(TTX)与次溴酸钠和尿素于一定温度下反应生成具有荧光性能的物质,该反应与已报道的TTX在强碱下生成C-9碱的碱解不同。本研究拟对该衍生反应所需条件进行详细研究,并尝试依据该反应建立一种新型的河鲀毒素荧光检测方法。荧光扫描光谱显示,产物最大激发波长(EX)为233 nm,最大发射波长(EM)为370 nm。该反应对p H要求比较严格,反应最适p H在11.6~11.9之间。对样品进行衍生检测获得最强荧光信号的条件为:次溴酸钠0.036~0.09 mol/L、尿素10~50 g/L、碳酸钠0.2~0.3 mol/L,温度75℃。样品检测结果显示,此衍生反应具有高度专一性,信号强度与TTX含量成正比,在0.01~10μg/m L质量浓度范围内线性方程为y=109.17x+0.3965,线性相关系数为0.999。依据该衍生反应建立柱前衍生–高效液相色谱荧光检测法检测水产品中河鲀毒素含量,检测限达到20μg/kg,平行样品检测相对标准偏差为0.44%~7.25%,准确度高。对河鲀、虾虎鱼和织纹螺产品检测表明,该反应特异性强,不易出现假阳性,可用于河鲀毒素检测的确证。     

川芎多糖的分离纯化及其单糖组成测定

为了解川芎多糖的分子量和单糖组成,为药量学研究和中成药加工奠定基础,采用水提醇沉法提取川芎多糖,DEAE-纤维素柱层析法纯化,高效凝胶渗透色谱法测定分子量。然后用硫酸水解,1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生水解后的单糖,衍生物采用高效液相色谱法测定多糖的单糖组成。结果表明,DEAE-纤维素柱层析获得3个川芎多糖组分LCXP-1、LCXP-2和LCXP-3,分子量分别为11.916、20.793和701.875kDa。LCXP-1和LCXP-2均由甘露糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成,摩尔比分别为1:495:3.7:1.2和1:632:4.3:1.2;LCXP-3由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成,摩尔比为1:6.5:1.5:248:50:14。该方法准确、灵敏度高,适用于川芎多糖中单糖组成的测定。