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1.
发酵条件对拟青霉E7菌株产脱乙酰几丁质酶的影响   总被引:7,自引:0,他引:7  
以脱乙酰几丁质为惟一碳源和氮源,通过平板透明圈筛选法,从土壤中筛选分离了30株产脱乙酰几丁质酶的菌株,根据产生透明圈的大小和酶活测定,从中选出产脱乙酰几丁质酶活力最高的拟青霉E7菌株进行产酶发酵条件的进一步研究。结果表明,0.5% ̄1%的脱乙酰几丁质浓度有利于产酶,高于2%则对其产酶有抑制作用;金属离子对酶活力有一定的影响,在基本培养基中添加Mn2 对产酶有较强的诱导作用,而加入Ca2 则对产酶有一定的抑制作用;以蛋白胨为氮源时,产酶活力最高,可达到60U·mL-1;pH对E7菌株的产酶活力影响较大,方差分析表明,不同pH值的产酶活力存在显著差异(a=5%),pH在4.0 ̄6.0范围内酶活力较稳定,pH高于6.0酶活力很低,不利于产酶。  相似文献
2.
双载体法固定化黑曲霉发酵产壳聚糖酶的研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
探索玉米芯颗粒吸附、海藻酸钠包埋固定化黑曲霉(Aspergillus nigPr)孢子的方法以及双载体固定化黑曲霉发酵产壳聚糖酶的条件。实验结果表明,玉米芯颗粒对黑曲霉孢子的吸附容量约为5×10^7个/克;适宜包埋剂质量分数为1.0%;0.2g玉米芯颗粒经吸附、包埋与增殖预培养成熟的固定化黑曲霉细胞发酵产壳聚糖酶最适pH为5.0,适宜发酵装液量为25mL(250mL三角瓶),28.6℃,132r/min条件下摇床发酵48h产壳聚糖酶活力101.3U/mL。  相似文献
3.
壳聚糖酶高产菌的筛选、鉴定与发酵产酶初探   总被引:2,自引:1,他引:1       下载免费PDF全文
壳聚糖酶(EC3.2.1.132)能催化壳聚糖分子中β1,4糖苷键的水解,以获得具有特殊生理活性的壳聚寡糖(聚氨基葡萄糖,聚合度2-10)。该酶在细菌、真菌等多种微生物中存在。采用透明圈法,以壳聚糖为唯一碳源,从11份虾蟹壳堆积的土壤中分离出51株能降解壳聚糖的菌株。经平板初筛、摇瓶发酵复筛以及产酶动力学研究,确定H2为产壳聚酶活力高、发酵时间短的优良菌株。根据其形态及培养特征、生理生化特性及16S rDNA序列分析,鉴定该菌株为浅玫瑰色链霉菌,并命名为(Streptomyces roseolus DH)。进一步的基本发酵条件研究显示:该菌株发酵最适温度为30 ℃,发酵液初始pH为7.2,最适碳源为1%胶体壳聚糖,最适氮源为0.5%蛋白胨。此条件下经60 h发酵,发酵液中壳聚糖酶活力可达(6.10±0.12) U/mL。此菌株产酶量高,发酵周期短,具有良好的应用潜力。  相似文献
4.
浅玫瑰色链霉菌壳聚糖酶罐发酵工艺及其优化   总被引:2,自引:2,他引:0       下载免费PDF全文
发酵罐装填系数0.6,控制罐压0.08Mpa,采用单因素试验方法考察搅拌转速、种子液OD600、接种量和通气量4个因素对壳聚糖酶发酵的影响。根据试验结果确定该菌种10L发酵罐发酵条件:搅拌转速250r/min,种子液OD600=0.8~1.0,通气量2.0vvm(每分钟通气量与罐体实际料液体积之比),接种量3%,其发酵周期56h,酶活力在52h达到最大,为(35.2±0.5)U/mL。补料工艺发酵周期为64h,酶活力在60h达到最大,为(46.4±0.5)U/mL。补料工艺能维持产酶期菌丝形态和延长产酶时间,从而提高产酶,最终补料工艺比批次发酵产酶提高了32%。该研究为壳聚糖酶工业化生产奠定基础。  相似文献
5.
介绍了壳聚糖酶的来源、分类及其理化性质,总结了国内外产壳聚糖酶菌株的研究进展,并对其降解产物壳寡糖的生理功能和在食品领域中的应用进行了概述。  相似文献
6.
对本实验室筛选保存的几株产脱乙酰几丁质酶菌株的产酶条件,如pH值、氮源和金属离子进行初步研究,结果表明,其酶作用最适pH范围为5.0~6.0,氮源及Cu2 、Co2 和Mn2 对脱乙酰几丁质酶有不同程度的促进作用,Zn2 对脱乙酰几丁质酶有较强的抑制作用。用纸层析测定这些菌株在不同产酶条件下发酵产物中壳寡糖的含量和成分,根据产物情况推测酶作用方式,表明不同条件下得到壳寡糖有所变化。  相似文献
7.
Chang  KC Kang  T 《安徽农业大学学报》1999,26(3):310-316
将烟曲霉的一种胞外脱乙酰几丁质酶(AF CSN)纯化,并测定该酶N-端氨基酸的序列。用此序列推测的寡核苷酸引物扩增得到脱乙酰几丁质酶(csn)的cDNA,其全长为804bp,编码一种251个氨基酸的单肽,对csn的序列比较分析表明,它与茄病镰刀菌在两个区域具有同源性,这两个区域分别有重复天冬氨酸及苏氨酸残基,这说明它与细菌具有相同的演化起源。cns与已知的细菌脱乙酰几丁质酶没有同源性,Southern杂交分析显示,cns在烟曲霉基因组中的单拷贝的。用质粒栽体pET28a(t),csn cDNA被导入E.coli中得到csn的融合蛋白,在IPTG诱导下,E.coli细胞中可获得大量的约28kDa的成熟蛋白。  相似文献
8.
真菌壳聚糖酶类催化水解壳聚糖,它们在自然界的碳氮循环以及用于处理海洋食品和生产药用寡聚壳聚糖等工业上均有非常重要的意义.自1981年来,已有一些真菌源壳聚糖酶获得了纯化、明确了其特性,并作了序列分析.本文从以下3个方面阐述了真菌壳聚糖酶的近期研究进展1)从Aspergillus fumigatus KH-94, Fusarium solani, Mucor rouxii A*B, Penicillum islandicum, P. spinulosum, Rhodotorula gracilis, Trichoderma reesei, A. oryzae, A. fumigatus Y2K 和 A. fumigatus S-26等真菌中获得的胞内壳聚糖酶的纯化及其特性;2)从T. reesei, A. oryzae, A. fumigatus and Cordyceps sp. MET 1504等真菌中获得的胞外壳聚糖酶的纯化及其特性;3)从T. reesei, Metarhizium anisopliae, A. oryzae and A. fumigatus S-26等真菌中获得的壳聚糖酶氨基酸序列的分析.  相似文献
9.
壳聚糖酶(EC3.2.1.132)能催化壳聚糖分子中β-1,4-糖苷键的水解,以获得具有特殊生理活性的壳聚寡糖(聚氨基葡萄糖,聚合度2-10)。该酶在细菌、真菌等多种微生物中存在。采用透明圈法,以壳聚糖为唯一碳源,从11份虾蟹壳堆积的土壤中分离出51株能降解壳聚糖的菌株。经平板初筛、摇瓶发酵复筛以及产酶动力学研究,确定H2为产壳聚酶活力高、发酵时间短的优良菌株。根据其形态及培养特征、生理生化特性及16S rDNA序列分析,鉴定该菌株为浅玫瑰色链霉菌,并命名为(Streptomyces roseolus DH)。进一步的基本发酵条件研究显示:该菌株发酵最适温度为30℃,发酵液初始pH为7.2,最适碳源为1%胶体壳聚糖,最适氮源为0.5%蛋白胨。此条件下经60 h发酵,发酵液中壳聚糖酶活力可达(6.10±0.12)U/mL。此菌株产酶量高,发酵周期短,具有良好的应用潜力。  相似文献
10.
为提高烟曲霉WHSW-01合成壳聚糖酶的水平,考察不同培养条件对烟曲霉WHSW-01细胞生长和产酶的影响.结果表明,在以麦芽糖为最佳碳源,硝酸铵为最佳氮源,最佳培养温度及初始pH分别为30C和5.5,摇床转速及装液量分别为180 r/min和70 mL/250 mL的条件下,烟曲霉WHSW-01的发酵周期为9d,培养第5天达产酶高峰期.发酵过程中,培养液中还原糖变化呈先增加后减少的趋势,随着发酵的进行,发酵液pH的变化呈逐渐递增趋势.针对发酵过程中细胞生物量与产酶的关系,WHSW-01壳聚糖酶的模式为同步合成型,要提高壳聚糖酶的合成水平应适当促进菌体的生长.  相似文献
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