鬼针草水提物抗伪狂犬病毒作用研究

【目的】研究鬼针草水提物（BPE）的体外抗伪狂犬病毒（Pseudorabies virus,PrV）作用。【方法】制备640 mg/mL（以生药计）的BPE,检测其对仓鼠肾上皮细胞(BHK-21)的毒性（半数中毒浓度（TC₅₀））及对PrV体外抗性（半数抑制浓度（EC₅₀））和治疗指数（TI）。采用CCK-8法检测BPE抗PrV的机制。采用间接免疫荧光法检测BPE对gB蛋白表达和PrV所致细胞凋亡的影响,采用实时荧光定量PCR方法检测BPE对PrV gB基因表达的影响。【结果】BPE对BHK-21细胞的TC₅₀为28.7 mg/mL,对PrV的EC₅₀为5.16 mg/mL,TI为5.56。BPE抗PrV的机制为抑制PrV增殖和灭活PrV。BPE可抑制PrV诱导的BHK 21细胞凋亡,抑制PrV gB基因和蛋白的表达。【结论】BPE具有明显的体外抗PrV活性。     

多价荧光抗体监测外源病毒污染的研究

用猪瘟病毒（ＨＣＶ）、猪细小病毒（ＰＰＶ），牛病毒性腹泻／粘膜病病毒（ＢＶＤ／ＭＤＶ），伪狂犬病病毒（ＰｒＶ），兰舌病病毒（ＢｔＶ），羊口疮病毒（ＯＶ）等六种病毒，多次同时或先后强化免疫猪，制取六价高免血清；用狂犬病病毒（ＲＶ）免疫兔，制取ＲＶ单价高免血清，分别用异硫氰酸荧光素（ＦＩＴＣ）标记制成荧光抗体（ＦＡ），并按二者最佳染色价配制成七价（多价）ＦＡ。由于各病毒在其宿主细胞中复制部位和与宿主细     

江汉平原—规模化猪场暴发伪狂犬病的调查研究(Ⅲ)——猪伪狂犬病毒HS-9304株的克隆纯化及检定

应用细胞培养病毒蚀斑技术,将分离的伪狂犬病毒(PrV)HS-9304株在鸡胚成纤维细胞(CEF)单层培养上覆以营养琼脂培养基,连续挑斑纯化3次,成功地获得了纯化病毒克隆株.对病毒克隆株在传代细胞上复壮增殖后进行毒价测定.接种试验动物人工造病并进行血清中和试验以及外源性污染的检定.该病毒克隆株对BHK-21细胞感染的滴度为10~(8.5)TClD_50,能使小鼠和家兔出现特异性的症状和死亡,病毒对PrV标准阳性血清的中和效价达到1:195.病毒纯净无外源性污染.