利用乳汁体细胞研究共轭亚油酸钙对奶牛乳腺基因表达的作用

8头泌乳中期的奶牛被随机分为2组，分别是对照组（每头牛：基础日粮＋棕榈酸钙200g／d）和试验组（每头牛：基础日粮＋共轭亚油酸钙200g／d），试验期14d，检测了奶产量、乳成分，分析奶牛的血液变化，并采用荧光定量PCR对乳汁体细胞中脂蛋白脂酶（LPL）、乙酰辅酶A羧化酶（ACACA）的基因表达进行检测。结果显示，与对照组相比，试验组奶牛的乳产量、乳蛋白、乳糖和乳汁体细胞含量没有显著影响，但是显著降低了乳脂肪含量（P〈0．05），对照组和试验组奶牛乳脂肪含量分别为0．0326g／mL和0．0244g／mL。检测血液指标发现，共轭亚油酸钙显著升高了奶牛血液中高密度脂蛋白的含量（P〈0．05）。基因分析发现，试验组奶牛乳汁体细胞中LPL、ACA—CA的基因表达显著下调，表明共轭亚油酸钙抑制了奶牛乳腺细胞脂肪酸合成酶的基因表达。     

Anti-diabetic effects of emodin involved in the activation of PPARγ on high-fat diet-fed and low dose of streptozotocin-induced diabetic mice

Rheum palmatum Linn has been widely applied in the clinical treatment of diabetes mellitus. It has been found that emodin as the major bioactive component of R. palmatum L exhibits the competency to activate peroxisomal proliferator-activated receptor-γ (PPARγ) in vitro. So the aim of this study was to evaluate the anti-diabetic effects of emodin through the activation of PPARγ on high-fat diet-fed and low dose of streptozotocin (STZ)-induced diabetic mice. The diabetic mice were intraperitoneally injected with emodin for three weeks. No changes of food consumption and the body weight in emodin-treated mice were monitored daily during the entire experiment. At the end of experiment, the levels of blood glucose, triglyceride and total cholesterol in serum were significantly decreased after emodin treatment. However, serum high-density lipoprotein cholesterol (HDLc) concentration was significantly elevated. The glucose tolerance and insulin sensitivity in emodin-treated group were significantly improved. Furthermore, the results of quantitative RT-PCR analysis showed that emodin significantly elevated the mRNA expression level of PPARγ and regulated the mRNA expressions of LPL, FAT/CD36, resistin and FABPs (ap2) in liver and adipocyte tissues. No effects on the mRNA expressions of PPARα and PPARα-target genes were observed. Taken together, the results suggested that the activation of PPARγ and the modulation of metabolism-related genes were likely involved in the anti-diabetic effects of emodin.     

不同小麦日粮对肉仔鸡肉质、脂肪酸合成酶mRNA与脂蛋白脂肪酶mRNA表达的影响

本文旨在研究不同小麦日粮对肉仔鸡生长、肉质及脂肪酸合成酶(FAS)mRNA与脂蛋白脂肪酶(LPL)mRNA表达的影响。选用300只艾维因肉仔鸡公雏,随机分为5组,每组4个重复,每个重复15只鸡,5组分别饲喂玉米日粮和4种水溶性阿拉伯木聚糖(WSAX)含量不同的小麦日粮,试验期为6周。结果表明:①随着小麦日粮中WSAX含量的增加,肉仔鸡的生长明显降低;②小麦日粮显著增加了肌肉持水力,并随小麦WSAX含量增加而升高的趋势显著(P<0.01),剪切力也随之增加(P<0.05)。饲喂小麦日粮的肉仔鸡其肉色显著低于玉米日粮组(P<0.01),各小麦日粮组间差异不显著。当小麦WSAX含量较高时,小麦日粮可以显著降低肉仔鸡肌肉脂肪和胆固醇含量(P<0.05)。各处理间胸肌、腿肌含水量无差异(P>0.05);③小麦日粮显著降低FASmRNA在肉仔鸡肝中的表达量(P<0.01),并且随日粮WSAX含量增加而表达水平降低的趋势明显。各处理间LPLmRNA表达量的差异不显著(P>0.05)。本研究表明:①当小麦中WSAX含量较低时,对肉仔鸡增重和肉质的影响较小,是玉米理想的替代品;②当小麦中WASX含量较高,则会严重影响肉仔鸡的增重、肉质及FASmRNA在肝脏中的表达,不宜在肉仔鸡日粮中大量添加。     

猪LPL基因PCR-RFLP遗传变异的研究

利用PCR-RFLP技术,对大白猪、长白猪、杜洛克、荣昌猪、内江猪、八眉猪、汉中白猪、汉江黑猪8个家猪品种和1个野猪种共368头猪LPL基因的第6和第8内含子进行遗传变异研究。结果表明:(1)在第6内含子的Sma -RFLP位点上,各猪种均存在多态性,长白、杜洛克、内江猪和八眉猪以AA和AB基因型为主,大白、荣昌猪、汉中白猪、汉江黑猪及野猪以AB和BB基因型为主;在Pvu -RFLP位点上,国外猪种均为DD纯合子,而国内猪种和野猪在此位点上均存在变异;(2)在第8内含子的Hind -RFLP位点上,国外猪种和荣昌猪表现出多态性,而国内其他猪种和野猪均为FF纯合子;在EcoR -RFLP位点上,各猪种均表现多态性,且以GH杂合子为主,没有表现出差异。     

兴义鸭LPL基因外显子8多态性与生长和肉质性状的关联性分析

脂蛋白脂酶（LPL）是动物脂质沉积和新陈代谢的关键酶,对生长和肉质发挥着重要作用。试验采用PCR-SSCP法和DNA直接测序技术相结合对兴义鸭LPL基因外显子8进行多态性检测,并分析其多态与生长和肉质性状的关联性。结果表明,在兴义鸭LPL基因外显子8首次检测到1个T1251C同义突变,产生三种基因型TT、TC和CC,2个等位基因T和C,基因型TT和等位基因T的频率分别为0．8077和0．8750,多态信息含量为0．1948,表现为低度多态,卡方（X2）检验表明T1251C位点的基因型分布在兴义鸭中未偏离Hardy-Weinberg平衡。最小二乘分析显示,TT基因型个体的宰前体重显著低于CC基因型（p〈0．05）,胸宽显著低于TC基因型白〈0．05）,推测等位基因C可能是兴义鸭生长性状的有利等位基因,可作为生长性状的一个标记性辅助选择位点。     

苏尼特肥羔肌肉组织LPL和HSL的发育性变化及其对肌内脂肪沉积的影响

采用二因子多水平有重复的试验设计,选取16只3月龄断奶并已去势的苏尼特羊公羔,随机分为4组,每组4个重复,试验前各组体重差异不显著(P>0.05)。分别于试验羊活重达10.79±0.49、20.73±0.70、28.54±0.57、(38.19±2.85)kg时屠宰,采集背最长肌(LD)和股二头肌(BF)样品后测定肌内脂肪(IMF)含量、肌肉组织LPL和HSL活性,并分析不同体重阶段酶活的变化及其与肌内脂肪沉积的关系。结果表明:①随着体重的增加,IMF含量逐渐增加,并存在极显著差异(P<0.01);不同部位肌肉间的IMF含量均无显著差异(P>0.05)。②不同肌肉组织LPL和HSL活性均随体重增加逐渐降低,不同发育阶段存在极显著差异(P<0.01)。LPL11kg时酶活显著高于后三个体重阶段(P<0.01),但LD表现出先降低后升高的趋势,29kg体重时酶活降到最低,极显著低于前两个体重阶段(P<0.01),38kg时又开始升高,但与29kg时差异不显著(P>0.05)。LD中HSL酶活最低值出现于21kg体重阶段,而BF在29kg时HSL酶活性最低,二者都极显著低于11kg时的酶活(P<0.01)。不同肌肉部位间LPL活性在11kg时BF显著低于LD(P<0.05),29kg时极显著高于LD(P<0.01),其它两个阶段差异不显著(P>0.05)。11～29kg不同肌肉部位HSL变化差异不显著(P>0.05),38kg体重时BF中HSL活性极显著高于LD(P<0.01)。③BF和LD中LPL酶活在11～38kg期间与IMF含量均呈负相关,相关系数分别为-0.782(P=0.003)、-0.864(P<0.001)。BF中HSL与IMF含量无显著的相关性(P>0.05);LD中HSL与IMF含量呈负相关(-0.850,P<0.0001)。结论:LPL和HSL是IMF沉积的重要参与者,对IMF的沉积有显著的影响。HSL活性的发育性变化趋势与肌内脂肪沉积基本一致。11～38kg体重阶段肥羔LD和BF中肌内脂肪合成与分解代谢达动态平衡。     

猪肌肉组织LPL基因表达的发育性变化及其与肌内脂肪沉积关系的研究

以40-90 kg 6个体重组的莱芜猪和鲁莱黑猪共72头去势公猪为试验对象(每组6头),采用相对定量RT-PCR方法,以-βactin基因为内标,分析肌肉组织LPL基因表达的发育性变化及其与肌内脂肪沉积的关系。结果表明:莱芜猪与鲁莱黑猪肌肉组织中LPL基因表达的发育性变化趋势基本相似,随体重的增长,莱芜猪50-70kg阶段LPLmRNA表达丰度逐渐下降(P<0.05),80 kg阶段迅速回升出现一个峰值后再次下降;鲁莱黑猪LPLmRNA表达丰度随体重的增加呈缓慢下降趋势,70 kg以后变化不大并维持较低水平,其前期(40-60 kg)与后期(70-90 kg)的表达量差异显著(P<0.05)。总体上莱芜猪肌肉组织LPL基因表达量略高于鲁莱黑猪(P>0.05)。相关分析表明,莱芜猪和鲁莱黑猪肌内脂肪相对含量与肌肉组织LPLmRNA表达的发育性变化分别呈显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)的正相关。研究结果提示:猪肌肉组织LPL是肌内脂肪沉积的重要参与者,其编码基因的表达具有明显的体重发育特征,并对肌内脂肪的沉积具有一定程度影响。     

广西三黄鸡脂蛋白脂酶基因的克隆及蛋白构象分析

【目的】对广西三黄鸡和爱拔益加（AA）鸡的脂蛋白脂酶基因（LPL）进行克隆与蛋白质结构分析,为后期开展LPL基因表达与鸡肌内脂肪含量相关性研究及筛选出与优质肉质相关的分子遗传标记奠定基础。【方法】根据GenBank已公布的鸡“也基因序列设计引物,利用RT-PCR扩增广西三黄鸡和AA鸡的LPL基因cDNA序列,经双酶切鉴定和序列测定比对分析后,应用生物软件进行蛋白质二级结构预测分析。【结果】成功获得广西三黄鸡和AA鸡的LPL基因编码区序列（CDs）,大小均为1473bp,两者的同源性为99．4％;将广西三黄鸡LPL基因序列提交至GenBank获得序列号JX090309。相对于AA鸡,广西三黄鸡LPL基因CDs存在9个位点的碱基突变,其中碱基^503T→C导致氨基酸^168Val→Ala,^606T→G导致^202Asp→Glu,^1066A→G导致^366Thr→Ala,^1277C→T导致^426Ser→Phe,^1420A→G导致^474Arp→Gly,^1432G→A导致^202Glu→Lys,这6个位点为错义突变;第166、372和1305位点的碱基突变为同义突变。蛋白质二级结构预测结果表明,广西三黄鸡与AA鸡LPL的C端结构域存在空间构象差异。【结论】LPL基因突变引起的氨基酸组成变化及蛋白质二级构象改变,可能影响鸡肌内脂肪沉积,进而决定肉质的优劣,即LPL基因可作为研究广西三黄鸡肌内脂肪代谢的主要候选基因。     

湘西黄牛LPL基因exon5的多态性与生长性状的相关性

脂蛋白脂酶(LPL)是机体脂质和脂蛋白代谢的关键酶,在脂质代谢、转运和能量代谢方面发挥着重要作用,影响着动物的生长发育。为探讨湘西黄牛LPL基因的分子遗传特征和寻找与生长性状相关的分子标记,采用PCR产物测序的方法检测了湘西黄牛LPL基因的SNP位点,并进行了LPL基因exon 5的g.365458G>A位点进行了群体遗传多态与生长性状的关联分析。SNP检测结果表明,LPL基因在Intron 4上新发现了3个SNP(g.365186A>C、g.365248C>T和g.365249C>T),在exon5的182 bp处检测到了1个SNP(g.365458G>A)。g.365458G>A位点的多态性检测结果表明,g.365458G>A位点存在AA、AG和GG 3种基因型,呈中度多态,且达到了Hardy-Weinberg平衡状态。多态性与生产性状的相关性分析结果表明,湘西黄牛AA基因型个体的体高和胸围显著大于GG基因型个体(P<0.05),AA基因型个体的体长和体重极显著大于GG基因型个体(P<0.01)。A等位基因对湘西黄牛的体高、体长、胸围和体重都为正效应,而G等位基因都为负效应。推测LPL基因exon5的g.365458G>A位点有可能作为湘西黄牛生长性状的分子遗传标记位点。     

桑叶对绒山羊血脂及脂肪代谢相关基因表达的影响

【目的】探讨日粮中桑叶添加方式和添加量对绒山羊血脂代谢及组织中脂蛋白酯酶(LPL)、脂肪酸合成酶(FASN)、瘦素(Leptin)基因表达量的影响。【方法】选用体况良好(平均体质量(28±1.05)kg/只)的陕北白绒山羊羯羊60只,随机均分为对照组、干桑叶组Ⅰ、干桑叶组Ⅱ、青贮桑叶组Ⅰ、青贮桑叶组Ⅱ、青贮桑叶组Ⅲ6组,其中对照组日粮中不添加桑叶;干桑叶组Ⅰ、Ⅱ日粮中分别添加质量分数10%,15%的自然风干桑叶,青贮桑叶组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组日粮中分别添加质量分数10%,15%,20%的青贮桑叶。饲养试验持续70d。饲养试验结束后,每组随机挑选3只羊进行屠宰,宰前颈静脉采血并分离血清,宰后采集腹部皮下脂肪、肾周脂肪、尾部脂肪、肝脏、背最长肌组织样。测定血清中血脂代谢相关指标;通过实时荧光定量PCR检测各组织中LPL、FASN、Leptin基因表达量。【结果】干桑叶组Ⅱ和青贮桑叶组Ⅱ的血清LDL-C浓度分别显著降低36.4%和30%(P0.05);饲喂干桑叶组羊血清Leptin质量浓度显著降低(P0.05);干桑叶组Ⅱ和青贮桑叶组Ⅲ中血清FASN质量浓度均显著降低(P0.05)。LPL、FASN、Leptin具有组织表达特异性,且日粮中添加桑叶对绒山羊各组织中基因表达的影响不同。肝脏中,干桑叶组Ⅱ和青贮桑叶组Ⅱ中FASN基因表达量显著降低(P0.05);腹部皮下脂肪中,青贮桑叶组Ⅲ的LPL、Leptin基因表达量显著增加(P0.05);肾周脂肪中,LPL基因表达量在青贮桑叶组Ⅱ中显著上升(P0.05);尾部脂肪中,干桑叶组Ⅱ和青贮桑叶组Ⅱ的LPL基因表达量显著增加(P0.05),干桑叶组Ⅱ和青贮桑叶组Ⅲ的Leptin表达量显著增加(P0.05);背最长肌中,青贮桑叶组Ⅱ的LPL、Leptin基因表达量显著上升(P0.05)。【结论】日粮中添加干桑叶和青贮桑叶对绒山羊脂肪代谢均有调控作用,但整体上饲喂青贮桑叶效果更显著;在日粮中添加质量分数15%的青贮桑叶有更好的降血脂效果,降低血液中TC、TG、LDL-C浓度,促进脂肪组织中LPL、Leptin基因表达,抑制肝脏中FASN基因表达。