卡特兰叶片原生质体分离条件的研究

试验以卡特兰叶片组织为材料,研究了预处理时间、酶液组合、酶解时间、酶液中甘露醇含量等不同因素对其原生质体分离的影响.结果表明,以1%的纤维素酶＋0.3%的果胶酶为混合酶液,11%的甘露醇为渗透压稳定剂,在25±1℃的条件下,pH为5.8的酶液组合中酶解8 h,获得的原生质体产量最高,可达8.9×10^6/g鲜重,存活率高达91.2%.     

卡特兰水培技术研究

为研究名贵兰花的水培技术，促进水培兰花的生产与消费，以兰科卡特兰为试材，从卡特兰水生根系诱导，营养液培养，筛选出水培卡特兰诱导根系的最适宜的NAA浓度和营养液配方，在培养的过程中，防治根腐烂和水藻的生成。结果表明，低浓度NAA（5mg/L）对诱导水生根系具有促进作用；KC营养液是水培卡特兰较好的营养液；加强根部通气有利于防止卡特兰根系的腐烂，在培养过程中添加2～3滴含氯霉素的滴眼液有助于防止藻类的生长。     

卡特兰ChCHS1和ChDFR1基因的克隆及表达分析

以卡特兰紫色花品种‘粉女郎’（Cattleya hybrid‘Pink Lady’）为材料，采用RT-PCR和RACE方法从花瓣中分离得到了一个查尔酮合酶（chalcone synthase, CHS）和一个二氢黄酮醇4-还原酶（dihydroflavonol 4-reductase, DFR）同源基因的cDNA全长，分别命名为ChCHS1和ChDFR1，GenBank登录号分别为KP171693和KP171694。序列分析结果发现：ChCHS1的cDNA全长1 508 bp ，编码394个氨基酸；ChDFR1基因的cDNA全长1 250 bp，编码350个氨基酸。同源性检索和生物信息学分析表明，这2个基因编码的蛋白都具有各自的功能位点和保守性特征多肽序列。氨基酸序列比对与系统进化树分析显示，ChCHS1、ChDFR1基因在兰科中与蕙兰、石斛兰关系最近，与百合科关系较近。相对实时荧光定量PCR结果表明，ChCHS1 和ChDFR1都在蕾期表达量最低，伴随花朵的开放，表达量逐渐上升，最终分别在花朵盛开期和接近开放时达到最高。     

卡特兰水培技术研究

为研究名贵兰花的水培技术，促进水培兰花的生产与消费，以兰科卡特兰为试材，从卡特兰水生根系诱导，营养液培养，筛选出水培卡特兰诱导根系的最适宜的NAA浓度和营养液配方，在培养的过程中，防治根腐烂和水藻的生成。结果表明，低浓度NAA（5mg/L）对诱导水生根系具有促进作用；KC营养液是水培卡特兰较好的营养液；加强根部通气有利于防止卡特兰根系的腐烂，在培养过程中添加2～3滴含氯霉素的滴眼液有助于防止藻类的生长。     

卡特兰的花芽形态分化

 采用石蜡切片法观察了卡特兰‘Green World’花芽的形态发生和结构发育过程。研究表明：在北方温室环境条件下,卡特兰花芽分化从7月初花序原基分化开始至9月下旬合蕊柱及花粉块形成历时约3个月。其过程可分为6个时期：未分化期、花序原基分化期、花蕾原基分化期、萼片原基分化期、花瓣原基分化期、合蕊柱及花粉块分化期。其中,花蕾原基分化期、合蕊柱及花粉块分化期历时长,分化较慢,其它时期历时短,分化较快。自萼片原基分化期开始,新生植株生长已基本停止。     

卡特兰属及其杂交属植物周年开花的栽培管理及盆花商业前景分析

通过对卡特兰属植物不同生长阶段(包括营养生长期、生殖生长期和休眠期)的特点和栽培管理的细致观察,根据在北京多年的养护栽培经验,并以2007～2010年间在温室中测得的月平均最高温和月平均最低温数据为基础,得出其在北京可以实现周年供花的结论.卡特兰属植物栽培历史悠久(栽培从19世纪开始至今),花色品种繁多,花期长,适应性强且能够达到全年有花.通过对这些优势的分析,提出了其作为洋兰商业盆花开发的可能性与前景.     

卡特丽亚兰的组织培养

以卡特丽亚兰(Cattleya)种子和茎尖为试验材料，研究卡特丽亚兰的组织培养。结果表明，种子萌发可采用不含激素的MS培养基，圆球茎增殖与分化可采用不同浓度的细胞分裂素与生长素的组合，其中以6-BA3mg／L NAA0．5-1．0mg／L的组合效果较佳，低浓度的生长调节剂Ms 6-BA0．5mg／L NAA0．4mg／L GA，0．2mg／L有利于芽丛快速增殖，添加适量浓度的椰子汁和活性炭有明显的增效作用，高浓度反而起抑制作用。生根培养基用MS NAA0．5mg／，L或IBA0．5mg／L可达到100％生根率。     

卡特兰组培快繁中影响原球茎成苗的几个因素探讨

以四季开花型卡特兰品种MC1原球茎为试材,探讨了基本培养基、激素和活性炭对原球茎成苗的影响.试验结果表明,基本培养基以Kyoto培养基最适合;激素以NAA 0.5 mg/L最有利于MC1原球茎形成壮苗;而活性炭对MC1原球茎根的形成有一定的抑制作用,但对叶的形成影响不大.     

广东地区中小株型卡特兰优良种质筛选

【目的】筛选适合广东地区亚热带环境条件下生长良好且具有较高观赏应用价值的中小株型卡特兰新优品种。【方法】以14个引进的卡特兰属种质为试材,在广州开展适应性栽培管理与比较筛选。通过连续多年的观察、性状测定和统计分析,系统评价不同种质的田间生长特性、观赏品质性状及抗性特点。【结果】11个候选种质在广东地区都有一定的适应性,较适合在广东地区栽培应用。其中筛选出的I级和II级种质,植株生长性更好、抗性更强、成花较容易、观赏价值较高,建议向市场推荐进行景观美化使用。【结论】从14个种质中优选出的I级种质卡特兰‘豹王’(C-3)、卡特兰‘金孔雀’(C-12)和卡特兰‘四季樱花’(C-14)3个杂交园艺品种,可作为适于广东地区栽培应用的优先推荐发展品种,建议对这些优势品种开展优先栽培生产和主导示范应用。同时对于其他非优势种质,根据育种需求作为种质资源进行保存。     

卡特兰ACO基因克隆与反义表达载体的构建

以卡特兰(Cattleya)花瓣为试材，提取其总RNA，并根据其他兰花的ACC氧化酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid oxidase, ACO)基因保守序列设计一对特异性引物，通过RT-PCR法克隆得到1条967bp的卡特兰ACO cDNA片断，共编码321个氨基酸残基。序列分析结果显示该克隆片断与已发表的其他兰花的ACO基因序列同源性很高，均在85%以上，尤其与原生种和其近亲属的同源性在95%以上。将克隆的卡特兰ACO片段反向连接到植物表达载体pBI121中CaMV35S启动子的下游，构建了卡特兰ACO基因的反义表达载体pBI121ACC，为进一步应用反义技术培养长花期卡特兰新品种奠定了基础，也为首次应用生物技术延长卡特兰花期做出了尝试。