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1.
喜树内生真菌的分离及其抗肿瘤活性菌株的筛选   总被引:1,自引:0,他引:1       下载免费PDF全文
以中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)株作为模型,用Resazurin法检测生长抑制率,对197株喜树内生真菌次生代谢产物进行体外抗肿瘤活性试验.结果发现,不同采集部位及不同地理环境分离出的菌株抗肿瘤活性有明显差异,其中以树皮中分离出的内生真菌具有抗肿瘤活性的比例最高.从采集的地理位置分析,由安徽黄山标本所分离的内生真菌抗肿瘤活性菌株比例高于其他2个采集地点.1株从黄山喜树果实上分离的菌株对CHO细胞的抑制率超过50%,初步鉴定为Rhizopycnis属真菌.  相似文献
2.
40株虫生真菌菌丝体提取物抗肿瘤活性的初步研究   总被引:1,自引:0,他引:1       下载免费PDF全文
以中国仓鼠卵巢(CHO)细胞株为模型,用Resazurin法检测生长抑制率,对40株虫生真菌菌丝体的提取物进行体外抗肿瘤活性试验.结果表明,黄山被毛孢Hirsutella huangshanensis菌株RCEF0851和RCEF0868菌丝体提取物对CHO细胞株的抑制活性最强,其乙酸乙酯和二氯甲烷混合溶剂提取物在100 μg·mL-1时对CHO细胞的抑制率分别为(98.58±1.12)%、(98.47±2.11)%;其甲醇提取物在100 μg·mL-1浓度时对CHO细胞的抑制率也分别达到(97.30±1.83)%和(96.28±1.96)%.复筛的结果表明,RCEF0851和RCEF0868菌丝体提取物对CHO细胞的半数抑制浓度IC50分别为29.24 μg·mL-1和28.87 μg·mL-1.另外,环链拟青霉Paecilomyces cateniannulatus菌株RCEF0508菌丝的乙酸乙酯和二氯甲烷混合溶剂提取物在100 μg·mL-1时对CHO细胞的抑制率也达(95.96±2.01)%,这些菌株值得进一步深入研究.  相似文献
3.
[目的]探讨转基因下游MAR在稳定转化的CHO细胞中对基因表达的调控作用。[方法]将PCR扩增得到的人β-珠蛋白MAR插入到真核表达载体pCATG的下游,构建转基因表达盒3’端含MAR的表达载体。酶切鉴定正确后,转染CHO细胞,G418筛选出稳定转化的细胞株,ELISA分析转基因的表达水平,半定量PCR分析转基因相对拷贝数。[结果]结果表明,表达盒3’端含MAR序列能使转基因表达水平降低,其基因拷贝数则有一定程度的增加。转基因下游β-珠蛋白MAR在一定程度上能抑制外源基因的表达水平;外源基因表达量与基因拷贝数不成正比,未呈现出“拷贝数依赖性”。[结论]该研究结果为进一步研究MAR的调控机制奠定基础。  相似文献
4.
从T载体上得到的目的基因和dhfr共扩增基因真核表达载体构建了pCI-PrP102。纯化后的重组质粒通过脂质体转染CHO/dhfr-细胞,经MTX加压筛选获得稳定表达的细胞株,间接免疫荧光试验检测到目的蛋白的表达。  相似文献
5.
在前期建立的流加培养工艺的基础上,考察培养过程中的pH值对流加培养过程的影响,明确了过程控制参数pH值与产品关键质量属性(critical quality attributes,CQAs)间的联系,建立了产物质量属性和过程操作属性间的关系,并确认pH值为抗体融合蛋白生产工艺中的关键控制参数。结果表明,流加培养过程随着培养pH值的提高,抗体融合蛋白的生物学活性呈一定程度的下降趋势,但唾液酸含量却呈明显的上升趋势;此外,在pH值6.9和pH值7.0的条件下培养过程中的最大细胞密度、活力、蛋白表达量均优于其他条件,确定6.95±0.05为过程的控制pH值。将此培养工艺放到大200 L中试生产规模,结果与2 L反应器的结果基本一致。  相似文献
6.
以中国仓鼠卵巢CHO细胞株作为模型,用Resazurin法检测生长抑制率,对42株虫生真菌次生代谢产物进行体外抗肿瘤活性试验.结果发现有10株菌株对CHO细胞的抑制率超过了50%.并进一步用不同溶剂对这10株虫生真菌次生代谢物质进行提取,并进行体外抗肿瘤活性试验,结果发现菌株RCEF0800的甲醇相活性最高,对CHO细胞的IC50为97.80 μg·mL-1.  相似文献
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