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介绍了应用焦锑酸钾沉淀法定位Ca2+的方法,以及在梨生理研究中的具体步骤和应用效果。结果表明:在固定液中加焦锑酸钾处理进行制样,梨树不同器官或组织细胞中的自由态Ca2+,都能生成焦锑酸钙在原部位沉淀,经染色后在电子显微镜下呈现出黑色颗粒,而固定液中不加焦锑酸钾处理的则没有这种颗粒。再进一步用Ca2+的专一性鳌合物EGTA进行处理,检查这些黑色颗粒是否消失,以证实黑色颗粒就是Ca2+,从而可对Ca2+进行定位标记。在不同的组织细胞及同一组织细胞在不同的生理时期,其被标记的Ca2+密度和场所是不同的,可通过其动态变化来探讨它的作用机理。还对用此方法定位Ca2+的注意事项进行了讨论。 相似文献
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AIM: To investigate changes of Ca2+ activated potassium channels (KCa) in autogenous vein grafts. METHODS: The contraction of venous ring was measured by means of perfusion in vitro. The intimal proliferation and proliferation of cultured smooth muscle cells (vascular smooth muscle cells, VSMCs) were observed by the means of computerised image analysis and MTT method, respectively. Furthermore, whole cell mode of patch clamp was used to record KCa of VSMCs isolated from autogenous vein grafts. RESULTS: 1 week after transplantation there were no significant differences of contraction and intimal relative thickness between autogenous vein grafts and control. Contraction and intimal relative thickness of autogenous vein graft were significantly increased 2 weeks after transplantation (P<0.05, n=8 vs control), and they were more enhanced 4 weeks after vein transplantation (P<0.01, n=8 vs control). TEA (blocker of Ca2+ activated potassium channels) increased MTT A490 value of VSMCs from femoral vein in a dose-dependent manner (P<0.05, n=8). KCa current density was significantly attenuated in VSMCs from autogenous vein grafts 1-4 weeks after transplantation (P<0.05, n=5). CONCLUSION: KCa was inhibited in autogenous vein graft, which accounted for vasospasm and intimal proliferation. 相似文献
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测定不同类型甜菜品种各生育时期根中Mg^2+-ATP酶活性、可溶性总糖、可溶性蛋白含量和产量、含糖率。结果表明,在幼苗期和叶丛繁茂期,Mg^2+-ATP活性呈先上升后下降趋势,从块根增长期直至糖分积累期,Mg^2+-ATP酶的活性逐渐增强,并保持在全生育期最高水平。不同类型品种间存在差异,在各生育时期高糖型品种Mg^2+-ATP酶活性较强。根中Mg^2+-ATP酶活性与根中可溶性总糖呈正相关,与甜菜根的成熟进程正相关;Mg^2+-ATP酶活性与可溶性蛋白质舍量呈负相关,对可溶性糖的积累方面,二者的作用刚好相反。高糖型品种的可溶性总糖含量较高.相应的根中蛋白质含量很低。Mg^2+-ATP酶活性较高. 相似文献
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以江苏扬州市江都区7年生女贞人工林为对象,研究密度调控对其土壤铵态氮(NH4+-N)和硝态氮(NO3--N)含量剖面分布特征及季节变化的影响。结果表明:不同调控密度下女贞人工林土壤NH4+-N和NO3--N含量均随着土层深度的增加而逐渐降低,且表现出明显的季节变化;3种密度调控下土壤NH4+-N 含量均是秋冬两季较高,春季最低,夏季又有明显回升,且3种密度中的2275株/hm2下NH4+-N含量在4个季节均高于另外2种密度;土壤NO3--N 季节变化与NH4+-N大体一致,在春季含量最低,但不同密度间变化趋势差异较大;土温、含水量及有机质均与土壤NH4+-N和NO3--N含量存在显著的相关关系(p<0.05),且在夏季均达到极显著相关(p<0.01)。 相似文献
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[目的]建立稳定快速的慢病毒转基因羊DNA水平检测方法。[方法]采集初生转基因羔羊的子叶、脐带、尾组织以及死亡羔羊的全身各组织,提取基因组DNA作为模板进行PCR检测,以Follistatin基因N+D1片段特异性引物进行PCR检测;同时,对慢病毒载体的CMV启动子、5’-LTR等结构元件进行PCR检测;提取死亡羔羊的全身组织以及转基因羔羊的活体肌肉组织总RNA,进行RTPCR检测。[结果]采用试剂盒提取的基因组DNA比常规方法提取的DNA快速、高效,且更易被检测,扩增时的引物采用载体上游与目标基因下游的组合大大增加了检测的特异性,避免了内源性目标基因的干扰而造成假阳性;初生转基因羔羊的尾组织可作为PCR检测的组织样品,其结果可靠、准确;对CMV启动子及5’-LTR等结构元件作PCR检测为转基因动物的安全性考察提供了数据,同时验证了转基因羔羊目的基因的检测结果;对转基因羔羊肌肉组织提取总RNA后进行RT-PCR检测,其中有3只羔羊没有检测到转录产物,其他均有转录。[结论]该研究建立的转基因绵羊PCR检测方法高效、快速且准确,为进一步蛋白水平检测提供试验依据,也为建立转基因绵羊系统性多层次的检测方法奠定基础,还为转基因绵羊的安全监测提供了稳定的技术平台。 相似文献