组织块贴附法原代培养小鼠皮肤细胞方法的改进

试验研究一种简易的小鼠皮肤细胞组织块原代培养方法.从幼龄小鼠获得皮肤组织块,用D-Hanks缓冲液和DMEM培养液洗涤组织块,将其剪至1mm3左右大小,胶头滴管吸取组织块悬液1～2 ml,注入培养瓶,然后匀速而缓慢地翻转培养瓶,于CO2培养箱中培养24 h后,再翻转培养瓶继续培养.结果表明,该方法接种的组织块有15%能迁移牛长出细胞单层.并对细胞长期培养的行为进行了观察.     

不同分化时期牛脂肪细胞抵抗素mRNA丰度变化

选取犊牛大网膜脂肪组织,进行牛前脂肪细胞的单层贴壁培养,在细胞接种4、6、8、10、12、14、16d分别提取细胞总RNA,进行RT-PCR反应,以β-actin为定量内参照,对抵抗素mRNA的丰度进行定量分析,观察在犊牛前脂肪细胞向脂肪细胞分化过程中抵抗素mRNA的表达规律。结果表明：在犊牛前脂肪细胞分化4～12d,抵抗素mRNA丰度逐渐降低,而分化成熟后14～16d有所回升。     

家蚕悬浮培养细胞系的建立及悬浮培养

通过对家蚕细胞系BmN进行多轮选育 ,选拔出具有较好悬浮性能的细胞株 ,命名为BmN ZJ S ;并在自制转瓶系统中对其进行悬浮培养。实验表明 ,家蚕细胞BmN ZJ S在悬浮培养条件下的细胞扩增倍数为 2 9,最高细胞密度为 4 3 5× 1 0 5个 /mL(细胞活性大于 98%) ,对数生长期延长 2 4h,接近或优于贴壁培养条件下的相应值。     

两种培养条件下重组杆状病毒表达小反刍兽疫病毒N蛋白的丰度

为了在重组杆状病毒上获得高丰度表达的小反刍兽疫病毒(PPRV)N蛋白,利用细胞贴壁培养和悬浮培养法培养重组杆状病毒Vbacmin-PPRV-N 120 h,用显微镜观察不同时间点细胞形态变化,随后在培养24、48、72、96、120 h时分别收集培养液,以ELISA方法检测PPRV N蛋白表达量,并用SPSS软件对数据...     

成年鸡原代肝细胞的原位分离和长期培养

为探讨成年鸡原代肝细胞的分离条件和长期培养过程中的形态学特征,本试验采用改进胶原酶二步原位灌流法分离高活性鸡原代肝细胞,并优化培养液,得到肝细胞长期培养的初步条件.结果显示,分离得到的活性肝细胞达94%,培养3 d细胞活性最强;贴壁培养时可见到肝细胞较为明显的分化过程.     

动物细胞培养及应用

本文简要介绍了动物细胞培养的发展过程,并详述了动物细胞的贴壁培养法、悬浮培养法和几种较常用的大规模培养法,如空心纤维法、微襄法、微载体法等。同时较详尽地介绍了在其生命科学领域中的应用情况。     

胎牛血清和新生牛血清体外培养动物细胞的效果比较

为了比较进口胎牛血清、国产胎牛血清和国产新生牛血清的细胞培养效果,以2批进口胎牛血清、3批国产胎牛血清和2批国产新生牛血清为试验材料,采用细胞贴壁传代培养、最大增殖浓度和倍增时间以及集落形成率3种方法,比较了7批供试血清对VERO、CHO-K1、MDCK和Hela 4种细胞的培养效果。结果表明:连续传代培养时所有牛血清均有较好的促细胞生长的效果;进口胎牛血清、国产胎牛血清和国产新牛血清对4种细胞的平均最大增殖密度为67.8×104、62.1×104和64.8×104 cfu·mL-1,平均倍增时间为22.2、22.5和22.7h;对VERO、CHO-K1和Hela细胞的平均集落形成率为59.2%、57.6%和50.9%。3种牛血清对群体性细胞培养时效果差别不明显,对单细胞克隆培养时胎牛血清优于新生牛血清。     

栅藻贴壁培养处理沼液效果的研究

以栅藻(Scendesmus dimorphus)为研究对象,将微藻培养和养猪沼液废水处理相结合,通过贴壁培养在处理沼液废水的同时耦合藻类油脂生产,并比较了栅藻贴壁培养与悬浮培养藻细胞生长情况及对N的利用效率,为藻类生物燃料生产及降低沼液废水处理成本提供理论依据。结果表明:贴壁培养下藻细胞生物产率为6.15 g·m-2·d-1,高于栅藻悬浮培养的生物产率5.48 g·m~(-2)·d~(-1);贴壁培养下藻细胞对N的吸收率为85.23%,高于悬浮培养N的利用率77.84%。在初始NH_3-N、TP及COD浓度分别为281.2、29.1、551 mg·L~(-1)的沼液废水中贴壁培养栅藻,藻类生长状况与正常BG11培养相近,生物产率分别为6.26 g·m~(-2)·d~(-1)与6.23 g·m~(-2)·d~(-1);油脂含量相差不大,分别占细胞干重的34.6%、35.2%;沼液废水中NH_3-N、TP及COD去除效率分别为99.04%、73.06%和72.32%。     

奶牛乳腺组织两种不同培养体系的比较

以液氮冷冻泌乳奶牛乳腺组织为研究材料，对奶牛乳腺组织的旋转培养法与贴壁培养法进行了比较研究。乳腺组织的培养条件为：DMEM／F12培养液中含2μg/mL氢化可的松、5μg／mL转铁蛋白、10μg／mL胰岛素和10％的胎牛血清。通过台盼蓝染色观察（旋转培养法）、培养组织观察（贴壁培养法）、测定MTT二甲基噻唑二苯基四唑嗅盐活性和基因组DNA降解成为1000bp以下核苷酸片段量来比较两种方法的优缺点。结果发现，旋转培养法在120h后组织和细胞成活率都在80％以上，MTT与基因组DNA降解值显示存72h内组织活性最高；贴壁培养法组织、细胞在24h开始贴壁，到48h后完全贴壁成活，72h后组织具有明显分泌活性，MTT值与基因组DNA降解值显示，72h以后奶牛乳腺组织已表现出分裂增殖能力，组织死亡率明显下降，96h后培养组织的增殖能力与死亡率都达到稳定状态。奶牛乳腺组织贴壁和旋转两种培养方法在72h内都可以保持奶牛乳腺组织基本活性。     

小鼠成肌细胞培养方法的建立与优化

通过对小鼠成肌细胞C2C12细胞培养,优化细胞的培养方法和培养条件,提出了培养C2C12细胞的最佳条件.获得大量贴壁培养的小鼠成肌细胞C2C12,将广泛地应用于生物医学、肌肉再生临床医学、动物肉质性状相关研究及多种与骨骼肌相关的因子机制研究.