全麻机理的研究进展

全身麻醉(General anesthesla)是麻醉药经吸入、静脉、肌肉、口服或直肠灌注等途径送入入或动物体内，对中枢神经系统产生广泛的抑制作用，从而使入或动物呈现可逆的感觉和意识消失、痛觉迟钝或消失、神经反射及肌肉活动不同程度受到抑制的一种状态，这种麻醉方法称为全身麻醉。     

膜片钳技术及其应用

膜片钳技术是在电压钳基础上发展的，将尖端为1μm的玻璃微电极吸附到细胞表面，使微电极与细胞膜形成高阻封接，从而可记录到膜上pA级的离子通道电流，目前已发展了多种记录模式，对细胞进行电压和电流钳制，以观察各种离子通道及其调控。此外膜片钳技术与胞内纤维荧光测钙技术、膜电容监测技术、碳纤维电极局部电化学微量检测技术、逆转录多聚酶链式反应技术（PCR）结合，在药理学、病理学、神经科学、脑科学、细胞生物学和分子生物学等生物科学方面，得到越来越广泛的应用。     

中国沙棘子叶叶肉细胞电流全细胞记录的研究

实验得出适合膜片钳实验的耐盐木本植物中国沙棘子叶原生质体的游离条件,即取当天脱壳的子叶,放入渗透浓度为0.88 mol/L,pH为5.8,酶液的组分为10 g/LCellulase R-10、0.5 g/LPectolyase Y-23、1.5 g/LMacrozymeR-10、1 g/L Hemicellulase、1 g/L BSA、1 g/L PVP-40、2 mmol/L CaCl2、10 mmol/L Mes和5 mmol/L Vc的溶液中,在26℃、黑暗条件下,静置4 h。并且利用Multiclamp 700B放大器和Clampex 9.2软件,记录到了该原生质体质膜全细胞内向K 通道电流(-459.137 pA及-290.527 pA)和非选择性阳离子通道的外向电流(8.036 pA)。这为沙棘属木本植物细胞的电生理特性及其耐盐性机制关系的研究奠定基础。     

大鼠心肌膜、肺、肠黏膜微血管内皮细胞静息膜电位的检测

比较大鼠心肌膜、肺、肠黏膜微血管内皮细胞静息膜电位,为内皮细胞电生理特性研究提供数据。用植块法培养大鼠心肌膜、肺、肠黏膜微血管内皮细胞,采用膜片钳放大器全细胞记录模式,分别测定3种细胞的静息膜电位。结果表明:心肌膜微血管内皮细胞的静息膜电位为(-24±4)mV;肺微血管内皮细胞的静息膜电位为(-27±6)mV;肠黏膜微血管内皮细胞静息膜电位为(-18±4)mV。3种不同组织来源的微血管内皮细胞在静息膜电位上存在异质性。     

SHR大鼠心室肌细胞分离方法改进及其L-型钙电流的观察

文章探索建立简单可靠的SHR大鼠心室肌细胞的分离方法,提高细胞存活率和膜片钳试验成功率。采用Langendorff灌流装置,离体心脏逆向灌流,分离单个SHR大鼠心室肌细胞。使用膜片钳全细胞记录技术,记录大鼠心室肌细胞L-型钙电流。通过对细胞的观察发现,细胞呈长杆状,横纹清晰,细胞膜结构完整。膜片钳全细胞记录到典型的L-型钙电流,激活电位-40 mV,峰值电位0 mV,反转电位+50～+60 mV,呈现出电压依赖性。观察到的L-型钙电流可被钙通道阻滞剂维拉帕米抑制。结果表明,采用的大鼠心肌细胞分离方法可分离制备出适合膜片钳电生理观察的心肌细胞标本。     

水杨酸对蚕豆保卫细胞气孔运动及质膜内向K+电流的影响

【目的】研究逆境信号水杨酸(SA)刺激条件下,蚕豆气孔保卫细胞中H2O2的产生及其对气孔运动的影响。【方法】以蚕豆为材料,利用表皮条生物分析、膜片钳等方法研究SA诱导蚕豆气孔关闭过程中质膜内向K+电流的变化。【结果】SA可以浓度依赖的方式诱导蚕豆叶片的气孔关闭。质膜NADPH氧化酶抑制剂二亚苯基碘(DPI)可削弱SA作用的45%~60%。借助膜片钳手段记录SA处理条件下全细胞内向K+电流的变化,胞外0.1mmol/L SA处理后20 min可抑制内向K+电流的70%左右。电极液中10μmol/L DPI作用20 min可逆转SA抑制全细胞内向K+电流的46%左右。【结论】SA诱导的气孔关闭可能与H2O2的产生有关,DPI逆转SA对保卫细胞内向K+电流的抑制作用暗示,H2O2可能通过抑制质膜内向K+电流而介导SA诱导的气孔关闭过程。     

STD-1型灌流系统的研制与应用

目的为解决目前商品化灌流系统的价高,通道易发生堵塞且维修、保养费时费事,特研制了一种稳定、高效的四通道灌流系统(简称STD-1型)。方法制作方法分为2部分:⑴四通道灌流部分以有机玻璃制作:⑵密封瓶部分以橡胶塞打孔插入玻管并连接胶管后连接装置,最后用膜片钳全细胞记录的设备对STD-1型灌流系统进行效果检测。结果与结论自制的STD-1型灌流系统浴槽内的液面稳定且液体置换迅速,不易发生堵塞,且维护简便,经我室多年使用效果良好。     

中华绒螯蟹眼柄端髓X器官神经分泌细胞钙激活钾通道研究

采用膜片钳的内面向外式记录了中华绒螯蟹眼柄端髓X器官(MTXO)神经内分泌细胞钙激活钾通道活动。结果表明,在对称性高钾溶液中(200mmol.L-1),钙激活钾通道的单通道活动为快速开放的矩形方波,时程长短不一,通道电导为(213.4±11.2)pS。在-80~ 80mV钳制电压下,通道电流幅度及开放概率呈现明显的电压依赖性;随浴液游离Ca2 浓度的增加,通道的开放概率和开放数目增加,表现出明显的钙敏感性。药物敏感试验结果显示,80mmol.L-1四乙胺(TEA)可完全阻断通道活动。表明中华绒螯蟹眼柄端髓X器官(MTXO)神经分泌细胞钙激活钾通道(BKCa)具有大电导、电压依赖性、Ca2 敏感性和四乙胺(TEA)敏感性等特征。     

4种中药成分对犬瘟热模型犬支气管平滑肌细胞Kv通道的作用

应用细胞膜片钳技术，分别对正常对照组、犬瘟热（CD）组、川芎嗪组、黄芩甙组、黄芪组、黄连素组犬支气管平滑肌细胞（BSMC）电压门控性钾通道（Kv）动力学指标、静息膜电位（Em）、静息膜电容（Cm）和电流密度（pA／pF）进行了测定。结果表明，CD组BSMC膜Kv活性显著降低。川芎嗪、黄芩甙、黄芪3种中药（成分）均能不同程度拈抗CD模型犬BSMC膜Kv通道活性的抑制，促进支气管平滑肌细胞膜Kv通道的开放。黄芩甙具有显著提高支气管平滑肌细胞膜Kv通道活性，促进支气管平滑肌舒张作用，在4种中药（成分）中表现突出。