三角帆蚌细胞周期蛋白基因筛选及其表达分析

细胞周期蛋白(cyclin)对细胞生长繁殖起到关键的调节作用。该研究采用高通量测序技术,构建了三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)转录组文库,进行了cyclins基因筛选与生物信息分析,通过qRT-PCR技术,探讨其在不同组织(闭壳肌、内脏团、外套膜、斧足、心脏、血液、鳃、性腺)与性别中的表达特征。转录组测序共得到257 457条unigene(N50为1 796 bp),注释率为86.7%;通过分析,cyclin A、cyclin D2、cyclin E被筛选出,且cyclin A、cyclin D2与cyclin E蛋白的氨基酸序列均与美洲牡蛎(Crassostrea virginica)、太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)具有较高相似性。实时荧光定量分析结果表明,cyclin A、cyclin D2、cyclin E在三角帆蚌各组织中均有表达,且存在显著的组织差异:cyclin A、cyclin E基因在性腺中表达量显著高于其他组织(P<0.05),在斧足中表达量最低;cyclin D2基因在鳃中表达量最高(P<0.05),在血液中表达量最低。在同一组织的不同性别之间:cyclin A基因在性腺、闭壳肌、心脏、血液中表达存在显著性别差异(P<0.05);cyclin D2在外套膜、心脏、性腺中的表达具有显著(P<0.05)的性别差异;cyclin E在性腺、斧足、鳃、心脏中的表达具有显著(P<0.05)的性别差异;cyclin A、cyclin E基因在雌性心脏和性腺中表达量显著(P<0.05)高于雄性,而cyclin D2反之(P<0.05),cyclin D2基因在雌性外套膜表达量显著高于雄性(P<0.05),暗示cyclin A、cyclin E与性腺发育关系密切,cyclin D2可能与鳃损伤修复有关。本研究初步探究了三角帆蚌cyclin A、cyclin D2、cyclin E基因的功能,为建立三角帆蚌细胞系提供了分子基础。     

2细胞期胚胎采集时间对电融合方法体外制备牛四倍体胚胎效率的影响

通过检测牛早期胚胎分裂速率的时间分布,并将体外受精后0~34 h与26~30 h时间段内采集的2细胞期胚胎分别作为电融合对照组与电融合试验组。将对照组与试验组的2细胞期胚胎分别用于电融合,并将电融合后的胚胎继续体外培养至囊胚期,检测并对比分析2组胚胎的融合率、分裂率、囊胚率和四倍体制备率。结果显示,牛2细胞期胚胎在体外受精后28~30 h其内分裂速率达到最高峰(18.9%)。电融合对照组的融合率、分裂率略高于试验组胚胎(85.2%vs.84.2%,82.2%vs.80.9%),试验组的囊胚率略高于电融合对照组(45.4%vs.44.8%),但差异均不显著。而电融合试验组的四倍体制备率显著高于电融合对照组(28.3%vs.14.5%)。结果表明,牛2细胞期胚胎的采集时间对电融合方法体外制备牛四倍体胚胎的效率有显著影响。     

FSH对体外培养仔猪睾丸支持细胞CyclinA2表达的影响

本试验利用体外培养的未成熟仔猪睾丸支持细胞,应用实时荧光定量PCR研究了FSH对CyclinA2 mRNA表达的影响。结果发现促卵泡素(FSH)以时间和浓度依赖的方式促进了CyclinA2 mRNA的表达(P<0.05);Forskolin促进了支持细胞CyclinA2 mRNA的表达,而Rp-cAMP、Verapamil和U0126都抑制了其表达(P<0.05),但这3种抑制剂单独作用时对CyclinA2 mRNA的表达与对照相比无显著差异(P>0.05)。这表明FSH以浓度和时间依赖的方式诱导了CyclinA2 mRNA的表达,并通过cAMP、Ca2+内流和细胞外信号调节的蛋白激酶1/2(ERK1/2)通路调节仔猪睾丸支持细胞CyclinA2 mRNA的表达。     

猴头菌子实体提取物对人肺癌细胞SPCA-1的抑制作用

猴头菌(Hericium erinaceus)子实体的醇提物用不同极性有机溶剂分部提取,得到石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇分部,其中仅石油醚分部能抑制SPCA-1细胞增殖和促进其释放ROS(reactive oxygen species),对石油醚分部的进一步研究发现石油醚分部可诱导SPCA-1细胞早期凋亡和降低G_0/G_1期细胞数量。     

细胞周期及其调控研究进展

文章综述了细胞周期素（Cyclin）、细胞周期蛋白依赖激酶（CDK）和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子（CKI）在细胞周期中的作用和调控途径、机制及其一些影响调控的因素。     

麦冬水提物对猫肾细胞的影响研究

麦冬是我国传统中药之一,兼备保健和治疗作用。为了探究麦冬能否应用在宠物食品中,本试验以不同浓度的麦冬水提物(3.91~8000μg/mL)为受试药物,从细胞的形态、增殖、凋亡及周期4个方面对猫肾细胞(F81)进行安全性评价。结果表明:在试验浓度范围内,麦冬水提物没有抑制F81的增殖,且在3.91~62.5μg/mL的浓度范围内,凋亡及周期结果经统计学分析均无显著性差异,与对照组接近,且细胞形态良好。说明在一定浓度范围内,麦冬水提物对F81细胞无毒害作用。     

与生长激素相关的高等植物细胞周期生化调控

高等植物细胞周期是细胞生物学上的重要研究领域。细胞周期受遗传和发育影响因素的调控。本文综述高等植物细胞周期中涉及到细胞周期关卡GO-G1-S期和G2-M期的激素调控。最新研究成果证明玉米素、腺嘌呤、激动素、赤霉素和脱落酸等通过细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶及细胞周期关卡的脱磷酸化控制细胞周期。植物D-型细胞周期蛋白也已被证明在细胞周期调控中起关键作用。本文有关细胞周期的研究综述对植物细胞和发育生物学研究有参考价值。图3参61。     

The biochemical control of the cell cycle by growth regulators in higher plants

The cell cycle is an important research field in cell biology and it is genetically and developmentally regulated in animals and plants. The aim of this study was to review knowledge about the biochemical regulation of the cell cycle by plant growth regulators through molecular checkpoints that regulate the transition from G0-G1-S-phase and G2-M in higher plants.Recent research has shown that zeatin treatment led to the up-regulation of CycD3 in Arabidopsis. Benzyladenine treatment can also shorten the duration of S-phase through recruitment of latent origins of DNA replication. Kinetin is involved in the phosphoregulation of the G2-M checkpoint; the major cyclin-dependent kinase (Cdk) at this checkpoint has recently shown to be dephosphorylated as a result of cytokinin treatment, an effect that can also be mimicked by the fission yeast Cdc25 phosphatase. Gibberellic acid (GA) treatment induces internode elongation in deepwater rice, this response is mediated by a GA-induced up-regulation of a cyclin-Cdk at the G2-M checkpoint. Recent evidence has also linked abscisic acid to a cyclin-dependent kinase inhibitor. A new D-type cyclin, recently discovered in Arabidopsis may have a key role in this process. A brief review on plant growth regulator-cell cycle interfacing during development and a cytokinin-induced continuum of cell cycle activation through the up-regulation of a plant D-type cyclin at the G1 checkpoint and the phosphoregulation of the Cdk at the G2/M checkpoint had been concluded. This review could be valuable to research on cell and developmental biology in plants.     

17β-雌二醇对AC细胞活性、细胞周期和超微结构的影响

通过免疫荧光获得雌激素α、β受体在体外星形胶质细胞（Acrocyte,AC）中表达的形态学证据;CCK-8法获得脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）激发AC的适宜浓度。在此基础上,研究了17β-雌二醇（17β-estradiol,E2）对AC的细胞活性、细胞周期和超微结构的影响。结果显示：E2作用AC 48h,10nmol/L E2可提高AC细胞活性和G2＋S%（P〈0.05）,而100,1 000nmol/L E2可降低AC细胞活性（P〈0.05）,100nmol/L E2还可降低G2＋S%（P〈0.05）;100nmol/L E2作用AC 24,48,72h,均可降低AC细胞活性和G2＋S%,以作用48h时抑制作用最强（P〈0.05）;10nmol/L E2可引起AC线粒体数量增加,细胞核分裂增多,但线粒体、粗面内质网结构正常,而100nmol/L E2可导致AC线粒体肿胀或空泡化,粗面内质网扩张或断裂。结果表明,低浓度（10nmol/L）E2促进AC增殖;高浓度（100,1 000nmol/L）E2抑制AC增殖。